公开(公告)号：CN114813266A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210251108.2

申请日：2022-03-15

申请人： 中国人民解放军海军军医大学第三附属医院

发明人： 王红阳 ,  文文 ,  陈淑桢 ,  辛鑫

IPC分类号： G01N1/28 ,  G01N1/34 ,  G01N1/38 ,  G01N1/40 ,  G01N33/58 ,  G01N33/66 ,  G01N21/76

摘要： 本发明提供了血液样本中GPC‑3复合物的富集、检测方法及应用。富集方法包括A、采集肝癌患者外周血置于抗凝管中并混匀全血；B、加入多倍体积的红细胞裂解液，吹打混匀，冰上裂解后，离心弃红色上清，若细胞沉淀仍有红色，重复该步骤；C、洗涤沉淀1‑2次，加入PBS或生理盐水重悬沉淀，离心弃上清；D、白细胞计数，加PBS重悬细胞沉淀，取适量充池，静置2‑3分钟，通过低倍镜四角4个大方格手工白细胞计数，计算公式如下：WBC/L＝N/4*105*104，并计算每毫升原悬液中的白细胞数量，WBC/ml原悬液＝N/4*104*稀释倍数；E、获取的细胞加入含1％蛋白酶抑制剂和1％磷酸酶抑制剂的裂解液，冷藏静置一定时间后，离心获取上清液作为待检测样本，实现GPC‑3富集。