公开(公告)号：CN103060272B

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201210534285.8

申请日：2012-12-12

申请人： 中国人民解放军第三军医大学药学院

发明人： 司维柯 ,  牛长春 ,  赵宸 ,  潘静 ,  张晓丽 ,  吴玮铷

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N15/85

摘要： 本发明涉及一种基因抑制细胞K562-siWnt5a及其制备方法，其中基因抑制细胞K562-siWnt5a的保藏号为CCTCC NO：C201291。所述制备方法主要包含步骤质粒pSEB-HUS-Wnt5a的构建，质粒pSEB-HUS-Wnt5a和pCL-Ampho去内毒素大量提取，pSEB-HUS-Wnt5a和pCL-Ampho与脂质体2000共转染HEK293细胞，筛选和鉴定阳性细胞克隆。构建的基因抑制细胞K562-siWnt5a细胞，有利于进一步的研究过表达Wnt5a对于白血病的作用和机制。

公开(公告)号：CN103555668A

公开(公告)日：2014-02-05

申请号：CN201310516066.1

申请日：2013-10-28

申请人： 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院

发明人： 司维柯 ,  张晓丽 ,  赵宸 ,  牛长春 ,  杨忠 ,  吴韦铷 ,  潘静

IPC分类号： C12N5/20 ,  C07K16/18 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/574

摘要： 本发明涉及一种杂交瘤细胞株及其产生的抗Wnt5a单克隆抗体与应用，具体而言，本发明通过分子克隆和单克隆抗体技术，筛选了一株可分泌特异识别wnt5a的单克隆抗体的杂交瘤细胞株Wnt5a。由杂交瘤细胞株Wnt5a所分泌的单克隆抗体可用于人体骨髓和血液中白血病变的临床检测。

公开(公告)号：CN103555668B

公开(公告)日：2015-04-08

申请号：CN201310516066.1

申请日：2013-10-28

申请人： 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院

发明人： 司维柯 ,  张晓丽 ,  赵宸 ,  牛长春 ,  杨忠 ,  吴韦铷 ,  潘静

IPC分类号： C12N5/20 ,  C07K16/18 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/574

摘要： 本发明涉及一种杂交瘤细胞株及其产生的抗Wnt5a单克隆抗体与应用，具体而言，本发明通过分子克隆和单克隆抗体技术，筛选了一株可分泌特异识别wnt5a的单克隆抗体的杂交瘤细胞株Wnt5a。由杂交瘤细胞株Wnt5a所分泌的单克隆抗体可用于人体骨髓和血液中白血病变的临床检测。

公开(公告)号：CN103060272A

公开(公告)日：2013-04-24

申请号：CN201210534285.8

申请日：2012-12-12

申请人： 中国人民解放军第三军医大学药学院

发明人： 司维柯 ,  牛长春 ,  赵宸 ,  潘静 ,  张晓丽 ,  吴玮铷

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N15/85

摘要： 本发明涉及一种基因抑制细胞K562-siWnt5a及其制备方法，其中基因抑制细胞K562-siWnt5a的保藏号为CCTCCC201291。所述制备方法主要包含步骤质粒pSEB-HUS-Wnt5a的构建，质粒pSEB-HUS-Wnt5a和pCL-Ampho去内毒素大量提取，pSEB-HUS-Wnt5a和pCL-Ampho与脂质体2000共转染HEK293细胞，筛选和鉴定阳性细胞克隆。构建的基因抑制细胞K562-siWnt5a细胞，有利于进一步的研究过表达Wnt5a对于白血病的作用和机制。

公开(公告)号：CN101691585B

公开(公告)日：2012-05-30

申请号：CN200910104713.1

申请日：2009-08-27

申请人： 中国人民解放军第三军医大学

发明人： 司维柯 ,  牛长春 ,  李军 ,  李招权 ,  潘静 ,  赵宸

IPC分类号： C12N15/85

摘要： 本发明涉及一种重组质粒pSEB-Wnt5a及其制备方法，其中该重组质粒包含载体片段pSEB和基因片段Wnt5a。上述载体片段pSEB来自质粒pSEB-flag，基因片段Wnt5a来自质粒pAdTrack-Wnt5a。重组表达质粒pSEB-Wnt5a的成功构建，有利于进一步的研究表达Wnt5a的逆转录病毒载体的构建和研究Wnt5a基因在肿瘤发生中的作用和机理研究。

公开(公告)号：CN101724603A

公开(公告)日：2010-06-09

申请号：CN200910191167.X

申请日：2009-10-20

申请人： 中国人民解放军第三军医大学

发明人： 司维柯 ,  牛长春 ,  李军 ,  李招权 ,  潘静 ,  赵宸

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N15/867

摘要： 本发明涉及一种转基因细胞K562-Wnt5a及其制备方法，其中该转基因细胞包含基因片段Wnt5a。上述基因片段Wnt5a来自以pSEB-Wnt5a为载体的逆转录病毒。使用逆转录病毒作为载体，可以把外源性的启动子和Wnt5a基因整合到细胞的基因组中，从而能够稳定内源性表达Wnt5a而不丢失，便于对Wnt5a的研究。转基因细胞K562-Wnt5a的构建，对于进一步研发白血病诊断和预后判断指标和Wnt5a作为基因治疗靶点的研究有重要意义，有利于进一步的研究表达过表达Wnt5a对于白血病的作用以及机制。

公开(公告)号：CN101691585A

公开(公告)日：2010-04-07

申请号：CN200910104713.1

申请日：2009-08-27

申请人： 中国人民解放军第三军医大学

发明人： 司维柯 ,  牛长春 ,  李军 ,  李招权 ,  潘静 ,  赵宸

IPC分类号： C12N15/85

摘要： 本发明涉及一种重组质粒pSEB-Wnt5a及其制备方法，其中该重组质粒包含载体片段pSEB和基因片段Wnt5a。上述载体片段pSEB来自质粒pSEB-flag，基因片段Wnt5a来自质粒pAdTrack-Wnt5a。重组表达质粒pSEB-Wnt5a的成功构建，有利于进一步的研究表达Wnt5a的逆转录病毒载体的构建和研究Wnt5a基因在肿瘤发生中的作用和机理研究。