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公开(公告)号：CN104232684B
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201410442448.9
申请日：2014-09-02
申请人： 中南大学 , 湖南家辉生物技术有限公司家辉遗传专科医院
摘要： 本发明公开了提供一种小鼠核糖体基因区打靶载体及其构建方法。所述小鼠核糖体基因区打靶载体中含有如SEQ ID NO.1所示的同源臂序列。本发明在核糖体基因区较高的同源重组效率基础上，旨在针对核糖体基因区位点，利用本发明有效地将目的基因打靶到小鼠不同类型细胞的核糖体基因区，再通过启动子陷阱策略富集基因打靶阳性克隆，此外Loxp序列的引入可以实现之后不同基因在打靶位置高效替换。本发明后续主要应用小鼠胚胎干细胞的核糖体基因区打靶，再最终建立核糖体基因区打靶的小鼠模型，为验证以核糖体基因区基因打靶的有效性、生物安全性提供基础。
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公开(公告)号：CN104232684A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410442448.9
申请日：2014-09-02
申请人： 中南大学 , 湖南家辉生物技术有限公司家辉遗传专科医院
摘要： 本发明公开了提供一种小鼠核糖体基因区打靶载体及其构建方法。所述小鼠核糖体基因区打靶载体中含有如SEQ ID NO.1所示的同源臂序列。本发明在核糖体基因区较高的同源重组效率基础上，旨在针对核糖体基因区位点，利用本发明有效地将目的基因打靶到小鼠不同类型细胞的核糖体基因区，再通过启动子陷阱策略富集基因打靶阳性克隆，此外Loxp序列的引入可以实现之后不同基因在打靶位置高效替换。本发明后续主要应用小鼠胚胎干细胞的核糖体基因区打靶，再最终建立核糖体基因区打靶的小鼠模型，为验证以核糖体基因区基因打靶的有效性、生物安全性提供基础。
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公开(公告)号：CN107805627B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201710894222.6
申请日：2017-09-28
申请人： 中南大学
摘要： 本发明公开了一种特异性示踪内皮细胞分化的hESC指示细胞系的构建方法，该方法包括如下步骤：(1)构建质粒CD144N‑GFP；(2)构建质粒TALENs，所述质粒TALENs包括质粒CD144N‑L2和质粒CD144N‑R2；(3)将质粒CD144N‑GFP和质粒TALENs同时核转ESCs，经过G418筛选，挑取单克隆之后，利用跨5’同源臂引物F1/R1及跨3’同源臂引物F2/R2进行PCR初步鉴定，鉴定双侧阳性者进行Southern blot鉴定，利用Kpn I酶切，长同源臂上探针进行杂交鉴定，阳性者即为特异性示踪内皮细胞分化的hESC指示细胞系。
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公开(公告)号：CN108396060A
公开(公告)日：2018-08-14
申请号：CN201810192911.7
申请日：2018-03-09
申请人： 中南大学
发明人： 邬玲仟
IPC分类号： C12Q1/6851
摘要： 本发明公开了一种基于实时荧光定量PCR技术的脊肌萎缩症致病基因SMN1拷贝数检测试剂盒及方法，其中包括一对目的基因SMN1基因7号外显子锁核酸修饰的特异引物SMN1-F(SEQ ID NO.1)和SMN1-R(SEQ ID NO.2)、SMN1检测探针(SEQ ID NO.3)、SMN-P锁核酸修饰以及3’端C3Spacer修饰的SMN2基因封闭探针SMN2-B(SEQ ID NO.4)、内参基因ALB基因引物ALB-F(SEQ ID NO.5)和ALB-R(SEQ ID NO.6)、ALB检测探针ALB-P(SEQ ID NO.7)。通过锁核酸修饰增强SMN1基因扩增特异性及扩增效率，运用多重PCR原理，通过优化反应体系和条件，建立目的基因、内参基因双重扩增的稳定反应体系，可保证SMN1拷贝数定量的精确性和可靠性，重复性好，可操作性强。
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公开(公告)号：CN104762318B
公开(公告)日：2016-10-05
申请号：CN201510053175.3
申请日：2015-02-02
申请人： 中南大学
摘要： 本发明公开了一种人凝血因子VIII基因22号内含子倒位型突变的原位修复质粒、试剂盒及方法。本发明构建了针对性的原位修复治疗，针对性地修复这种类型的F8突变，并且联合应用TALEN技术在血友病病人特异的iPSCs中验证了这种原位修复策略。这是国际上第一个针对内含子22倒位这种常见HA突变的原位修复策略。原位修复策略导入的序列是精确的定点导入，相对安全，不存在现有技术中的不确定性。
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公开(公告)号：CN113736824B
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202110953746.4
申请日：2021-08-19
申请人： 中南大学
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/12 , C12N5/074 , C12N5/0789 , A61K35/28 , A61K38/37 , A61K48/00 , A61P7/04
摘要： 本发明提供一种治疗A型血友病的重组载体、诱导性多能干细胞及其制备方法。本发明使用非病毒载体对诱导性多能干细胞进行基因打靶，将血小板特异性启动子启动的F8表达框靶入诱导性多能干细胞中。避免了使用病毒元件可能存在的随机插入和免疫原性的风险。诱导性多能干细胞可定向分化形成造血祖细胞，所得造血祖细胞的转录水平F8基因表达量和FⅧ蛋白表达量均明显高于正常人细胞的转录水平F8基因表达量和FⅧ蛋白表达量。
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公开(公告)号：CN116479022A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202210613661.6
申请日：2018-12-12
申请人： 中南大学
IPC分类号： C12N15/62 , C12N15/867 , C12N5/10
摘要： 本发明公开了一种重组CAR19‑IL24基因、慢病毒载体、CAR19‑IL24‑T细胞及应用，属于肿瘤细胞免疫技术领域。利用本发明可以有效制备CAR19‑IL24‑T细胞，其表达靶向肿瘤抗原的嵌合抗原受体和白介素24，有良好的肿瘤杀伤能力。CAR19‑IL24‑T细胞是一种安全、特异、有效的CART细胞，具有重要的临床应用价值。
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公开(公告)号：CN116286826A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310399324.6
申请日：2023-04-14
申请人： 中南大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12Q1/6844 , C12Q1/70 , C12Q1/689 , C12N15/11 , C12R1/46 , C12R1/445 , C12R1/22 , C12R1/01 , C12R1/93 , C12R1/92
摘要： 本发明涉及基因检测技术领域，特别涉及一种双末端经修饰的crRNA片段及检测试剂盒。所述双末端修饰的crRNA是在crRNA片段的3’端和5’端均具有DNA修饰片段。在crRNA片段的3’端和5’端增加上述修饰片段后，使用该经修饰的CrRNA片段的CRISPR/DX检测体系后期灵敏度相较于使用未添加修饰的crRNA片段和一端修饰的crRNA片段均有大幅提高。本发明开发双末端修饰的crRNA在一步法反应中展现出比野生型crRNA高100‑1000倍的灵敏度，具有检测时间短、灵敏性高、操作简便的优势。
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公开(公告)号：CN104762318A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510053175.3
申请日：2015-02-02
申请人： 中南大学
摘要： 本发明公开了一种人凝血因子VIII基因22号内含子倒位型突变的原位修复质粒、试剂盒及方法。本发明构建了针对性的原位修复治疗，针对性地修复这种类型的F8突变，并且联合应用TALEN技术在血友病病人特异的iPSCs中验证了这种原位修复策略。这是国际上第一个针对内含子22倒位这种常见HA突变的原位修复策略。原位修复策略导入的序列是精确的定点导入，相对安全，不存在现有技术中的不确定性。
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