用人胚肺二倍体细胞培养繁殖脊髓灰质炎病毒的方法

    公开(公告)号:CN100500827C

    公开(公告)日:2009-06-17

    申请号:CN200410079584.2

    申请日:2004-11-26

    IPC分类号: C12N1/04 C12N7/00

    摘要: 本发明提供一种用人胚肺二倍体细胞KMB17培养脊髓灰质炎病毒的方法,其特征在于取人胚肺二倍体成纤维细胞KMB17或者人二倍体成纤维细胞2BS的第10~40代,并将单层细胞分散并悬浮于培养液中,静置培养至长成致密单层,用含血清的培养基将细胞收集,加入脊髓灰质炎病毒毒种进行悬浮吸附,补加含血清的营养液,静置培养,换成无血清培养液,细胞出现病变时,收获细胞,经冻存、化冻、合并、检测感染性滴度后,得生产疫苗用的脊髓灰质炎病毒液。本发明可使病毒与细胞受体充分接触,有利于病毒进入细胞,同时使细胞处于分裂状态,有利于病毒繁殖,不仅提高了产量,而且显著提高了脊髓灰质炎病毒的滴度,与传统的猴肾原代细胞培养的病毒滴度相比无显著差异(P>0.05)。

    用人胚肺二倍体细胞培养繁殖脊髓灰质炎病毒的方法

    公开(公告)号:CN1637140A

    公开(公告)日:2005-07-13

    申请号:CN200410079584.2

    申请日:2004-11-26

    IPC分类号: C12N7/04

    摘要: 本发明提供一种用人胚肺二倍体细胞KMB17培养脊髓灰质炎病毒的方法,其特征在于取人胚肺二倍体成纤维细胞KMB17或者人二倍体成纤维细胞2BS的第10~40代,并将单层细胞分散并悬浮于培养液中,静置培养至长成致密单层,用含血清的培养基将细胞收集,加入脊髓灰质炎病毒毒种进行悬浮吸附,补加含血清的营养液,静置培养,换成无血清培养液,细胞出现病变时,收获细胞,经冻存、化冻、合并、检测感染性滴度后,得生产疫苗用的脊髓灰质炎病毒液。本发明可使病毒与细胞受体充分接触,有利于病毒进入细胞,同时使细胞处于分裂状态,有利于病毒繁殖,不仅提高了产量,而且显著提高了脊髓灰质炎病毒的滴度,与传统的猴肾原代细胞培养的病毒滴度相比无显著差异(P>0.05)。