公开(公告)号：CN115304673B

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202210721431.1

申请日：2022-06-24

申请人： 上海赛伦生物技术股份有限公司

发明人： 李鑫 ,  邵佳慧 ,  范铁炯 ,  柏伟 ,  张鑫 ,  谷宁 ,  管景帅

IPC分类号： C07K16/12 ,  C07K16/06

摘要： 本发明公开了一种马抗破伤风特异性免疫球蛋白F(ab’)2的纯化方法及其应用。该纯化方法包括以下步骤：S1、血浆稀释：将马抗破伤风血浆用水稀释；S2、胃蛋白酶消化；S3、AS和CA联合沉淀：S4、阴离子混合凝胶层析；S5、加热：调pH至7.4±0.2，加热至55‑58℃后，保温20‑60min，离心，过滤，取滤液；S6、免疫沉淀或免疫亲和层析；S7、超滤，得到所述马抗破伤风特异性免疫球蛋白F(ab’)2。本纯化方法提高了马抗破伤风特异性免疫球蛋白F(ab’)2的效价从而降低其过敏反应率，具有显著的经济社会效益。

公开(公告)号：CN115304673A

公开(公告)日：2022-11-08

申请号：CN202210721431.1

申请日：2022-06-24

申请人： 上海赛伦生物技术股份有限公司

发明人： 李鑫 ,  邵佳慧 ,  范铁炯 ,  柏伟 ,  张鑫 ,  谷宁 ,  管景帅

IPC分类号： C07K16/12 ,  C07K16/06

摘要： 本发明公开了一种马抗破伤风特异性免疫球蛋白F(ab’)2的纯化方法及其应用。该纯化方法包括以下步骤：S1、血浆稀释：将马抗破伤风血浆用水稀释；S2、胃蛋白酶消化；S3、AS和CA联合沉淀：S4、阴离子混合凝胶层析；S5、加热：调pH至7.4±0.2，加热至55‑58℃后，保温20‑60min，离心，过滤，取滤液；S6、免疫沉淀或免疫亲和层析；S7、超滤，得到所述马抗破伤风特异性免疫球蛋白F(ab’)2。本纯化方法提高了马抗破伤风特异性免疫球蛋白F(ab’)2的效价从而降低其过敏反应率，具有显著的经济社会效益。

公开(公告)号：CN109651491A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201910038715.9

申请日：2019-01-16

申请人： 上海赛伦生物技术股份有限公司

发明人： 李鑫 ,  史小月 ,  范铁炯 ,  柏伟 ,  孙九如 ,  谷宁

IPC分类号： C07K14/33 ,  C07K16/12 ,  C12N15/70 ,  A61K39/40 ,  A61P21/02 ,  A61P31/04

摘要： 本发明涉及能提高马抗破伤风免疫球蛋白滴度的免疫方法。将编码的破伤风毒素（Genbank：P04958）864-1315氨基酸的密码子按大肠杆菌偏好优化、在N-端引入6个组氨酸标签的破伤风毒素重链片段C DNA构建到大肠杆菌表达载体，转染至大肠杆菌、筛选到高表达菌株、经IPTG诱导、破菌、离心、镍离子螯合层析等手段，获得高纯度重组破伤风毒素重链C片段嵌合蛋白。该嵌合蛋白和破伤风类毒素共同免疫马匹可以提高马匹的抗破伤风免疫球蛋白滴度30%以上。

公开(公告)号：CN109651491B

公开(公告)日：2021-02-02

申请号：CN201910038715.9

申请日：2019-01-16

申请人： 上海赛伦生物技术股份有限公司

发明人： 李鑫 ,  史小月 ,  范铁炯 ,  柏伟 ,  孙九如 ,  谷宁

IPC分类号： C07K14/33 ,  C07K16/12 ,  C12N15/70 ,  A61K39/40 ,  A61P21/02 ,  A61P31/04

摘要： 本发明涉及能提高马抗破伤风免疫球蛋白滴度的免疫方法。将编码的破伤风毒素（Genbank：P04958）864‑1315氨基酸的密码子按大肠杆菌偏好优化、在N‑端引入6个组氨酸标签的破伤风毒素重链片段C DNA构建到大肠杆菌表达载体，转染至大肠杆菌、筛选到高表达菌株、经IPTG诱导、破菌、离心、镍离子螯合层析等手段，获得高纯度重组破伤风毒素重链C片段嵌合蛋白。该嵌合蛋白和破伤风类毒素共同免疫马匹可以提高马匹的抗破伤风免疫球蛋白滴度30%以上。