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公开(公告)号：CN109402093A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201811367595.9
申请日：2018-11-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种6-磷酸-β-葡萄糖苷酶Pbgl及其编码基因与应用。本发明提供的6-磷酸-β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，或着，对SEQ ID NO.2所示氨基酸序列中的氨基酸残基进行取代、缺失、添加中的任意一种或几种修饰得到的仍然具有6-磷酸-β-葡萄糖苷酶活性的氨基酸序列。本发明从嗜热芽孢杆菌CCTCC No:M2011468中克隆得到了一个新的6-磷酸-β-葡萄糖苷酶基因pbgl，可在宿主细胞中表达该基因以生产6-磷酸-β-葡萄糖苷酶，用于纤维素的降解。
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公开(公告)号：CN105219807B
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201510730985.8
申请日：2015-11-02
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种选择性分离苯丙氨酸生物转化液中肉桂酸及循环利用转化液的方法，苯丙氨酸生物转化液经固液分离分别得到清液I与细胞菌体；将清液I用酸调节pH值至4.5，在室温下搅拌处理至白色沉淀析出；上述混合体系经固液分离得到清液II与沉淀，沉淀经洗涤、冷冻干燥得到肉桂酸样品；清液II用碱调节pH值至生物转化所需pH，再与前述细胞菌体混合，继续进行生物转化制备肉桂酸。采用本发明方法，可以降低底物抑制作用并使转化液和细胞可循环利用的方法，产率最高可达95％，产品纯度可达98％以上。该方法不仅过程简易，可大大降低提取成本，还可实现得静息细胞和转化液多次循环利用。
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公开(公告)号：CN104862345B
公开(公告)日：2018-10-19
申请号：CN201510340855.3
申请日：2015-06-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12P7/10
Abstract: 本发明公开了一种木质纤维原料预水解糖液的脱毒方法，以稀硫酸蒸汽爆破预处理后得到预水解糖液浓缩液为原料，以离子液体作为萃取剂去除木质纤维原料预水解糖液浓缩液中的发酵抑制物；其中，所述的离子液体类型为二取代咪唑阳离子型离子液体。本发明采用有机离子液体萃取处理木质纤维原料预水解糖液浓缩液，结果发现，在损失少量可发酵性糖的基础上，预水解糖液浓缩液中甲酸去除率为64.54%，乙酸去除率54.88%，乙酰丙酸、糠醛的去除率100%，羟甲基糠醛87.08%，总酚去除率70.44%。在相同时间内，糖利用率提高了74.34%，乙醇产量提高了82.91%，发酵周期缩短。
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公开(公告)号：CN105296544B
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201510832869.7
申请日：2015-11-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种木质素降解产物的去除方法，以木质素降解产物为底物，采用活化过硫酸盐产生硫酸根自由基的方式氧化去除木质素降解产物；其中，活化方式选择热活化，过硫酸盐选择过硫酸铵作为氧化剂。本发明采用热活化方式活化过硫酸铵氧化去除木质素降解产物，结果发现，热活化过硫酸铵氧化木质素降解产物的效果如下：香草醛、4‑羟基苯甲醛、香草酸、4‑羟基苯甲酸和紫丁香酸的去除率在1h内均达到100%，紫丁香醛的去除率在2h内达到100%。
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公开(公告)号：CN105974022B
公开(公告)日：2018-09-25
申请号：CN201610347503.5
申请日：2016-05-20
Applicant: 南京林业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明公开了一种基于正相和反相高效液相色谱联用测定5‑羟甲基糠醛及其衍生物的方法。本发明是基于正相和反相高效液相色谱联用测定5‑羟甲基糠醛、2，5‑呋喃二甲醇、2，5‑呋喃二甲醛、5‑羟甲基‑2‑糠酸、5‑甲酰基‑2‑糠酸和2，5‑呋喃二甲酸的方法。采用Bio‑Rad Aminex HPX‑87H(300mm×7.8mm)正相色谱柱，通过硫酸等度洗脱，使用示差折光检测器，温度为35℃，定量测定2，5‑呋喃二甲醇、2，5‑呋喃二甲酸、5‑羟甲基糠醛和2，5‑呋喃二甲醛；采用Zorbax Eclipse XDS‑C18(300mm×4.6mm)反相色谱柱，通过乙腈和醋酸二元梯度洗脱，使用可变波长检测器，紫外波长为275nm，定量测定5‑甲酰基‑2‑糠酸和5‑羟甲基‑2‑糠酸。通过正相和反相高效液相色谱联用，定量测定6种物质，显著提高了对上述呋喃类化合物的分离度及检测准确度。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104762343B
公开(公告)日：2018-02-09
申请号：CN201510142708.5
申请日：2015-03-27
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种酶法制备低聚木糖的方法，将内切葡聚糖酶EGⅠ基因在巴斯德毕赤酵母(Pichia Pastoris)中表达，得到的内切葡聚糖酶EGⅠ用于降解木聚糖制备低聚木糖。本发明构建的酵母基因工程菌已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，登记入册编号为CGMCC NO.9762，保藏日期为2014年10月13日。利用该酵母基因工程菌表达得到的内切葡聚糖酶EGⅠ酶解木聚糖，酶解36小时，低聚木糖得率达到68.12％。
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公开(公告)号：CN104846035B
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201510260116.3
申请日：2015-05-20
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种田菁酶法制备半乳甘露低聚糖的方法，酶解底物为直接机械粉碎后的田菁种子；具体步骤包括：1）风干田菁种子机械粉碎至20‑100目；2）将粉碎后的田菁种子与低β‑甘露糖苷酶活力的β‑甘露聚糖酶混合，加入水，加入pH缓冲液或酸、碱，混合至固液重量比1:3‑50，控制pH值4‑6，反应体系中每克半乳甘露聚糖的β‑甘露聚糖酶用量为10‑100U，于45‑55℃的条件下反应12h以上；3）酶水解反应结束后，水解物于100℃下处理10min使β‑甘露聚糖酶失活；4）水解物固液分离，清液即为半乳甘露低聚糖溶液。该方法具有工艺简单、有利于提高酶反应的底物和产物浓度，以及降低酶解反应搅拌能耗等优点。
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公开(公告)号：CN105779527A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610348523.4
申请日：2016-05-24
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高碱性预处理木质纤维原料酶解得率的方法，包括原料预处理和酶水解步骤；在所述的预处理步骤中，添加聚乙二醇二缩水甘油醚共处理底物。本发明的提高碱性预处理木质纤维原料酶解得率的方法，在低温碱预处理中添加聚乙二醇二缩水甘油醚共处理底物，有效减弱酶水解过程中木质素对纤维素酶的非特异性吸附，有利于促进纤维素酶水解的进行。试验结果表明，与现有研究结果相比，本专利的酶水解得率提高了39.75%，达到71.26%。同时本方法预处理工艺条件简单，反应条件温和，碳水化合物回收率高，且具有低能耗及药品回收等优点，更具有实际操作价值，具有很好的实用性。
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公开(公告)号：CN103468665B
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201310464644.1
申请日：2013-10-08
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种玉米苯丙氨酸解氨酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，其编码的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还公开了上述玉米苯丙氨酸解氨酶在生物法合成肉桂酸中的应用。将本发明提供的玉米苯丙氨酸解氨酶ZmPAL基因构建到大肠杆菌表达载体并转化入大肠杆菌细胞进行原核表达，可用于高比活植物苯丙氨酸解氨酶的生产。获得的重组玉米苯丙氨酸解氨酶能够催化L-苯丙氨酸去氨基生产肉桂酸，为全生物合成制备肉桂酸提供了可能，具有很高的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN104862345A
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201510340855.3
申请日：2015-06-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12P7/10
CPC classification number: Y02E50/16 , C12P7/10 , C12P2201/00
Abstract: 本发明公开了一种木质纤维原料预水解糖液的脱毒方法，以稀硫酸蒸汽爆破预处理后得到预水解糖液浓缩液为原料，以离子液体作为萃取剂去除木质纤维原料预水解糖液浓缩液中的发酵抑制物；其中，所述的离子液体类型为二取代咪唑阳离子型离子液体。本发明采用有机离子液体萃取处理木质纤维原料预水解糖液浓缩液，结果发现，在损失少量可发酵性糖的基础上，预水解糖液浓缩液中甲酸去除率为64.54 %，乙酸去除率54.88 %，乙酰丙酸、糠醛的去除率100 %，羟甲基糠醛87.08 %，总酚去除率70.44 %。在相同时间内，糖利用率提高了74.34 %，乙醇产量提高了82.91 %，发酵周期缩短。
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