公开(公告)号：CN104258385B

公开(公告)日：2016-05-04

申请号：CN201410277713.2

申请日：2014-11-03

Applicant: 中国兽医药品监察所

Inventor： 吴华伟 ,  陈晓春 ,  高艳春 ,  郎洪武 ,  邓永 ,  李俊平 ,  李慧姣 ,  夏业才

IPC: A61K39/17 ,  A61P31/14 ,  C12N7/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及BHK-21细胞全悬浮培养技术在新城疫疫苗生产中的应用。本发明公开的BHK-21细胞全悬浮培养生产新城疫疫苗的工艺包括以下步骤：(1)病毒株选育：鸡胚培养的新城疫疫苗种毒接种单层BHK-21细胞，加入病毒维持液培养，得到适应BHK-21细胞的新城疫疫苗毒，并进行系统鉴定；(2)悬浮细胞株的驯化与选育：适合新城疫病毒培养用全悬浮BHK21细胞的驯化和基础种子的建立；(3)悬浮细胞扩大培养；(4)接毒和收毒：适应BHK-21细胞的新城疫疫苗毒接种及其毒液收获；(5)增殖新城疫疫苗毒的毒价测定与配苗。本发明使得新城疫疫苗实现了由鸡胚向哺乳动物细胞大规模培养生产的转变，这不仅简化了新城疫疫苗的生产工艺，降低生产成本，还大大提高疫苗的产量和质量。

公开(公告)号：CN103981153A

公开(公告)日：2014-08-13

申请号：CN201410234394.7

申请日：2014-05-29

Applicant: 中国兽医药品监察所

Inventor： 李俊平 ,  陈晓春 ,  杨承槐 ,  李启红 ,  李慧姣 ,  夏业才 ,  吴华伟 ,  邓永 ,  徐微 ,  蔡青秀

IPC: C12N7/00 ,  C12N15/63 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种伪狂犬病病毒双荧光标记缺失病毒的构建。该病毒以自行分离的一株伪狂犬病病毒(SX株)为母本，通过分子生物学、细胞生物学等手段，缺失gE基因、gI基因、US9基因和TK基因，并以绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(RFP)作为标记蛋白代替缺失的基因，获得双荧光标记的缺失病毒rPRV/gEˉ/gIˉ/US9ˉ/TKˉ/GFP+/RFP+；以该双荧光标记缺失病毒作为活载体的成功构建，为研制重组伪狂犬病基因工程疫苗奠定了基础。

公开(公告)号：CN103981153B

公开(公告)日：2017-07-07

申请号：CN201410234394.7

申请日：2014-05-29

Applicant: 中国兽医药品监察所

Inventor： 李俊平 ,  陈晓春 ,  杨承槐 ,  李启红 ,  李慧姣 ,  夏业才 ,  吴华伟 ,  邓永 ,  徐微 ,  蔡青秀

IPC: C12N7/00 ,  C12N15/63 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种伪狂犬病病毒双荧光标记缺失病毒的构建。该病毒以自行分离的一株伪狂犬病病毒(SX株)为母本，通过分子生物学、细胞生物学等手段，缺失gE基因、gI基因、US9基因和TK基因，并以绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(RFP)作为标记蛋白代替缺失的基因，获得双荧光标记的缺失病毒rPRV/gEˉ/gIˉ/US9ˉ/TKˉ/GFP+/RFP+；以该双荧光标记缺失病毒作为活载体的成功构建，为研制重组伪狂犬病基因工程疫苗奠定了基础。

公开(公告)号：CN104258385A

公开(公告)日：2015-01-07

申请号：CN201410277713.2

申请日：2014-11-03

Applicant: 中国兽医药品监察所

Inventor： 吴华伟 ,  陈晓春 ,  高艳春 ,  郎洪武 ,  邓永 ,  李俊平 ,  李慧姣 ,  夏业才

IPC: A61K39/17 ,  A61P31/14 ,  C12N7/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及BHK-21细胞全悬浮培养技术在新城疫疫苗生产中的应用。本发明公开的BHK-21细胞全悬浮培养生产新城疫疫苗的工艺包括以下步骤：(1)病毒株选育：鸡胚培养的新城疫疫苗种毒接种单层BHK-21细胞，加入病毒维持液培养，得到适应BHK-21细胞的新城疫疫苗毒，并进行系统鉴定；(2)悬浮细胞株的驯化与选育：适合新城疫病毒培养用全悬浮BHK21细胞的驯化和基础种子的建立；(3)悬浮细胞扩大培养；(4)接毒和收毒：适应BHK-21细胞的新城疫疫苗毒接种及其毒液收获；(5)增殖新城疫疫苗毒的毒价测定与配苗。本发明使得新城疫疫苗实现了由鸡胚向哺乳动物细胞大规模培养生产的转变，这不仅简化了新城疫疫苗的生产工艺，降低生产成本，还大大提高疫苗的产量和质量。

公开(公告)号：CN103224913B

公开(公告)日：2014-05-14

申请号：CN201310165572.0

申请日：2013-05-08

Applicant: 中国兽医药品监察所

Inventor： 杨承槐 ,  李俊平 ,  李启红 ,  张广川 ,  刘丹 ,  李岭 ,  毛娅卿 ,  李慧姣 ,  夏业才

IPC: C12N7/00 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种鸭瘟活疫苗及其制备方法。所提供的鸭肠炎病毒是人工致弱的鸭肠炎病毒CGMCC？No.7460（DEVC86）株，能在CEF繁殖，病毒含量高，制造疫苗方便；雏鸭安全，对鸡不致死，具有良好的生物安全性；免疫原性好，能有效地保护各品种鸭抵抗鸭瘟感染；该鸭肠炎病毒CGMCCNo.7460株的基因组145818-147618位缺失区域按常规生物学技术插入不同的水禽病毒的保护性抗原基因片段构建成相应的重组病毒。

公开(公告)号：CN103224913A

公开(公告)日：2013-07-31

申请号：CN201310165572.0

申请日：2013-05-08

Applicant: 中国兽医药品监察所

Inventor： 杨承槐 ,  李俊平 ,  李启红 ,  张广川 ,  刘丹 ,  李岭 ,  毛娅卿 ,  李慧姣 ,  夏业才

IPC: C12N7/00 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种鸭瘟活疫苗及其制备方法。所提供的鸭肠炎病毒是人工致弱的鸭肠炎病毒CGMCC No.7460（DEVC86）株，能在CEF繁殖，病毒含量高，制造疫苗方便；雏鸭安全，对鸡不致死，具有良好的生物安全性；免疫原性好，能有效地保护各品种鸭抵抗鸭瘟感染；该鸭肠炎病毒CGMCC No.7460株的基因组145818-147618位缺失区域按常规生物学技术插入不同的水禽病毒的保护性抗原基因片段构建成相应的重组病毒。