一种仿生矿化包埋固定双酶的杂化载体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116536299A

    公开(公告)日:2023-08-04

    申请号:CN202310563082.X

    申请日:2023-05-18

    Abstract: 本发明公开了一种仿生矿化包埋固定双酶的杂化载体,所述杂化载体为核壳结构,其壳为明胶和磷酸钙的复合物,其核为海藻酸钙凝胶,双酶包埋于所述海藻酸钙凝胶中;所述双酶包括烯酮还原酶和脱氢酶。所述杂化载体以海藻酸钙凝胶为内核,并在外表面构建基于生物材料的硬壳,为生物酶提供一个相对稳定的内环境,同时避免海藻酸钙凝胶受损,提高其应用特性,使其具备酶泄露少,耐化学环境变化强,耐机械作用力高,循环稳定性强等特点,可通过鼓泡或搅拌等混合方式,均匀分散于催化反应体系中,提高酶催化反应效率,且在水中无明显溶胀。所述仿生矿化包埋固定双酶的杂化载体应用于手性合成布瓦西坦中间体中,为生物医药、食品行业,酶工程领域提供了一种新型且普遍适用的双酶包埋固定化方法。

    一种高效制备2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸的方法

    公开(公告)号:CN113136406B

    公开(公告)日:2023-07-28

    申请号:CN202110429093.X

    申请日:2021-04-21

    Abstract: 本发明公开了一种高效制备2‑O‑α‑D‑葡萄糖基‑L‑抗坏血酸的方法,属于维生素C糖苷制备技术领域。本发明方法包括以下步骤:首先,在自制备得到的BbrsP发酵液中加入蔗糖,再加入Vc水溶液,用NaOH调节体系pH为5.2,然后加入适量去离子水得到混合液;然后,将得到的混合液加入到烧瓶中,于45℃搅拌反应72h,然后将反应液用陶瓷膜过滤分离,得到清液A和菌体溶液C;再将树脂装柱,将步骤(2)得到的清液A上柱进行吸附,收集流出液,得到溶液B;最后,将溶液B加入到溶液C中,继续于45℃水浴条件下磁力搅拌反应72h。本发明方法可以去除AA‑2G对酶的抑制作用,大大提高生产效率,降低生产成本,并提高AA‑2G的产量以及Vc和蔗糖的利用率。

    一种利用氨基型树脂分离纯化甘油葡萄糖苷的方法

    公开(公告)号:CN113061152B

    公开(公告)日:2023-02-21

    申请号:CN202110324093.3

    申请日:2021-03-26

    Abstract: 本发明公开了一种利用氨基型树脂分离纯化甘油葡萄糖苷(GG)的方法,该方法首先将阴离子交换树脂转型成为带‑NH2的氨基型树脂,填充至含有保温夹套的层析柱中;然后将含有葡萄糖和果糖的甘油葡萄糖苷混合溶液稀释3倍,其中,稀释前混合溶液中甘油葡萄糖苷的浓度为400~600g/L,葡萄糖和果糖的浓度均为80~150g/L,再用移液管移取0.1~0.5mL稀释后的混合溶液并均匀地滴加到树脂上,采用洗脱剂以0.1~0.5BV/h的流速对树脂进行洗脱,收集洗脱液,即得纯化后的甘油葡萄糖苷溶液。本发明方法可以分离由酶合成GG产生的糖类物质,得到高纯度的GG溶液,弥补了分离纯化GG领域的技术空白。

    一种井冈羟胺A酯化物的制备方法

    公开(公告)号:CN111850061B

    公开(公告)日:2022-12-09

    申请号:CN201910362858.5

    申请日:2019-04-30

    Abstract: 本发明公开了一种式(I)所示的井冈羟胺A酯化物的制备方法,式(I)中,R为C1‑C21的饱和脂烃基、C1‑C21的不饱和脂烃基或C1‑C21的卤代饱和脂烃基,所述方法为:井冈羟胺A和脂肪酸RCOOH在叔丁醇中在生物催化剂的作用下反应制得式(I)所示的井冈羟胺A的酯化物;所述生物催化剂为Lipozyme RMIM、Lipase CALB、猪胰脂肪酶、假丝酵母脂肪酶、皱褶假丝酵母脂肪酶中的一种。本发明方法可准确控制反应位点,得到高纯度的井冈羟胺A酯化物。

    一种利用无定形蔗糖酶催化合成蔗糖酯的方法

    公开(公告)号:CN112941129A

    公开(公告)日:2021-06-11

    申请号:CN202110333096.3

    申请日:2021-03-29

    Abstract: 本发明公开了一种利用无定形蔗糖酶催化合成蔗糖酯的方法。所述方法先在蔗糖‑酪蛋白酸钠溶液中加入适量的有机溶剂及表面活性剂,再将该混合溶液在合适的条件下进行喷雾干燥获得的无定形蔗糖作为脂肪酶催化合成蔗糖酯的底物,可大幅提高蔗糖酯的产量。本发明采用Lipozyme TL IM催化合成蔗糖酯,酶活高、酶用量少且反应条件温和;另外,本发明采用低毒、低沸点的叔戊醇或叔丁醇作为反应介质,使产品蔗糖酯的安全性大大提高,可应用于食品及日化品领域,是一种绿色、高效、低成本的蔗糖酯生产方式。

    一种葡萄糖基转移酶在生产乙基香兰素-α-D-葡萄糖苷中的应用

    公开(公告)号:CN109762794B

    公开(公告)日:2020-12-25

    申请号:CN201811653240.6

    申请日:2018-12-29

    Abstract: 本发明公开了一种葡萄糖基转移酶在生产乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷中的应用,所述葡萄糖基转移酶氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。所述的应用以含葡萄糖基转移酶编码基因的工程菌经发酵培养获得的发酵液为菌剂,以麦芽糖和乙基香兰素为底物,在pH值6.0‑8.5、20‑40℃条件下进行转化反应,反应完全后,将反应液分离纯化,获得乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷。本发明的菌剂生物催化生产乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷,底物转化率大于80%,乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷的产物浓度高,转化率高,有利于生物法制备乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷回收纯化。

    一种含α-葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN107400654B

    公开(公告)日:2020-10-09

    申请号:CN201710655857.0

    申请日:2017-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种含α‑葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其应用,所述重组大肠杆菌是将SEQ ID NO.1所示α‑葡萄糖苷酶基因转入大肠杆菌宿主细胞获得的。本发明所述生产L‑薄荷醇‑α‑糖苷的含α‑葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌,能够在胞内高效合成α‑葡萄糖苷酶,以L‑薄荷醇为底物,麦芽糖为辅助底物,高效催化L‑薄荷醇的糖基化反应,反应10‑24小时,可得到大于10%的L‑薄荷醇‑α‑糖苷转化醪液,平均生产强度大于5g·L‑1·h‑1,且底物转化率大于95%,L‑薄荷醇‑α‑糖苷的产物浓度高,转化率高,有利于L‑薄荷醇‑α‑糖苷回收纯化。

    一种含α-糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN107400653B

    公开(公告)日:2020-10-09

    申请号:CN201710655841.X

    申请日:2017-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种含α‑糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其应用,所述重组大肠杆菌是将SEQ ID NO.1所示α‑糖苷酶基因转入大肠杆菌宿主细胞获得的。本发明所述生产α‑熊果苷的含α‑糖苷酶基因的重组大肠杆菌,能够在胞内高效合成α‑糖苷酶,以对苯二酚和蔗糖为底物,高效催化对苯二酚的糖基化反应,反应12‑14小时,可得到大于10%的α‑熊果苷溶液,平均生产强度大于8.3g/l·h,且底物对苯二酚的转化率大于90%,α‑熊果苷的产物浓度高,转化率高,有利于α‑熊果苷回收纯化。

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