半滑舌鳎雌性特异AFLP片段及遗传性别鉴定的PCR方法

    公开(公告)号:CN1880478A

    公开(公告)日:2006-12-20

    申请号:CN200610044177.7

    申请日:2006-05-12

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 一种半滑舌鳎雌性特异AFLP片段及遗传性别鉴定的PCR方法,包括雌性特异AFLP片段的回收、AFLP片段的克隆、序列分析以及半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR方法;建立了分离和克隆半滑舌鳎雌性特异AFLP片段的技术,获得了雌性特异DNA片段,设计了特异的引物,将AFLP标记转化成SCAR标记,创建了半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR技术。本发明首次分离到半滑舌鳎雌性特异的DNA片段,查明了其DNA序列,建立了半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR分析技术。本发明具有先进、高效、准确、可靠的特点,在半滑舌鳎性别控制和单性苗种生产中具有重要应用价值,同时在其它鱼类遗传性别鉴定和性别控制研究中也具有应用前景。

    鱼类抗病性状主效QTL精细定位方法

    公开(公告)号:CN118166127A

    公开(公告)日:2024-06-11

    申请号:CN202410591267.6

    申请日:2024-05-14

    发明人: 李仰真 陈松林

    IPC分类号: C12Q1/6888

    摘要: 本发明属于水产养殖动物基因组学和分子育种领域,具体涉及鱼类抗病性状主效QTL精细定位方法。本发明利用鱼类自然发病群体的样本和表型数据,通过基因组重测序、育种芯片靶向测序、基因型填充、连锁不平衡衰减分析和全基因组关联分析等方法,对鱼类抗病性状进行QTL精细定位,挖掘与抗病性状紧密连锁的可靠主效QTL,为鱼类抗病性状分子育种奠定重要基础。

    一种具有抗细菌功效的半滑舌鳎基因

    公开(公告)号:CN118086320A

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202410437925.6

    申请日:2024-04-12

    发明人: 周茜 王磊 陈松林

    摘要: 本发明提供一种从半滑舌鳎中分离的松弛素1基因,其氨基酸序列为SEQ ID NO:1,编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。本发明还提供Rln1基因蛋白的一种用途,是在制备抗菌制品中的应用,所述的抗菌制品是抗鳗弧菌、迟缓爱德华氏菌或哈维氏弧菌的制品。本发明的Rln1蛋白可以有效抑制鳗弧菌、迟缓爱德华氏菌或哈维氏弧菌的生长,从而能够用于半滑舌鳎的健康养殖。

    圆斑星鲽性别特异DNA分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN116656799A

    公开(公告)日:2023-08-29

    申请号:CN202310719563.5

    申请日:2023-06-16

    摘要: 本发明从圆斑星鲽基因组序列中筛选到两条Z、W染色体同源且相差66bp的DNA片段,根据其侧翼保守序列设计引物建立了圆斑星鲽遗传性别鉴定方法,可以有效的区分圆斑星鲽遗传性别。该标记在雌雄个体中都可扩增出目的条带并可以用琼脂糖电泳进行分辨的特点,极大缩短了准确鉴定圆斑星鲽遗传性别的时间,适用于在养殖场简易实验条件下进行圆斑星鲽遗传性别的批量化鉴定,节约了检测成本,并提高了在养殖场实地检测圆斑星鲽遗传性别的工作效率和可操作性。本发明对控制圆斑星鲽养殖群体雌性性别比例、家系建立以及全雌苗种制备等具有重要的应用价值,可提高圆斑星鲽养殖产量和经济效益,对推动圆斑星鲽养殖产业高质量可持续发展具有重要意义。

    斑石鲷雄性特异DNA标记及遗传性别鉴定方法

    公开(公告)号:CN109652523B

    公开(公告)日:2019-11-22

    申请号:CN201910037631.3

    申请日:2019-01-16

    摘要: 本发明提供了斑石鲷雄性特异的DNA标记,其在Y染色体上DNA片段的序列为SEQ ID NO:1;X染色体上DNA片段的序列为SEQ ID NO:2。其中Y染色体DNA片段比X染色体上的片段多出12个bp,这个片段即为Y染色体特有的DNA片段。本发明从斑石鲷全基因组序列中筛选到两条X、Y染色体同源且差异的DNA片段,进一步建立了斑石鲷遗传性别鉴定方法,采用该方法可以快速、准确、有效的区分斑石鲷遗传性别。该方法在雄性个体中扩增的特异目的条带而雌性个体不能扩增出产物,并可以用琼脂糖电泳分辨,缩短了准确鉴定斑石鲷遗传性别的时间,适用于养殖场简易环境内斑石鲷遗传性别的鉴定,节约了检测时间和成本。在斑石鲷性别鉴定、苗种繁育和家系选育上具有重要意义和应用价值。

    一种半滑舌鳎性染色体连锁的DNA片段及其应用

    公开(公告)号:CN105331724A

    公开(公告)日:2016-02-17

    申请号:CN201510856323.5

    申请日:2015-11-29

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种半滑舌鳎性染色体连锁的DNA片段及其应用,其中Z染色体上DNA片段的序列为SEQ ID NO:1;W染色体上DNA片段的序列为SEQ ID NO:2。上述的DNA片段用于设计鉴定半滑舌鳎遗传性别的分子标记。本发明从半滑舌鳎全基因组信息中筛选到两条Z、W染色体同源差异DNA片段,设计引物进行半滑舌鳎遗传性别鉴定,可以快速、准确、有效的区分半滑舌鳎遗传性别。本发明的方法在雌、雄个体中都可扩增出特异目的条带并可以用琼脂糖电泳分辨,缩短了准确鉴定半滑舌鳎遗传性别的时间,适用于养殖场简易环境内半滑舌鳎遗传性别的鉴定,节约了检测时间和成本。

    一种半滑舌鳎伪雄鱼性腺细胞系的构建与应用方法

    公开(公告)号:CN104152402A

    公开(公告)日:2014-11-19

    申请号:CN201410422656.2

    申请日:2014-08-26

    IPC分类号: C12N5/071 C12R1/91

    摘要: 本发明的目的在于提供一种海水经济鱼类半滑舌鳎伪雄鱼性腺组织细胞系的建立方法,从而建立半滑舌鳎伪雄鱼性腺组织细胞系,为研究半滑舌鳎性别分化和性别反转调控机制提供基础。本发明的构建方法是利用半滑舌鳎伪雄鱼性腺组织成功建立了半滑舌鳎伪雄鱼性腺细胞系,建立的细胞系可以连续传代,经过这种方法所获得的传代细胞可传60代以上,能提供大量的伪雄鱼性腺细胞。可广泛用于外源基因、质粒的转染,性别相关基因功能的研究,也可用于鱼类常见病毒的繁殖及病毒与细胞相互作用机制的研究,还可以进行环境污染物检测等,具有重要的实际应用价值。

    一种半滑舌鳎卵巢细胞系的构建与应用方法

    公开(公告)号:CN103756952A

    公开(公告)日:2014-04-30

    申请号:CN201410010517.9

    申请日:2014-01-09

    IPC分类号: C12N5/071

    摘要: 本发明的目的是提供半滑舌鳎卵巢组织细胞系的构建,包括如下的步骤:1)在无菌条件下去除半滑舌鳎卵巢组织最外层膜,在培养液中将组织剪成小块,将组织块用PBS溶液冲洗,再用胰蛋白酶溶液消化,胰酶消化后的溶液中含有细胞,细胞团和没有消化完全的组织块;2)将溶液离心去掉上清胰酶,用培养液悬浮细胞、细胞团和小组织块沉淀;制成悬液后,接种到用Ⅰ型胶原处理好的培养板中,添加培养液后置于24℃生化培养箱中培养,经过传代培养完成卵巢细胞系的构建。本发明的构建方法是利用半滑舌鳎卵巢组织成功建立了半滑舌鳎卵巢组织细胞系,建立的细胞系可以连续传代,经过这种方法所获得的传代细胞可传60代以上,能提供大量的卵巢细胞。

    半滑舌鳎精巢细胞系的构建与鉴定方法

    公开(公告)号:CN102304491A

    公开(公告)日:2012-01-04

    申请号:CN201110189213.X

    申请日:2011-07-07

    摘要: 本发明涉及一种半滑舌鳎精巢细胞系的构建与鉴定方法,采用MEM基础培养基添加20%的胎牛血清、0.1%的β-巯基乙醇、2ng/ml人碱性成纤维细胞生长因子、1ng/ml白血病抑制因子、1nmol的丙酮酸钠、1nmol的谷氨酰胺,配制成完全培养基,将组织块接种在培养瓶中,翻瓶倒置培养3h,待组织块贴壁后再正置培养瓶使组织块浸泡在培养基中培养。采用胰酶消化方法进行细胞的传代培养。采用上述方法建立半滑舌鳎精巢细胞系1个,已传代培养至第50代,同时本发明还提供了所构建细胞系的染色体和分子标记水平的鉴定方法,以及该细胞系对相关病毒敏感性的鉴定方法。本发明建立的半滑舌鳎精巢细胞系的构建方法可以应用于其它鱼类性腺细胞培养和细胞系建立,具有较为广泛的推广应用前景。