公开(公告)号：CN117378503B

公开(公告)日：2024-07-05

申请号：CN202311573585.1

申请日：2023-11-23

申请人： 南京林业大学

发明人： 杨立明 ,  徐明月 ,  左银悦 ,  苏文斌 ,  陈金慧 ,  施季森 ,  郝兆东

IPC分类号： A01H4/00

摘要： 本发明公开了一种杂交鹅掌楸组培快繁方法，属于组织培养技术领域。本发明将杂交鹅掌楸组培苗的根节段培养得到愈伤组织；将愈伤组织继代培养两次，培养得到继代两次的愈伤组织；将继代两次的愈伤组织培养得到不定芽；将不定芽培养得到杂交鹅掌楸的生根植株。本发明确定了终浓度为0.1mg/L6‑BA和0.1mg/L NAA组合为杂交鹅掌楸根诱导愈伤的最佳培养基，终浓度为0.05mg/L NAA+0.5mg/L 6‑BA组合为愈伤诱导不定芽的最佳培养基。该培养方法简化了常规组培育苗流程，降低了生产成本，开发了一种新的杂交鹅掌楸组培繁殖技术。

公开(公告)号：CN115735769B

公开(公告)日：2023-09-08

申请号：CN202211496446.9

申请日：2022-11-25

申请人： 南京林业大学

发明人： 陈金慧 ,  吴华 ,  郝兆东 ,  施季森 ,  郑仁华 ,  陆叶

IPC分类号： A01H4/00

摘要： 本申请公开了一种通过控制氧化还原稳态来促进杉木体胚发生的方法，属于植物组培技术领域。该方法为在将愈伤组织从继代培养基中转移到体胚诱导培养基中进行诱导培养步骤中，在体胚诱导培养基中至少添加有PSK‑α和DMTU。本申请的DCF和DAB染色实验证实，PSK‑α处理可以明显降低杉木体胚发生过程H2O2含量，说明PSK‑α可以通过维持氧化还原稳态来促进杉木的体胚发生。同时，H2O2高浓度处理会减少杉木体胚诱导产生的子叶胚数，而PSK‑α则可以缓解H2O2处理对杉木体胚诱导的负面影响。另外，DMTU处理可以提高杉木体细胞胚的子叶胚形成个数，并且在存在PSK‑α的情况下，DMTU协同PSK‑α进一步降低了H2O2含量并提高了杉木体胚发生效率，具有很好的实用性。

公开(公告)号：CN116590288A

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202211133794.X

申请日：2022-09-16

申请人： 南京林业大学

发明人： 施季森 ,  刘思芹 ,  鲁路 ,  郝兆东 ,  陆叶 ,  陈金慧

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/84 ,  A01H6/00 ,  A01H5/00

摘要： 本发明公开了一种杂交鹅掌楸顶端分生组织特异表达启动子ProWUS及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明基于中国鹅掌楸基因组序列信息，克隆获得启动子ProWUS序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。在克隆的启动子ProWUS的驱动下，报告基因可在植物体顶端分生组织处特异表达。应用本发明提供的启动子，可以在植物基因工程中，诱导相应目的基因在植株顶端分生组织中特异性表达，不仅可丰富植物茎尖的分子生物学理论基础，而且在植物顶端分生组织发育和干细胞维持等方面具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN116138166A

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202211568322.7

申请日：2022-12-07

申请人： 南京林业大学 ,  中国林业科学研究院林业研究所

发明人： 陈金慧 ,  李锐 ,  孙晓梅 ,  谢允慧 ,  张恺 ,  朱俊杰 ,  成铁龙 ,  施季森

IPC分类号： A01H4/00

摘要： 本发明公开了一种以合子胚为外植体的落叶松快繁方法，属于植物快繁技术领域。本发明以落叶松合子胚为外植体，在添加了2mg/L 2，4‑D和0.5mg/L 6‑BA的DCR培养基中成功诱导出胚性胚柄团，并以麦芽糖作为碳源进行增殖培养提高了体胚发生效率。响应面优化模型显示，影响杂交落叶体细胞胚诱导数量的因素，98.54％来源于PEG、ABA和PSK，经优化最终得到杂交落叶松体胚最佳诱导条件为PEG 207.45]g/L，ABA 10.563mg/L，PSK0.543mg/L，最高体胚诱导数量为52.2个/克胚性胚柄团，经体细胞胚萌发培养基培养后生根成苗。本发明为杂交落叶松的良种扩繁奠定了基础。

公开(公告)号：CN115735769A

公开(公告)日：2023-03-07

申请号：CN202211496446.9

申请日：2022-11-25

申请人： 南京林业大学

发明人： 陈金慧 ,  吴华 ,  郝兆东 ,  施季森 ,  郑仁华 ,  陆叶

IPC分类号： A01H4/00

摘要： 本申请公开了一种通过控制氧化还原稳态来促进杉木体胚发生的方法，属于植物组培技术领域。该方法为在将愈伤组织从继代培养基中转移到体胚诱导培养基中进行诱导培养步骤中，在体胚诱导培养基中至少添加有PSK‑α和DMTU。本申请的DCF和DAB染色实验证实，PSK‑α处理可以明显降低杉木体胚发生过程H2O2含量，说明PSK‑α可以通过维持氧化还原稳态来促进杉木的体胚发生。同时，H2O2高浓度处理会减少杉木体胚诱导产生的子叶胚数，而PSK‑α则可以缓解H2O2处理对杉木体胚诱导的负面影响。另外，DMTU处理可以提高杉木体细胞胚的子叶胚形成个数，并且在存在PSK‑α的情况下，DMTU协同PSK‑α进一步降低了H2O2含量并提高了杉木体胚发生效率，具有很好的实用性。

公开(公告)号：CN114181884A

公开(公告)日：2022-03-15

申请号：CN202111344539.5

申请日：2021-11-12

申请人： 南京林业大学 ,  德国弗莱堡大学

发明人： 陈金慧 ,  鲁路 ,  托马斯劳克斯 ,  施季森

IPC分类号： C12N5/04

摘要： 本申请公开了一种调控植物体细胞胚胎发生的方法，以植物未成熟合子胚为外植体，通过控制茎尖分生组织干细胞调控因子miR394和WUS的共同表达，诱导体胚发生。本申请的试验结果显示WUS促进体胚发生具有剂量效应和阶段效应，并且miR394不仅可以促进WUS调控茎尖分生组织发育，同时也可以提高WUS对体胚发生的诱导效率，进而将不易体胚发生的Ler拟南芥转化为可高效进行体细胞胚胎发生的植物。本申请不仅可以有效调控植物体胚发生，而且对重要经济植物的快速育种具有重要意义。

公开(公告)号：CN110301356B

公开(公告)日：2022-03-01

申请号：CN201910710664.X

申请日：2019-08-01

申请人： 南京林业大学

发明人： 陈金慧 ,  陈婷婷 ,  施季森 ,  陆叶 ,  王丹丹 ,  陈新颖 ,  翁禹豪 ,  成铁龙

IPC分类号： A01H4/00

摘要： 本发明公开了一种利用γ‑氨基丁酸促进杂交鹅掌楸体胚发生的培养基及应用，属于植物组培技术领域。本发明的杂交鹅掌楸体胚发生的培养基，是以3/4MS+VC 5mg/L+蔗糖30g/L为基础培养基，添加0～10mg/L的γ‑氨基丁酸；所添加的γ‑氨基丁酸能够促进杂交鹅掌楸愈伤组织体胚产生，加快体胚发育进程，提高体胚发生效率。本发明提供的的杂交鹅掌楸体胚发生的培养基，应用在杂交鹅掌楸体胚发生和组培中，体胚发生数目多、速度快、质量高，诱导的体胚成苗数极显著高于对照组，侧根数目及根长显著高于对照组，平均每块愈伤可形成20棵再生植株，具有很高的实际应用价值。

公开(公告)号：CN112725356A

公开(公告)日：2021-04-30

申请号：CN202110183041.9

申请日：2021-02-08

申请人： 南京林业大学

发明人： 杨立明 ,  朱礼明 ,  高敏 ,  施季森 ,  郝兆东 ,  陈金慧

IPC分类号： C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  C12N5/10 ,  C07K14/415 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

摘要： 本发明公开了一种鹅掌楸转录因子LcbHLH16421基因及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明通过生物信息学工具对鹅掌楸bHLH家族序列进行分析，然后通过测序和同源比较，克隆得到LcbHLH16421转录因子基因。对LcbHLH16421基因构建过表达载体，转化拟南芥，获得T1代种子；将LcbHLH16421转基因拟南芥T2代植株和野生型植株同时放入4℃低温处理3d，表型观察发现转基因植株的生长受到低温胁迫的影响较小，而野生型植株生长受到抑制，且叶片有萎蔫现象。结果表明鹅掌楸LcbHLH16421基因可以增强拟南芥植株对低温胁迫的耐受能力，在提高植物低温胁迫的分子育种中具有重要应用价值。

公开(公告)号：CN109929852B

公开(公告)日：2021-03-23

申请号：CN201910284374.3

申请日：2019-04-09

申请人： 南京林业大学

发明人： 陈金慧 ,  陆凤娟 ,  郝兆东 ,  陈桢雨 ,  陈新颖 ,  翁禹豪 ,  施季森 ,  成铁龙 ,  汪贵斌

IPC分类号： C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

摘要： 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9及其应用。该杂交鹅掌楸体胚胚根伸长关键基因LhHB9的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克隆出杂交鹅掌楸的LhHB9基因的cDNA序列，构建LhHB9基因的过表达载体，以杂交鹅掌楸胚性愈伤为受体材料，采用农杆菌介导法进行遗传转化。经G418筛选得到转基因愈伤后，对其进行检测，初步确定转基因成功。通过对LhHB9基因转基因愈伤体胚诱导发现，转基因体胚胚根有明显的伸长，统计数据显示，35S：LhHB9体细胞胚胚根与对照CK相比最显著，说明过表达靶基因可以促进胚根的伸长，具有很好的实用性。

公开(公告)号：CN110791506B

公开(公告)日：2020-12-04

申请号：CN201911178738.6

申请日：2019-11-27

申请人： 南京林业大学

发明人： 陈金慧 ,  陈新颖 ,  鲁路 ,  陆叶 ,  施季森 ,  成铁龙

IPC分类号： C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  C07K14/415 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

摘要： 本发明公开了一种唐古特白刺NtCIPK11基因及其表达蛋白和应用，属于植物基因工程技术领域。本发明公开的唐古特白刺CIPK11基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明根据唐古特白刺的耐盐和抗旱等抗逆特性，利用唐古特白刺的叶片组织，在已有的部分转录组数据的基础上，同源克隆了唐古特白刺抗逆相关的CIPK基因全长，依据拟南芥中的同源基因而命名为NtCIPK11。通过纯合NtCIPK11基因拟南芥植株的耐盐和抗旱分析，证明了唐古特白刺NtCIPK11基因转化植物具备耐盐性和抗旱性，为植物抗逆基因库增加了资源。