一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用

    公开(公告)号:CN115161267B

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202210993447.8

    申请日:2022-08-18

    IPC分类号: C12N5/075 C12N5/073

    摘要: 本发明公开一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用,在商品化的基础培养液TL‑FERT中添加组合营养添加剂FBS+猴血清+100×非必须氨基酸+50×必须氨基酸,取出未成熟卵母细胞放置其中培养,培养液上方添加矿物油,于培养箱中培养即可。与先前研究的培养液为成熟卵母细胞发育效果相比,本发明的未成熟卵母细胞体外成熟率及ICSI后的受精率和优质胚胎率都有显著提高,证明了食蟹猴未成熟卵母细胞的再利用价值。本发明是一种有效、经济、简便的卵母细胞及胚胎培养方法,可推广至非人灵长类其它动物的未成熟卵母细胞及胚胎培养中,获得更多可移植用的胚胎及子代动物。

    检测树鼩NF-κB基因转录水平的引物、试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN111197084A

    公开(公告)日:2020-05-26

    申请号:CN202010162532.0

    申请日:2020-03-10

    摘要: 本发明涉及一种检测树鼩NF-κB基因转录水平的引物、试剂盒及方法,属于分子生物技术领域。本发明以样品总RNA反转录成的cDNA为模板,利用NF-κB F和NF-κB R以及GAPDH F和GAPDH R为特异性引物进行实时荧光定量PCR扩增,根据反应体系中荧光的变化情况定量NF-κB基因转录水平。本发明研究俩氧嗪酸钾给药和空白处理下树鼩肝脏中NF-κB基因的转录水平,结果表明随着氧嗪酸钾给药时间增长,NF-κB基因的转录水平增高,说明氧嗪酸钾可以影响NF-κB基因的表达调控。通过NF-κB基因在高尿酸血症动物模型中的变化,可以深入了解高尿酸血症与肾病的关联以及发病机理,为疾病的治疗提供基础。

    RT-qPCR检测树鼩SLC22A12/URAT1基因转录水平的方法

    公开(公告)号:CN108330172A

    公开(公告)日:2018-07-27

    申请号:CN201710902502.7

    申请日:2017-09-29

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明提供一种RT-qPCR检测树鼩SLC22A12/URAT1基因转录水平的方法。以树鼩新鲜肾脏组织提取总RNA,按常规逆转录合成得树鼩肾脏组织cDNA第一链为模板,利用PCR引物组合进行实时荧光定量PCR扩增,获得SLC22A12/URAT1基因片段及内参基因GAPDH片段的Ct值、溶解峰及扩增效率;通过处理得出均一化后的SLC22A12/URAT1基因倍数表达的ΔΔC(t)值而获得SLC22A12/URAT1基因转录水平相对表达值。为研究树鼩尿酸盐阴离子转运体1功能以及相关药物对其影响提供了有效途径。本发明适用于实时定量PCR检测,其灵敏性高、特异性强、操作简单,可重复性高。

    RT-PCR检测树鼩黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因转录水平的方法

    公开(公告)号:CN104164481B

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201410194650.4

    申请日:2014-05-09

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明提供RT-PCR检测树鼩黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因转录水平的方法。以样品总RNA反转录成的cDNA为模板,利用PCR引物组合进行PCR扩增,得到XDH/XO基因片段的扩增产物的灰度值与内参基因GAPDH PCR扩增产物的灰度值之比,根据所得灰度值之比即可计算出不同生理状况下XDH/XO mRNA的相对表达值,并根据所计算的相对表达值的大小半定量检测树鼩黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因转录水平,为研究树鼩黄嘌呤氧化酶功能以及相关药物对其影响提供了有效途径。本发明适用于半定量RT-PCR检测,其费用低、操作简单,可重复性高,检测成本低、特异性和灵敏性好。

    急性高尿酸血症树鼩模型的构建方法

    公开(公告)号:CN103977007B

    公开(公告)日:2015-10-21

    申请号:CN201410188582.0

    申请日:2014-05-06

    IPC分类号: A61K31/53

    摘要: 本发明涉及急性高尿酸血症树鼩模型的构建方法,它包括如下步骤:步骤(1):选取体重为110~150g,年龄为1~3岁成年健康树鼩;步骤(2):分别测定步骤(1)所述的树鼩中雄性与雌性的空腹血清尿酸值;步骤(3):对步骤(1)所述的树鼩进行常规性饲养,并对其施以用手抓放的预处理;步骤(4):对步骤(3)处理后的树鼩腹腔注射给予氧嗪酸钾混悬液,所述氧嗪酸钾混悬液的用量按树鼩体重为40mg/kg~100mg/kg,即得到急性高尿酸血症树鼩模型。该模型具有典型的疾病表征,数量指标具有统计学意义,同时血清尿素氮、血清肌酐值及组织病理学证实该造模剂量区间较为安全,不造成肝肾影响。