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公开(公告)号：CN106721658A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611202258.5
申请日：2016-12-23
申请人： 宁德市鼎诚水产有限公司 , 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC分类号： A23K50/80 , A23K10/22 , A23K20/163 , A23K20/174 , A23K40/10
摘要： 本发明公开了一种红膏蟹培育的软颗粒饲料及其制备方法，所述饲料是由以下重量百分比的原料组成：鲜杂鱼65‑85％、淀粉10‑30％，卡拉胶1‑5％，电解多维0.5‑2％。制备方法如下：(1)将鲜杂鱼和淀粉进行破碎成鱼糜搅拌，倒入模具中，放入烤箱烤熟，去除杂菌；(2)将电解多维粉末洒入烤熟的鲜杂鱼与淀粉混合物中；(3)再加入卡拉胶进行成型固定，得到本发明的软颗粒饲料。本发明的红膏蟹培育的软颗粒饲料配方简单，易于大规模生产，相对于传统饲料不仅提高了育成时间，而且极大的降低了死亡率，并且在成膏率方面也有较大提升。
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公开(公告)号：CN104152402A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410422656.2
申请日：2014-08-26
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
摘要： 本发明的目的在于提供一种海水经济鱼类半滑舌鳎伪雄鱼性腺组织细胞系的建立方法，从而建立半滑舌鳎伪雄鱼性腺组织细胞系，为研究半滑舌鳎性别分化和性别反转调控机制提供基础。本发明的构建方法是利用半滑舌鳎伪雄鱼性腺组织成功建立了半滑舌鳎伪雄鱼性腺细胞系，建立的细胞系可以连续传代，经过这种方法所获得的传代细胞可传60代以上，能提供大量的伪雄鱼性腺细胞。可广泛用于外源基因、质粒的转染，性别相关基因功能的研究，也可用于鱼类常见病毒的繁殖及病毒与细胞相互作用机制的研究，还可以进行环境污染物检测等，具有重要的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN103756952A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201410010517.9
申请日：2014-01-09
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明的目的是提供半滑舌鳎卵巢组织细胞系的构建，包括如下的步骤：1）在无菌条件下去除半滑舌鳎卵巢组织最外层膜，在培养液中将组织剪成小块，将组织块用PBS溶液冲洗，再用胰蛋白酶溶液消化，胰酶消化后的溶液中含有细胞，细胞团和没有消化完全的组织块；2）将溶液离心去掉上清胰酶，用培养液悬浮细胞、细胞团和小组织块沉淀；制成悬液后，接种到用Ⅰ型胶原处理好的培养板中，添加培养液后置于24℃生化培养箱中培养，经过传代培养完成卵巢细胞系的构建。本发明的构建方法是利用半滑舌鳎卵巢组织成功建立了半滑舌鳎卵巢组织细胞系，建立的细胞系可以连续传代，经过这种方法所获得的传代细胞可传60代以上，能提供大量的卵巢细胞。
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公开(公告)号：CN102304491A
公开(公告)日：2012-01-04
申请号：CN201110189213.X
申请日：2011-07-07
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
摘要： 本发明涉及一种半滑舌鳎精巢细胞系的构建与鉴定方法，采用MEM基础培养基添加20％的胎牛血清、0.1％的β-巯基乙醇、2ng/ml人碱性成纤维细胞生长因子、1ng/ml白血病抑制因子、1nmol的丙酮酸钠、1nmol的谷氨酰胺，配制成完全培养基，将组织块接种在培养瓶中，翻瓶倒置培养3h，待组织块贴壁后再正置培养瓶使组织块浸泡在培养基中培养。采用胰酶消化方法进行细胞的传代培养。采用上述方法建立半滑舌鳎精巢细胞系1个，已传代培养至第50代，同时本发明还提供了所构建细胞系的染色体和分子标记水平的鉴定方法，以及该细胞系对相关病毒敏感性的鉴定方法。本发明建立的半滑舌鳎精巢细胞系的构建方法可以应用于其它鱼类性腺细胞培养和细胞系建立，具有较为广泛的推广应用前景。
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公开(公告)号：CN1814793A
公开(公告)日：2006-08-09
申请号：CN200510045554.4
申请日：2005-12-15
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 一种半滑舌鳎性别特异分子标记及遗传性别检测方法，它的方法是血液DNA的提取，基因组DNA的AFLP分析、性别特异AFLP分子标记的筛选以及半滑舌鳎遗传性别鉴定方法的建立。本发明确定了从半滑舌鳎血液中提取基因组DNA的条件和方法，建立了半滑舌鳎AFLP分析技术，从64个引物组合中筛选到4个引物组合能够产生雌性特异DNA片段，筛选出半滑舌鳎雌性特异的AFLP分子标记7个，创建了半滑舌鳎遗传性别鉴定的分子标记技术。本发明首次筛选到半滑舌鳎雌性特异AFLP分子标记，建立了半滑舌鳎遗传性别鉴定的分子标记技术。本发明方法具有先进、高效、准确、可靠的特点，在半滑舌鳎单性苗种生产中具有重要应用价值，同时在其它鱼类遗传性别鉴定和性别控制研究中也具有广阔应用前景。
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公开(公告)号：CN105463093A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201510999386.6
申请日：2015-12-28
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
CPC分类号： C12Q1/6806 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143
摘要： 本发明公开了一种用于鱼类线粒体全基因组扩增的引物、试剂盒，还公开了鱼类线粒体全基因组DNA的扩增方法、测序方法。本发明利用给定的引物直接扩增结合直接测序的方法，能够得到鱼类线粒体全基因组序列,可以一次性检测鱼类不同物种、同一个物种不同个体线粒体基因的全部碱基突变,能够应用于全部鱼类线粒体基因组研究。
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公开(公告)号：CN101305701A
公开(公告)日：2008-11-19
申请号：CN200810138063.8
申请日：2008-07-08
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
CPC分类号： Y02A40/81
摘要： 一种鱼类家系建立和抗病高产良种选育方法，采用群体选育、家系选育、杂交以及人工感染、快速生长家系和抗病家系的筛选等技术，选育出了牙鲆抗病方强、生长快的家系，建立了鱼类抗病高产良种的选育方法。该技术具有针对性强、选育效率高、效果明显等特点，抗病牙鲆鱼苗的成活率为80％以上，成活率比普通牙鲆鱼苗提高了30％以上；抗病牙鲆的生长速度也提高了10％以上。为鱼类抗病品种培育开辟了新的技术途径，是一种能在鱼类良种选育中应用的抗病高产品种选育方法，适宜在所有养殖鱼类上推广应用，对养殖鱼类抗病高产良种培育具有重要意义和应用价值。
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公开(公告)号：CN100421551C
公开(公告)日：2008-10-01
申请号：CN200610171071.3
申请日：2006-12-26
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
CPC分类号： Y02A40/81
摘要： 一种半滑舌鳎性逆转的诱导方法，包括温度诱导和激素诱导两种方法。温度诱导方法：首先确定半滑舌鳎鱼苗适宜性逆转的发育时期为孵化后20天-30天；其次，筛选诱导半滑舌鳎鱼苗发生性逆转的有效温度为28-32℃，处理持续时间为50-60天；激素诱导方法是在鱼苗孵化后20天-30天，采用甲基睾酮进行浸泡处理，浓度为20-100μg/L·H2O，浸泡处理时间为50-60天。采用组织切片方法鉴定鱼苗的生理性别，采用PCR方法鉴定鱼苗的遗传性别，温度诱导的鱼苗雄性化率为66-69%，激素诱导的鱼苗雄性化率达到97-100%。本方法可用于半滑舌鳎和其它鱼类苗种的性逆转诱导，为半滑舌鳎性别控制和全雌苗种培育提供了一种简单、方便和可靠的鱼苗性逆转方法。
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公开(公告)号：CN100347298C
公开(公告)日：2007-11-07
申请号：CN200510104768.4
申请日：2005-12-30
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
摘要： 一种鱼类肌肉生长抑素MSTN基因及其基因打靶载体，它的方法是分离克隆了花鲈MSTN基因，其全长为4873bp，包括3个外显子，2个内含子，5’调控序列和非翻译区以及3’非翻译区。根据测定出的花鲈MSTN基因序列，设计引物，扩增得到该基因的一个3.2KB的长片段和一个1.5KB的短片段，将这两个片段依次连接到pBSII+KS载体上，获得重组载体p+MSTN3.2+MSTN1.5，然后将正选择标记基因neo片段连接到上述MSTN基因长片段和短片段的中间，形成p+MSTN3.2+MSTN1.5+neo的重组载体；最后将负选择标记基因SVTK-tk片段连接到上述长片段的侧翼，最后获得p+MSTN3.2+MSTN1.5+neo+tk的基因打靶载体。本发明克隆了鱼类MSTN全长基因，并首次构建了鱼类MSTN基因打靶载体，可用于各种鱼类MSTN基因克隆及基因打靶载体的构建，在鱼类基因工程育种上具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN101002546A
公开(公告)日：2007-07-25
申请号：CN200610171071.3
申请日：2006-12-26
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所
CPC分类号： Y02A40/81
摘要： 一种半滑舌鳎性逆转的诱导方法，包括温度诱导和激素诱导两种方法。温度诱导方法：首先确定半滑舌鳎鱼苗适宜性逆转的发育时期为孵化后20天－30天；其次，筛选诱导半滑舌鳎鱼苗发生性逆转的有效温度为28－32℃，处理持续时间为50－60天；激素诱导方法是在鱼苗孵化后20天－30天，采用甲基睾酮进行浸泡处理，浓度为20－100μg/L·H2O，浸泡处理时间为50－60天。采用组织切片方法鉴定鱼苗的生理性别，采用PCR方法鉴定鱼苗的遗传性别，温度诱导的鱼苗雄性化率为66－69％，激素诱导的鱼苗雄性化率达到97－100％。本方法操作简单，成本低廉，有效，可靠。可用于半滑舌鳎和其它鱼类苗种的性逆转诱导，为半滑舌鳎性别控制和全雌苗种培育提供了一种简单、方便和可靠的鱼苗性逆转方法。
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