温敏型聚N-异丙基丙烯酰胺凝胶协助溶菌酶复性的方法

    公开(公告)号:CN1648243A

    公开(公告)日:2005-08-03

    申请号:CN200410073406.9

    申请日:2004-12-08

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12N9/36 C12N11/04

    摘要: 本发明公开了一种温敏型聚N-异丙基丙烯酰胺凝胶协助溶菌酶复性的方法。步骤如下:1)配制聚N-异丙基丙烯酰胺凝胶反应物的水溶液;2)反相悬浮法制备温敏型聚N-异丙基丙烯酰胺凝胶;3)温敏型聚N-异丙基丙烯酰胺凝胶协助溶菌酶复性。本发明所开发的温敏型聚N-异丙基丙烯酰胺凝胶,作为一种新型的蛋白质体外复性的添加剂,可使溶菌酶的活力回收率比稀释复性提高68%以上,凝胶重复利用8次后溶菌酶的活力回收率仍比稀释复性提高22%以上。该凝胶具有高效、影响复性的参数较少、操作方便、仪器设备要求较低且易于分离回收等优点,可降低生产成本,因而在蛋白质体外复性领域具有较好的应用前景。

    蚓激酶粗品中去除杂蛋白的方法

    公开(公告)号:CN1587398A

    公开(公告)日:2005-03-02

    申请号:CN200410054043.4

    申请日:2004-08-24

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12N9/64

    摘要: 本发明公开了一种蚓激酶粗品中去除杂蛋白的方法。方法的步骤如下:1)首先,将蚓激酶粗品溶于乙醇-水溶液中,配制粗酶质量百分比浓度为2~7%,乙醇体积百分比浓度为0~40%的溶液,反复搅拌溶解后滤去不溶物;2)然后,取20mL上述混合溶液加入到预热温度为20℃~40℃高压釜中,继而通入预热温度为20℃~40℃,压力为3.5~8.5MPa的加压CO2同时搅拌,调节溶液的pH为4.4,在高压下保持20~60分钟,蚓激酶粗品中的杂蛋白在该条件下完全沉淀出来,而活性成分仍存留在溶液中,再将沉淀分离出去即可。本发明具有操作条件相对温和,可以同时得到其它活性组分,酶活损失小等特点,是一种操作参数可精确控制,操作过程无波动的蚓激酶的分离提纯方法。

    内切β-1,4-葡聚糖酶的分离提纯方法

    公开(公告)号:CN1587396A

    公开(公告)日:2005-03-02

    申请号:CN200410054047.2

    申请日:2004-08-24

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12N9/42

    摘要: 本发明公开了一种内切β-1,4-葡聚糖酶的分离提纯方法。方法的步骤如下:1)首先,将粗纤维素酶溶于乙醇-水溶液中,配制粗纤维素酶质量百分比浓度为1~3%,乙醇体积百分比浓度为10~40%的溶液,充分振荡使溶液混合均匀;2)然后,取20mL上述混合溶液加入到预热温度为20℃~40℃的高压釜中,继而通入预热温度为20℃~40℃,压力为3.5~8.0MPa的CO2,调节pH为3.8~4.2,并保持25~60分钟,过滤得内切β-1,4-葡聚糖酶。本发明具有分离后所得产品可保持较高酶活,水溶性蛋白质易于形成沉淀等的特点,是一种操作参数可精确控制,操作过程无波动,沉淀能力较强的内切β-1,4-葡聚糖酶的分离提纯方法。

    均质型纤维素/钛白粉复合微球及其制备方法

    公开(公告)号:CN1386785A

    公开(公告)日:2002-12-25

    申请号:CN02111928.7

    申请日:2002-05-30

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C08L1/02 C08K3/22 C08J3/00

    摘要: 本发明公开了一种均质型纤维素/钛白粉复合微球及其制造方法。步骤如下:1)配制复合水相,将钛白粉超细颗粒和工业用纤维素黄原酸酯粘胶混匀。2)加热固化成球,加入油相和表面活性剂,组成反相悬浮分散体系,升温后固化成球。3)再生得到微球,将微球用有机溶剂洗涤、酸再生,得到均质型复合微球。4)筛分和扩张床浮选,将再生微球湿态筛分后于扩张床中浮选至一定的粒径分布。将超细钛白粉颗粒与工业纤维素黄原酸酯粘胶混匀,悬浮分散于油相之中,形成油包水型悬浮液,升温后固化成球,过滤得到微球。本发明所开发的上述基质,具有亲水性、球形度好、孔度高、耐酸碱、成本低、密度适中且可以调节的优点,扩张性能测试实验表明可以用作为扩张附吸附过程的基质。

    一种氧化/pH双响应型姜黄素前药及其制备方法

    公开(公告)号:CN116874621A

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202310748018.9

    申请日:2023-06-25

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C08B31/12 A61P35/00

    摘要: 本发明公开了一种氧化/pH双响应型姜黄素前药及其制备方法,属于生物医药高分子材料领域。本发明以季铵盐羟乙基淀粉为亲水骨架,通过酯化反应将3,3’‑二硫代二丙酸偶联于季铵盐羟乙基淀粉的羟基上,得到中间体;再由姜黄素的酚羟基与中间体的羧基端发生酯化反应,生成季铵盐羟乙基淀粉‑姜黄素前药。该姜黄素前药通过两步酯化法即可合成,制备工艺简单。同时,该前药可在水中自组装形成稳定的纳米胶束结构,可提高药物的溶解度及在肿瘤部位的富集能力。前药可以在含有活性氧或弱酸性环境下迅速释放出姜黄素,表现出良好的活性氧和pH双响应性。前药可有效抑制肿瘤细胞的增殖,在癌症治疗中具有一定的应用前景。

    一种两亲性姜黄素前药胶束及其制备方法

    公开(公告)号:CN116726196A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202310748030.X

    申请日:2023-06-25

    申请人: 浙江大学

    摘要: 本发明公开了一种两亲性姜黄素前药胶束及其制备方法,属于生物医药高分子材料领域。本发明以季铵盐羟乙基淀粉为聚合物骨架,以(亚乙基二硫代)二乙酸为连接臂,将疏水性的姜黄素与季铵盐羟乙基淀粉偶联起来,得到一种可自组装形成稳定胶束结构的姜黄素前药。姜黄素前药通过两步酯化反应即可制得,制备工艺简单。所得的姜黄素前药可在水溶液中自组装形成纳米胶束,能够提高姜黄素在水中的溶解度和稳定性。在活性氧及弱酸环境下可响应性地释放出姜黄素,增强姜黄素在肿瘤部位的释放和积累。该前药可有效抑制结肠癌细胞的增殖,可为姜黄素的临床应用提供参考。

    负载布地奈德的固体脂质纳米颗粒复合物及制备方法

    公开(公告)号:CN115721734A

    公开(公告)日:2023-03-03

    申请号:CN202211558876.9

    申请日:2022-12-06

    申请人: 浙江大学

    摘要: 本发明公开了一种负载布地奈德的固体脂质纳米颗粒复合物及制备方法,该固体脂质纳米颗粒复合物包括固体脂质纳米颗粒和聚电解质复合物层,聚电解质复合物层和固体脂质纳米颗粒的质量比为10:1~1:1,其中,固体脂质纳米颗粒按质量比包括0.5%~5%布地奈德、5%~30%乳化剂和65%~90%油性介质;聚电解质复合物层按质量比包括60%~80%纤维素硫酸钠和20%~40%壳聚糖季铵盐。本发明以天然多糖和天然固态油脂为主要材料,具有良好的生物相容性、可降解性和结肠菌群酶响应性,并且制备原料易于获取,制备工艺简洁,无有机溶剂制剂且易于大规模生产。

    一种含季铵盐离子液体体系中植物甾醇生物转化制备雄烯二酮的方法

    公开(公告)号:CN108823275B

    公开(公告)日:2021-01-08

    申请号:CN201810622695.5

    申请日:2018-06-15

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12P33/00 C12R1/32

    摘要: 本发明公开了一种含季铵盐离子液体体系中植物甾醇全细胞生物转化制备雄烯二酮(AD)的方法。将分枝杆菌Mycobacterium sp.NRRL B‑3683菌种进行种子液培养,再将种子液接种到发酵培养基中培养以制备静息细胞,所得静息细胞在含葡萄糖的Tris‑HCl缓冲液中活化培养7h,然后投入底物植物甾醇和0.1~1vol.%的亲水性乳酸/羧酸季铵盐离子液体作为共溶剂,进行生物转化反应,制备AD。本发明所用的季铵盐离子液体对底物植物甾醇的溶解度高达8~565g L‑1,远高于普通商业化离子液体,能有效促进底物和产物溶解,提高过程转化效率,且离子液体用料极少,有利于节约生产成本。

    利用超临界流体技术一步制备双模式孔结构骨组织工程支架的方法

    公开(公告)号:CN106512101B

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201610969582.3

    申请日:2016-10-27

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: A61L27/50 A61L27/18 A61L27/54

    摘要: 本发明公开了一种基于超临界流体技术制备双模式孔结构骨组织工程支架的方法。将预先使用乳化/溶剂挥发法合成的聚合物微球与作为成核剂的亚微米级或纳米级颗粒(例如羟基磷灰石,钛硅分子筛、二氧化钛)进行混合,取混合物压片后形成圆柱形的薄片,放入高压釜内,在一定温度、压力下保压一段时间,以一定的泄压速率进行泄压,形成具有双模式孔结构的骨组织工程支架。本发明具有操作条件温和、操作工艺简单、过程稳定,无有机溶剂残留,可用于骨组织工程支架的制备。

    一种含季铵盐离子液体体系中植物甾醇生物转化制备雄烯二酮的方法

    公开(公告)号:CN108823275A

    公开(公告)日:2018-11-16

    申请号:CN201810622695.5

    申请日:2018-06-15

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12P33/00 C12R1/32

    CPC分类号: C12P33/00

    摘要: 本发明公开了一种含季铵盐离子液体体系中植物甾醇全细胞生物转化制备雄烯二酮(AD)的方法。将分枝杆菌Mycobacterium sp.NRRL B-3683菌种进行种子液培养,再将种子液接种到发酵培养基中培养以制备静息细胞,所得静息细胞在含葡萄糖的Tris-HCl缓冲液中活化培养7h,然后投入底物植物甾醇和0.1~1vol.%的亲水性乳酸/羧酸季铵盐离子液体作为共溶剂,进行生物转化反应,制备AD。本发明所用的季铵盐离子液体对底物植物甾醇的溶解度高达8~565g L-1,远高于普通商业化离子液体,能有效促进底物和产物溶解,提高过程转化效率,且离子液体用料极少,有利于节约生产成本。