基于LAMP技术的转基因玉米Bt176相关基因检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN110564822B

    公开(公告)日:2023-06-20

    申请号:CN201910894260.0

    申请日:2019-09-20

    摘要: 本发明属于转基因玉米相关成分真伪鉴定方法,具体地说是利用环介导等温扩增(LAMP)技术检测玉米内源ivr基因和转基因玉米品系Bt176中的外源抗虫cry1Ab基因的方法。该方法根据玉米内源ivr基因和转基因玉米品系Bt176中的外源抗虫cry1Ab基因设计了特异性的LAMP引物,并提供了配套的试剂盒、检测方法和用途。本发明结合可视化报告方式,以中性红pH指示剂进行比色检测可实现一步可视化的比色检测。本发明在等温条件下进行,无需精密的变温设备,便捷、准确、分辨率高,检测过程无需开盖操作,适合于现场快速检测。

    一种手性氯代砜亚胺类化合物及其衍生物的制备方法

    公开(公告)号:CN114989058A

    公开(公告)日:2022-09-02

    申请号:CN202210624958.2

    申请日:2022-06-02

    摘要: 本发明公开了一种手性氯代砜亚胺类化合物及其衍生物的制备方法,特征是在手性磷酸的催化下,式(I)类化合物与不同类型氯代试剂(II)反应,得到手性氯代砜亚胺式(III)类化合物。以手性氯代砜亚胺(III)作为反应的底物,分别与不同胺试剂,不同醇钠试剂,不同格氏试剂反应,可以制备手性砜亚胺酰胺(IV或V)、手性砜亚胺酯(VI)、手性砜亚胺(VII)类化合物。手性氯代砜亚胺的衍生物手性砜亚胺酰胺(IV或V)、手性砜亚胺酯(VI)、手性砜亚胺(VII)具有较高的稳定性、良好的理化性质、结构的多样性以及较高的生物活性。因此本发明为相关含硫药物的开发奠定了基础,具有经济实用性和工业应用前景。

    一种手性氮取代四氢喹喔啉的制备方法

    公开(公告)号:CN114478405A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202210068649.1

    申请日:2022-01-20

    发明人: 李光勋 唐卓 黄金

    摘要: 本发明公开了一类手性氮取代四氢喹喔啉类化合物的制备方法,特征是手性磷酸催化下,式I类化合物和式II类、式III类化合物通过一锅反应:得到具有IV结构式的化合物或其对映体、消旋体、非对映异构体。其中,R1、R6、R7各自独立地选择各种烷基、芳基;R2、R3、R4、R5各自独立地选择各种烷基、烷氧基、羟基、杂环、苯基、烯烃、取代苯基、卤素、氢;R8为烷基、芳基、烯丙基。采用本发明方法易制得高光学纯度(ee值>99%)的手性氮取代四氢喹喔啉类化合物。本发明为相关生物活性分子的合成与筛选、相关药物的制备提供经济可行的方法。

    基于重组酶的环介导扩增方法

    公开(公告)号:CN110684826A

    公开(公告)日:2020-01-14

    申请号:CN201911129747.6

    申请日:2019-11-18

    发明人: 唐卓 陈刚毅 董娟

    IPC分类号: C12Q1/6844

    摘要: 本发明属于分子生物学技术领域,提供一种基于重组酶和单对引物的环介导扩增哑铃状结构形成方法及由此形成的新的核酸环介导扩增的方法(RALA)。本发明仅依赖重组酶和单对引物即可实现环介导扩增哑铃状结构的形成,具体为利用重组酶和一对单链引物形成的复合物打开双链DNA后使引物与模板链互补配对,通过聚合酶的延伸及单链置换作用获得哑铃状结构,依赖形成的哑铃状结构便可引发下游的环介导扩增。该方法引物设计简单,可有效控制体系复杂度和非特异扩增。

    一种体内筛选的剪切RNA的锤头状核酶

    公开(公告)号:CN109609505A

    公开(公告)日:2019-04-12

    申请号:CN201910030366.6

    申请日:2019-01-14

    发明人: 唐卓 黄鑫 董娟

    IPC分类号: C12N15/113

    摘要: 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及一种体内筛选核酶的新方法,以及通过该方法筛选得到的具有催化RNA剪切活性的核酶。该体内筛选方法以毒蛋白ibsC为报告基因,通过体内转录得到的核酶对ibsC对应的mRNA的剪切作用控制毒性蛋白的表达以影响细胞存活,从而筛选获得活性核酶。该方法无需复杂的体外筛选步骤,最大程度降低无活性的RNA序列对筛查成功率的影响,为核酶进化提供了简单、高效的通用细胞内筛选平台。该方法筛选获得的核酶与底物的作用方式主要为分子间剪切模式,适用于胞外、原核细胞内、真核细胞内针对目标底物分子的位点特异性的催化剪切,实现对选定基因的表达下调。

    一种等温解开双链DNA及制备单链DNA的方法

    公开(公告)号:CN106701738A

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201610987745.0

    申请日:2016-11-10

    发明人: 唐卓 陈刚毅

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明属于分子生物学技术领域,提供一种等温解开双链DNA的方法以及基于该方法制备单链DNA的方法。等温解开双链DNA的技术方案为利用重组酶结合单链DNA探针形成复合物,复合物识别双链DNA中与单链DNA探针同源的序列并侵入双链DNA,从而实现双链DNA的等温开链,随后单链DNA探针和双链中一条链互补配对,而单链结合蛋白结合另一条链稳定开链结构。基于该方案及单链DNA探针3’‑末端可以被连接酶和聚合酶等酶识别的特性,本发明还提出了制备单链DNA的方案,并详细介绍了通过连接酶或延伸酶制备单链DNA的方案。以上技术方案均可在等温条件下完成,且无需ATP循环系统,甚至ATP可被dATP替代,所用酶来源广泛、易于获得,为等温技术以双链DNA作为研究对象提供了一个通用平台。

    中成药中生物类伪品DNA的PCR检测方法

    公开(公告)号:CN103131781B

    公开(公告)日:2015-10-28

    申请号:CN201310067246.6

    申请日:2013-02-28

    发明人: 唐卓 陈蓉

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明涉及分析检测技术领域,公开了一种利用聚合酶链式反应(PCR)检测中成药中生物类伪品DNA的方法。具体包括中成药中生物类样品DNA的提取、PCR反应和PCR扩增产物分析。本发明在普通PCR的基础上,建立巢式PCR反应方法,可快速、准确、灵敏地检测中成药中的生物类伪品DNA,为中成药的质量控制提供简单快速有效的方法。

    转BAR基因农作物的可视化检测方法

    公开(公告)号:CN102787175B

    公开(公告)日:2015-07-15

    申请号:CN201210332675.7

    申请日:2012-09-11

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,涉及一种转基因农作物的检测技术,具体涉及转BAR基因农作物的可视化检测方法。利用在PCR体系中加入DNAzyme标记的检测BAR基因的特异性探针,用正反引物对BAR基因进行扩增,利用核酸聚合酶5’-3’外切酶活性将探针中的DNAzyme标记释放,通过检测PCR产物中释放出的标记物来判断该样品是否为转基因样品。本发明具有高效、简便、成本低等特点。