聚乙二醇衍生物修饰的白介素12及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN117897400A

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202280057277.0

    申请日:2022-09-30

    摘要: 一种聚乙二醇衍生物修饰的白介素12及其制备方法和应用。所述聚乙二醇衍生物修饰的白介素12是由聚乙二醇衍生物与白介素12经过修饰反应获得;所述聚乙二醇衍生物的活性基团包括醛基、酮基、马来酰亚胺基、乙烯基砜基、端炔烃基、琥珀酰亚胺基、对硝基苯基、氯甲酸异丁酯基、卤代基、硫代基和羧基中的一种或多种;所述白介素12的活性基团包括N末端的α‑氨基、赖氨酸侧链的ε‑氨基和半胱氨酸游离的巯基中的一种或多种。经过聚乙二醇衍生物修饰的白介素12能够平衡IL‑12的药物活性和药物毒性,能够单次使用更大剂量,且能够在体内维持更长时间的有效血药浓度而不会带来严重的毒副作用,有利于治疗的持续性,改善疾病治疗效果。

    一种聚山梨酯80的检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN117848983A

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202410086879.X

    申请日:2024-01-22

    IPC分类号: G01N21/31

    摘要: 本发明提供了一种聚山梨酯80的检测方法及其应用,所述检测方法包括以下步骤:将待测样品与氯化铵混合离心,接着取上清液与硫氰钴铵溶液混合反应,之后与有机溶剂混合静置,取有机相进行吸光度检测,根据检测结果结合标准曲线计算得到待测样品中聚山梨酯80的含量。本发明提供的检测方法无需进行空气吹扫,减少了操作难度,整体方法操作简单,检测准确度高、重复性好。

    直接特异性定量检测聚乙二醇化白介素-12的酶联免疫方法

    公开(公告)号:CN116735887A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202210208287.1

    申请日:2022-03-03

    IPC分类号: G01N33/68 G01N33/543

    摘要: 本发明提出一种直接特异性定量检测聚乙二醇化白介素‑12的酶联免疫方法,属于药物定量检测领域,能够解决现有的酶联免疫吸附方法易受其他蛋白干扰,进而无法准确测定通过给药进入体内的聚乙二醇修饰药物含量的技术问题。该技术方案包括:通过先将PEG特异性抗体包被于酶标板上,利用包被PEG特异性抗体的酶标板吸附待测样品中的聚乙二醇化白介素‑12,再加入白介素‑12特异性检测抗体依次经过孵育、显色、显色终止及检测步骤,实现聚乙二醇化白介素‑12定量检测。本发明能够应用于聚乙二醇化蛋白或多肽类药物定量检测方面。

    一种CHO-DHFR+细胞株及其应用

    公开(公告)号:CN112501126B

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202011393700.3

    申请日:2020-12-03

    IPC分类号: C12N5/10 C07K14/54 C12N15/85

    摘要: 本发明提供了一种CHO‑DHFR+细胞株及其应用。该细胞株的保藏编号为CCTCC NO:C2019264。本发明的CHO‑DHFR+细胞株能够无血清悬浮高密度培养,培养过程中仅需在培养体系中添加少量谷氨酰胺,即可维持细胞正常生长和生产,降低了谷氨酰胺代谢产生的有毒废物NH4+的积累,细胞倍增水平高、细胞活力高。采用含IL‑10基因序列的pcDNA3.1‑β重组质粒载体转染该CHO‑DHFR+细胞株,能够获得表达重组IL‑10的工程细胞株,通过含有G418的CD OptiCHO培养基培养,高效表达重组IL‑10蛋白,重组IL‑10蛋白的瞬转表达量大于0.96mg/L,有较好的商业应用价值。