一种基于适配体识别的凝血酶快速检测试纸条

    公开(公告)号:CN107202895A

    公开(公告)日:2017-09-26

    申请号:CN201710368210.X

    申请日:2017-05-23

    CPC classification number: G01N33/68 G01N2333/974

    Abstract: 本发明公开了一种基于适配体识别的凝血酶快速检测试纸条的制备与应用,属于胶体金检测领域。该技术是将样品垫、结合垫、层析膜、吸水垫固定于塑料地板,通过虹吸现象达到检测目的。所述结合垫上固定的是通过巯基连接的适配体1(Aptamer1)金标探针,所述层析膜检测线是通过链霉亲和素固定的适配体2(Aptamer 2)序列,所述质控线是通过链霉亲和素固定的金标探针非识别序列的互补序列DNA1。本发明应用夹心原理,可在5min内得到检测结果,达到凝血酶快速、灵敏检测的目的。本发明具有成本低廉、使用简单、特异性好,操作简单等优点。

    一种特异识别细菌脂多糖的广谱核酸适配体及其定向筛选方法

    公开(公告)号:CN106834295A

    公开(公告)日:2017-06-13

    申请号:CN201710168491.4

    申请日:2017-03-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供一条能识别多种不同革兰氏阴性菌来源的脂多糖广谱性核酸适配体。该核酸适配体是基于免标记靶标分子、固定化核酸文库的capture‑SELEX技术基础上定向筛选获得的。即以鼠伤寒沙门氏菌脂多糖为唯一靶标,利用生物素‑亲和素作用将随机寡核苷酸文库通过生物素化的短互补链固定在亲和素包被的Fe3O4磁性纳米颗粒上,经过孵育、分离、扩增、酶切制备单链、克隆测序等步骤,当文库富集到一定程度后,再加入沙门氏菌和大肠杆菌完整的活性菌作为定向分子进行定向筛选,经过共15轮的反复筛选最终获得一条能识别四种脂多糖的广谱性核酸适配体。该核酸适配体能应用于饮用水、食品或临床医学等方面脂多糖的分析检测、分离富集和毒性中和等。

    一种基于适配体‑分子马达生物传感器检测鼠伤寒沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN106680499A

    公开(公告)日:2017-05-17

    申请号:CN201710080139.5

    申请日:2017-02-15

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: G01N33/56916

    Abstract: 本发明提供了一种基于适配体‑分子马达生物传感器检测鼠伤寒沙门氏菌的方法。是以鼠伤寒沙门氏菌适配体为探针,通过“ε亚基抗体‑生物素‑亲和素‑生物素‑适配体”与载色体中的F0F1‑ATPase分子马达相连接,进而识别检测鼠伤寒沙门氏菌的方法,用于牛奶及乳制品中鼠伤寒沙门氏菌的检测。当存在鼠伤寒沙门氏菌时,由于适配体对目标物质的特异性识别,菌连上分子马达,马达转速变慢导致ATP合成变慢,而鼠伤寒沙门氏菌的检测正是基于ATP合成时的质子流动。通过检测一种对pH敏感的荧光染料(F‑DHPE)的信号变化,在荧光探测仪的监测下,以496nm进行激发,记录515处荧光信号强度,能够定量检测鼠伤寒沙门氏菌,鼠伤寒沙门氏菌线性范围为101‑104cfu/mL,最低检测限为10cfu/mL。本发明用于检测鼠伤寒沙门氏菌具有灵敏度高、快速简便的优点。并应用与牛奶及乳制品的检测,结果准确可靠。

    一种基于上转换发光纳米材料和金纳米棒之间发光共振能量转移检测赭曲霉毒素A的方法

    公开(公告)号:CN105372213A

    公开(公告)日:2016-03-02

    申请号:CN201510633405.3

    申请日:2015-09-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种基于上转换发光纳米材料和金纳米棒之间发光共振能量转移检测赭曲霉毒素A的方法,用于小麦及其制品等中赭曲霉毒素A(OTA)含量的检测。通过将上转换发光材料(NaYF4:Yb0.286,Er0.0286)与赭曲霉毒素A核酸适配体连接形成能量供体探针,再通过碱基互补配对原则与适配体互补寡核苷酸单链修饰的金纳米棒(纵横比为2.5左右)能量受体探针形成纳米复合物,发生发光共振能量转移现象(LRET),达到上转换发光淬灭的目的。当检测体系中存在OTA时,OTA与OTA适配体特异性结合,从而使双链解链,通过监控657nm处的上转换发光信号强度,能够定量检测OTA,线性范围为0.05-100ng/mL,检出限为0.027ng/mL。本发明用于OTA检测具有灵敏度高、快速简便的优点。并应用于啤酒、小麦样品的检测,结果准确可靠。

    一种基于适配体识别表面增强拉曼光谱检测食品中沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN105203524A

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201510632911.0

    申请日:2015-09-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于适配体识别表面增强拉曼光谱检测食品中沙门氏菌的方法。采用银包覆金的核壳型纳米材料作为基底,将巯基化修饰的沙门氏菌适配体加入到上述制备所得的银包覆金的核壳型纳米材料中孵育,从而将沙门氏菌适配体固定在基底上。将被测物与修饰有沙门氏菌适配体的银包覆金的核壳型纳米材料混合,加入具有拉曼信号ROX修饰的沙门氏菌适配体进行孵育,然后进行拉曼光谱扫描。基于适配体与沙门氏菌的特异性结合,实现对食品中沙门氏菌的检测。本方法灵敏度高、特异性强、操作方便,在食品安全检测领域将具有广阔的应用前景。

    一组特异识别蜡样芽孢杆菌的寡核苷酸适配子

    公开(公告)号:CN104694646A

    公开(公告)日:2015-06-10

    申请号:CN201510101444.9

    申请日:2015-03-06

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一组特异性识别蜡样芽孢杆菌的寡核苷酸适配子Sp15、Sp16,属于食品卫生、临床医学检测领域。针对现有技术中尚无蜡样芽孢杆菌核苷酸适配子的缺陷,本发明通过竞争Cell-SELEX技术以完整的活性蜡样芽孢杆菌细胞作为靶标对体外合成的随机单链寡核苷酸文库进行筛选、扩增、酶切、测序、亲和力和特异性分析得到的。筛选获得的适配子具有高亲和性和特异性、性质稳定、体外合成方便且成本低等特点,能通过标记功能基团或荧光染料运用于食品和环境中蜡样芽孢杆菌的检测,为现今依赖抗体的检测方法提供了新的选择。

    一组特异识别伏马菌素B1的寡核苷酸适配子

    公开(公告)号:CN103013999B

    公开(公告)日:2014-09-10

    申请号:CN201210475128.4

    申请日:2012-11-22

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一组伏马菌素B1的单链DNA核酸适配子,是通过SELEX技术结合表面固定了伏马菌素B1的磁珠对原始单链DNA随机文库进行筛选、扩增、测序、亲和力及特异性分析得到的。该组DNA适配子作为伏马菌素B1的一种特异高效识别配体,为开发替代现有依赖抗体检测伏马菌素B1的方法提供了新的选择,可用于分析检测或分离富集食品、环境中的伏马菌素B1。所述核酸适配子分子量小,化学合成成本低且易于标记,亲和性和特异性强,变性与复性可逆且速度快,可反复使用、室温运输和长期保存。

    一组特异识别伏马菌素B1的寡核苷酸适配子

    公开(公告)号:CN103013999A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201210475128.4

    申请日:2012-11-22

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一组伏马菌素B1的单链DNA核酸适配子,是通过SELEX技术结合表面固定了伏马菌素B1的磁珠对原始单链DNA随机文库进行筛选、扩增、测序、亲和力及特异性分析得到的。该组DNA适配子作为伏马菌素B1的一种特异高效识别配体,为开发替代现有依赖抗体检测伏马菌素B1的方法提供了新的选择,可用于分析检测或分离富集食品、环境中的伏马菌素B1。所述核酸适配子分子量小,化学合成成本低且易于标记,亲和性和特异性强,变性与复性可逆且速度快,可反复使用、室温运输和长期保存。

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