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公开(公告)号：CN109089881B
公开(公告)日：2019-08-09
申请号：CN201810953687.9
申请日：2018-08-20
Applicant: 南京林业大学 , 江苏艺华园林建设有限公司
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种耐寒天竺桂的不定芽诱导及增殖和植株再生方法，步骤包括：1)选取无病害幼嫩的耐寒型天竺桂茎段，将其剪成带有1‑2个腋芽或顶芽的茎段，灭菌消毒备用；2)将灭菌消毒后的茎段垂直接种在不定芽诱导培养基上，培养28d以上。其中，不定芽诱导培养基的配方为：基本培养基+0～1mg/L生长素，生长素为TDZ、GA、NAA、BA中的1种以上；3)将增殖的不定芽逐个分开，选取伸长值1.0～2.0cm的不定芽垂直接种于生根培养基中，培养28d；其中，生根培养基配方为：基本培养基+生长素。该方法利用长势优良的天竺桂的幼嫩茎段作为外植体，通过基本培养基的选择，激素种类及浓度配比的筛选，建立高效的离体快速繁殖体系，为进一步的离体保存和繁育天竺桂奠定基础。
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公开(公告)号：CN109929852A
公开(公告)日：2019-06-25
申请号：CN201910284374.3
申请日：2019-04-09
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9及其应用。该杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克隆出杂交鹅掌楸的LhHB9基因的cDNA序列，构建LhHB9基因的过表达载体，以杂交鹅掌楸胚性愈伤为受体材料，采用农杆菌介导法进行遗传转化。经G418筛选得到转基因愈伤后，对其进行检测，初步确定转基因成功。通过对LhHB9基因转基因愈伤体胚诱导发现，转基因体胚胚根有明显的伸长，统计数据显示，35S：LhHB9体细胞胚胚根与对照CK相比最显著，说明过表达靶基因可以促进胚根的伸长，具有很好的实用性。
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公开(公告)号：CN106688895B
公开(公告)日：2018-11-27
申请号：CN201710189443.3
申请日：2017-03-27
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用水杨酸进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法，包括杂交鹅掌楸悬浮系的建立、液体单细胞的获得及过渡、诱导杂交鹅掌楸体胚的发生步骤，在诱导杂交鹅掌楸体胚的发生时，在培养基中同时添加水杨酸和ABA，或单独添加水杨酸。本发明的利用水杨酸进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法，在杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生过程中，加入植物生长调节剂SA有效提高提高体胚诱导率、发育的同步性，提高杂交鹅掌楸体细胞工程种苗繁育的效益。
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公开(公告)号：CN108660250A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810543424.0
申请日：2018-05-29
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸林分后代树种类型的鉴定方法及其专用试剂盒，该方法包括：1)提取后代树种的叶片DNA；2)进行SSR-PCR检测；3)后代树种判定，电泳能特异性扩增出112bp的产物为中国鹅掌楸，能特异性扩增出124bp的产物为北美鹅掌楸，能特异性扩增出112bp和124bp 2种产物为杂交鹅掌楸。本发明的鹅掌楸林分后代树种类型的鉴定方法，具有重复性与稳定性好等优点，既可对鹅掌楸天然林以及人工林后代树种类型，进行有效鉴定，尤其是处于幼苗阶段的鹅掌楸天然林人工林的后代，又可对种子园的种子是中国种、北美种、还是杂交种进行鉴定，速度快，效率高，结果准确，具有很好的实用性。
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公开(公告)号：CN108660196A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810543423.6
申请日：2018-05-29
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/686 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸亲缘关系的鉴定方法及其专用试剂盒，该方法包括：1)提取杂交鹅掌楸叶片DNA；2)进行PCR检测；3)用引物18.2能特异性扩增出400bp的产物的母本为中国鹅掌楸，能特异性扩增出382bp的产物母本为北美鹅掌楸，再用引物700对中国鹅掌楸的进行PCR扩增，能特异性扩增出700bp产物的母本为中国鹅掌楸西部种源，能特异扩增出242bp产物的母本则为中国鹅掌楸东部种源；对北美鹅掌楸的用引物700进行PCR扩增，均特异获得700bp的产物。本发明可对幼苗阶段的杂交鹅掌楸天然林进行有效鉴定，具有速度快，效率高，结果准确，重复性与稳定性好等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104293808B
公开(公告)日：2017-06-30
申请号：CN201410587281.5
申请日：2014-10-29
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhMKK2基因及其表达蛋白和应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明在已建立完善的杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生体系﹑且已获得部分转录组数据的基础上，同源克隆获得杂交鹅掌楸LhMKK2基因全长，命名为LhMKK2，通过基因表达分析，证明了杂交鹅掌楸LhMKK2基因在植物中的广泛表达，参与植株的生长发育，以及逆境胁迫响应过程，通过对其功能分析发现，过表达LhMKK2基因增强植株对盐胁迫响应的抗性，影响植株的生长发育，可为开展杂交鹅掌楸抗逆性分子育种提供理论依据，并进一步在植物抗逆境胁迫中有较广泛的应用。
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公开(公告)号：CN106834315A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710184070.0
申请日：2017-03-24
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种比拉底白刺NbCIPK25基因及其表达蛋白和应用，所述比拉底白刺NbCIPK25基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明根据比拉底白刺的抗逆特性，利用比拉底白刺的叶片组织，根据同源序列比对设计引物，克隆了比拉底白刺抗逆相关的CIPK基因全长，并根据拟南芥中的同源基因命名为NbCIPK25。转NbCIPK25基因的拟南芥植株的耐盐抗旱性分析表明比拉底白刺NbCIPK25基因在植物抗逆方面的功能，增加了植物抗逆基因库的资源。
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公开(公告)号：CN106198691A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610760994.6
申请日：2016-08-30
Applicant: 南京林业大学
IPC: G01N27/447 , G01N1/34
CPC classification number: G01N27/44778 , G01N1/34
Abstract: 本发明公开了一种利用双向电泳体系获取北美鹅掌楸花蜜蛋白质电泳图谱的方法，将花蜜样品采用超微滤膜过滤后，并利用蛋白质超滤浓缩纯化柱浓缩纯化花蜜蛋白质，然后利用Bradford法检测纯化浓缩后花蜜蛋白浓度，然后一维十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳预检测北美鹅掌楸花蜜蛋白质分子量分布范围，最后根据一维电泳结果选取适宜标准蛋白和适宜长度、pH范围的胶条采用双向电泳体系分离北美鹅掌楸花蜜蛋白质，获得二维电泳图谱。本发明方法具有操作简单、蛋白提取效率高、干扰物质少的特点，适合于液体样品此类特殊材料，并可获得分辨率高、蛋白点清晰、数目较多、分布均匀、背景清楚的高质量双向电泳凝胶图谱，且实验重复性和稳定性好。
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公开(公告)号：CN103088058B
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201310035666.6
申请日：2013-01-30
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杉木遗传转化方法，包括：转化受体的建立，农杆菌菌液制备，侵染，脱菌培养和筛选培养。该杉木遗传转化方法，以杉木悬浮细胞系为受体，以GUS基因为报告基因通过农杆菌介导的方法进行遗传转化，通过体细胞胚胎发生方式实现植株再生，建立起稳定高效的杉木遗传转化体系。利用本技术体系，可以以较低成本对杉木进行遗传改良，将基础理论研究中获得的抗病、抗逆、木材形成等相关的基因进行遗传转化，获得具有速生、抗病、抗逆性强等特点的优质杉木品种。
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