一种瓜蒌斑驳花叶病毒诱导的基因沉默载体及构建方法和应用

    公开(公告)号:CN118345114B

    公开(公告)日:2024-12-31

    申请号:CN202410464277.3

    申请日:2024-04-17

    Abstract: 本发明公开了一种瓜蒌斑驳花叶病毒诱导的基因沉默载体及构建方法和应用,将瓜蒌斑驳花叶病毒侵染性克隆载体引入单一多克隆位点,获得pCB301‑TrMMV‑MCS基因沉默载体骨架,用RT‑PCR的方法克隆本氏烟和葫芦科植物内源基因片段,并插入到pCB301‑TrMMV‑MCS的多克隆位点从而获得基因沉默载体,该载体通过农杆菌注射接种并摩擦转接的方法诱导本氏烟内源基因的良好沉默,且沉默表型能够持续到花萼。该基因沉默载体能够诱导包括西葫芦、黄瓜和甜瓜等葫芦科植物的基因沉默;在甜瓜中展现良好的沉默效果,能够引起甜瓜花明显的基因沉默表型。本发明的基因沉默载体为葫芦科等植物基因功能研究提供了有效的工具。

    一种瓜蒌斑驳花叶病毒诱导的基因沉默载体及构建方法和应用

    公开(公告)号:CN118345114A

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202410464277.3

    申请日:2024-04-17

    Abstract: 本发明公开了一种瓜蒌斑驳花叶病毒诱导的基因沉默载体及构建方法和应用,将瓜蒌斑驳花叶病毒侵染性克隆载体引入单一多克隆位点,获得pCB301‑TrMMV‑MCS基因沉默载体骨架,用RT‑PCR的方法克隆本氏烟和葫芦科植物内源基因片段,并插入到pCB301‑TrMMV‑MCS的多克隆位点从而获得基因沉默载体,该载体通过农杆菌注射接种并摩擦转接的方法诱导本氏烟内源基因的良好沉默,且沉默表型能够持续到花萼。该基因沉默载体能够诱导包括西葫芦、黄瓜和甜瓜等葫芦科植物的基因沉默;在甜瓜中展现良好的沉默效果,能够引起甜瓜花明显的基因沉默表型。本发明的基因沉默载体为葫芦科等植物基因功能研究提供了有效的工具。

    葫芦轻花叶病毒及其侵染性克隆载体、构建方法和应用

    公开(公告)号:CN116836947A

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202310825349.8

    申请日:2023-07-06

    Abstract: 本发明公开了一种葫芦轻花叶病毒及其侵染性克隆载体、构建方法和应用,所述葫芦轻花叶病毒(Cucurbit mild mosaic virus,CuMMV)的RNA1和RNA2全基因组序列如SEQ IDNo:21‑22所示。该葫芦轻花叶病毒的侵染性克隆载体分别由葫芦轻花叶病毒RNA1和RNA2的全基因组序列融合到带35S启动子和核酶Rz的载体pCB301制备得到。通过农杆菌介导转化后在寄主体内转录、复制、侵染,以用于病毒的功能基因组研究。本发明为研究该病毒基因组结构和功能,以及其与葫芦科作物的相互作用研究提供了成熟的体系。

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