公开(公告)号：CN119120619A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411291234.6

申请日：2024-09-14

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  郭欢新 ,  牛萌萌 ,  姜楠 ,  温淼 ,  李岩 ,  李巧慧 ,  陈思远 ,  苏倩 ,  杨硕

IPC: C12P19/04 ,  C12N1/20 ,  C08B37/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种具有抗氧化能力的短双歧杆菌H4‑2荚膜多糖。从短双歧杆菌H4‑2中经提取纯化获得了均一的荚膜多糖CPS1。CPS1的重均分子量为11047 Da，全光谱扫描显示样品的蛋白质和核酸含量较低。CPS1包含甘露糖、鼠李糖、葡萄糖和半乳糖，它们的摩尔比为1:0.3:3.77:0.85。红外光谱分析表明，CPS1具有典型的多糖特征吸收峰。甲基化结果表明，CPS1 由7种糖苷键组成。进一步结合核磁共振光谱推测CPS1的骨架由→4)‑α‑D‑Glcp‑(1→、→4)‑α‑D‑Manp‑(1→、→3,4)‑α‑D‑Glcp‑(1→、→4,6)‑β‑D‑Galp‑(1→、→2)‑L‑Rhap‑(1→和→2,4)‑α‑L‑Rhap‑(1→残基组成，尾端由α‑D‑Glcp‑(1→残基组成。扫描电镜观察到CPS1表观形态呈不规则的颗粒状。热性能分析表明CPS1具有一定的热稳定性。该多糖具有抗氧化效果，有望开发成为一种天然抗氧化剂。

公开(公告)号：CN115569153A

公开(公告)日：2023-01-06

申请号：CN202211246638.4

申请日：2022-10-12

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  杨硕 ,  尚佳萃 ,  段勃帆 ,  唐宗馨

IPC: A61K35/745 ,  A61K35/74 ,  A61K35/742 ,  A61K31/19 ,  A61P1/00 ,  A61P1/04 ,  A61P29/00 ,  A61K49/00 ,  C12N1/20 ,  C12R1/01 ,  C12R1/145

Abstract: 本发明开发一种利用产生不同短链脂肪酸的菌株改善溃疡性结肠炎的方法。三种菌株分别是两歧双歧杆菌H3‑R2、费氏丙酸杆菌B1和丁酸梭菌C1‑6。探究了利用DSS诱导的小鼠模型评估受试菌株对UC的作用效果，发现三株菌显著降低了脾脏肿大、疾病活动指数(DAI)、结肠缩短、髓过氧化物酶(MPO)活性、促炎因子IL‑8、IL‑1β和TNF‑α的浓度、TLR‑2和TLR‑4表达以及ROCK‑1和Axin2的过表达；显著提高了结肠紧密连接蛋白的表达(ZO‑1，Occludin和Claudin‑1)、TLR‑5、LGR5和Rspo3的mRNA水平、α多样性Chao1指数和Simpson指数升高。此外，两歧双歧杆菌H3‑R2、费氏丙酸杆菌B1和丁酸梭菌C1‑6的使用使结肠内容物SCFAs水平显著升高(P

公开(公告)号：CN115011518A

公开(公告)日：2022-09-06

申请号：CN202210661119.8

申请日：2022-06-13

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  刘利军 ,  尚佳萃 ,  陈禹含 ,  杨硕

IPC: C12N1/20 ,  A61K35/744 ,  A61K35/745 ,  A61P1/00 ,  A61P1/04 ,  A61P35/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明开发一种具有缓解结肠炎相关结直肠癌作用的乳酸菌混合物及其应用。混合物包括两歧双歧杆菌H3‑R2和乳酸乳球菌KLDS4.0325(活菌数1:1)。评估了两菌及其混合物对结肠癌HT‑29细胞的影响，发现三者均可抑制HT‑29细胞增殖，上调Caspase‑3、Caspase‑9和Bax，下调Bcl‑2，促进HT‑29细胞凋亡。探究了两菌及其混合物对AOM/DSS诱导的结肠炎相关结直肠癌小鼠的影响。发现显著降低了结肠缩短、髓过氧化物酶(MPO)活性以及HIF‑1α水平；改善了CAC小鼠结肠组织学损伤，并表现出较低的白介素‑6(IL‑6)、白介素‑1β(IL‑1β)、白介素‑22(IL‑22)、白介素‑17(IL‑17)和肿瘤坏死因子‑α(TNF‑α)水平，同时上调了结肠和血清中抗炎细胞因子IL‑10的水平。此外，两菌联合使用能增加结肠紧密连接蛋白(ZO‑1、Claudin‑1和Occludin)的表达。

公开(公告)号：CN113493499A

公开(公告)日：2021-10-12

申请号：CN202110645445.5

申请日：2021-06-10

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  尚佳萃 ,  杨硕 ,  赵鹏昊

IPC: C07K14/195 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  A61P1/00

Abstract: 本发明公开一种利用两歧双歧H3‑R2的重组蛋白改善肠道炎症的方法，属于食品微生物及免疫调节技术领域。该方法利用无缝克隆技术成功在大肠杆菌M15中表达了H3‑R2的两种表面蛋白——GroEL和转醛醇酶(TAL)。采用20μg/mL脂多糖(LPS)诱导肠上皮细胞建立炎症模型，并将重组蛋白GroEL和TAL分别与20μg/mL的LPS共同作用于肠上皮细胞，检测重组蛋白对肠道炎症的作用。结果表明，当GroEL和TAL浓度分别为175μg/mL和125μg/mL时，炎症细胞因子IL‑8分泌量达到正常水平，具有抑制炎症发生的效果，拥有应用开发潜力。

公开(公告)号：CN118879807A

公开(公告)日：2024-11-01

申请号：CN202411293024.0

申请日：2024-09-14

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  郭欢新 ,  牛萌萌 ,  苏倩 ,  陈思远 ,  李巧慧 ,  李岩 ,  杨硕

IPC: C12P19/04 ,  C12N1/38 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种提高短双歧杆菌H4‑2荚膜多糖产量的方法。步骤一，观察短双歧杆菌H4‑2菌体形态，确认存在荚膜层；步骤二，从基因层面确定短双歧杆菌H4‑2可利用的单糖；步骤三，从保障短双歧杆菌H4‑2正常生长层面优化可利用的碳源；步骤四，提取荚膜多糖并称重，根据产量再次优化可利用的碳源。采用以葡萄糖和果糖为复合碳源（Glc:Fru=1:1）的优化mMRS培养基，37℃下发酵24 h提取荚膜多糖；荚膜多糖的产量由45.33 mg/L提高到87.33 mg/L，产量提高92.65%。

公开(公告)号：CN115011516B

公开(公告)日：2023-11-14

申请号：CN202210659410.1

申请日：2022-06-13

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  张晓桐 ,  陈禹含 ,  尚佳萃 ,  杨硕

IPC: C12N1/20 ,  C12Q1/04 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/92 ,  A23C9/13 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明开发一种具有缓解便秘功效的合生元酸奶及其制备方法。以酸奶质构特性和感官评价得分为指标，确定菊粉添加量6.1％、蔗糖添加量6.8％、双歧杆菌接种量5.5％、酸奶发酵剂用量0.003％、发酵时间6.1h，最终制备的酸奶中H3‑R2活菌数为5×107CFU/mL。使用便秘模型小鼠评价酸奶缓解便秘的效果。研究酸奶对小鼠健康指数、粪便含水量、小肠推进率、血清中胃肠调节肽和炎症因子水平、结肠组织状态、粪便中短链脂肪酸含量以及肠道菌群的影响。结果显示，小鼠便秘症状明显缓解。联合使用两歧双歧杆菌H3‑R2和菊粉开发出一种对便秘具有明显缓解作用的合生元酸奶，能够有效改善便秘症状，缓解便秘导致的粪便干硬、排便时间延长等症状，减轻肠道炎症反应。

公开(公告)号：CN113493499B

公开(公告)日：2023-08-22

申请号：CN202110645445.5

申请日：2021-06-10

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  尚佳萃 ,  杨硕 ,  赵鹏昊

IPC: C07K14/195 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  A61P1/00

Abstract: 本发明公开一种利用两歧双歧H3‑R2的重组蛋白改善肠道炎症的方法，属于食品微生物及免疫调节技术领域。该方法利用无缝克隆技术成功在大肠杆菌M15中表达了H3‑R2的两种表面蛋白——GroEL和转醛醇酶(TAL)。采用20μg/mL脂多糖(LPS)诱导肠上皮细胞建立炎症模型，并将重组蛋白GroEL和TAL分别与20μg/mL的LPS共同作用于肠上皮细胞，检测重组蛋白对肠道炎症的作用。结果表明，当GroEL和TAL浓度分别为175μg/mL和125μg/mL时，炎症细胞因子IL‑8分泌量达到正常水平，具有抑制炎症发生的效果，拥有应用开发潜力。

公开(公告)号：CN119033807A

公开(公告)日：2024-11-29

申请号：CN202411175330.4

申请日：2024-08-26

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  牛萌萌 ,  郭欢新 ,  于航 ,  马梁雨 ,  杨硕 ,  苏倩 ,  陈思远 ,  李岩 ,  李巧慧

IPC: A61K31/715 ,  A61K35/745 ,  A61P1/00 ,  A23L33/125

Abstract: 本发明公开了从短双歧杆菌H4‑2中分离的富含甘露糖的胞外多糖在制备缓解OVA引起的小鼠肠道损伤的药物中的用途。本发明提供了短双歧杆菌H4‑2胞外多糖多糖的新用途，EPS‑1干预能有效缓解OVA引起的小鼠过敏反应，通过增加小鼠回肠组织中的粘蛋白含量和杯状细胞计数来改善肠道物理屏障。而且，EPS‑1干预通过恢复不平衡的CD4+T/CD8+T比率、调节Th1/Th2和Th17/Treg细胞平衡以及抑制NF‑κB信号通路的激活来维持免疫屏障的完整性。此外，EPS‑1干预通过增加Ruminococcus、Butyricicoccus和Muribaculaceae的丰度，同时减少Streptococcus和Candidatus Arthromitus的丰度，维持了肠道微生物群屏障内的稳态。最后，EPS‑1通过提高酪氨酸、蛋氨酸、色氨酸、甘油三酯和红景天苷等代谢产物的含量，间接减轻了OVA诱导的肠道损伤。

公开(公告)号：CN115011516A

公开(公告)日：2022-09-06

申请号：CN202210659410.1

申请日：2022-06-13

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  张晓桐 ,  陈禹含 ,  尚佳萃 ,  杨硕

IPC: C12N1/20 ,  C12Q1/04 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/92 ,  A23C9/13 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明开发一种具有缓解便秘功效的合生元酸奶及其制备方法。以酸奶质构特性和感官评价得分为指标，确定菊粉添加量6.1％、蔗糖添加量6.8％、双歧杆菌接种量5.5％、酸奶发酵剂用量0.003％、发酵时间6.1h，最终制备的酸奶中H3‑R2活菌数为5×107CFU/mL。使用便秘模型小鼠评价酸奶缓解便秘的效果。研究酸奶对小鼠健康指数、粪便含水量、小肠推进率、血清中胃肠调节肽和炎症因子水平、结肠组织状态、粪便中短链脂肪酸含量以及肠道菌群的影响。结果显示，小鼠便秘症状明显缓解。联合使用两歧双歧杆菌H3‑R2和菊粉开发出一种对便秘具有明显缓解作用的合生元酸奶，能够有效改善便秘症状，缓解便秘导致的粪便干硬、排便时间延长等症状，减轻肠道炎症反应。