公开(公告)号：CN111549010B

公开(公告)日：2022-10-28

申请号：CN202010452823.3

申请日：2020-05-26

申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院

发明人： 王燃 ,  董臣 ,  都菲 ,  顿舒尧 ,  徐韶妍 ,  冯明星

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P23/00 ,  C12N15/70

摘要： 本申请属于烟草基因工程技术领域，具体涉及GGPPS定向突变蛋白。现有GGPPS蛋白的154、161和218这三个位点位于酶的催化口袋，209和233这两个位点位于酶分子表面；基于这五个位点，本申请提供了GGPPS系列定向突变蛋白，其中包括：系列单位点突变蛋白、双位点突变蛋白、三位点突变蛋白、四位点突变蛋白、五位点突变蛋白。发明人利用CAST技术构建“小而精”的突变体文库，通过进一步筛选以及基于定向进化需要，发明人对特定位点氨基酸突变类型做了详细分析。初步实验结果表明，特定位点氨基酸突变后，β‑胡萝卜素合成量得到了明显提高，为进一步作物新品种培育奠定了一定技术基础。

公开(公告)号：CN111549010A

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN202010452823.3

申请日：2020-05-26

申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院

发明人： 王燃 ,  董臣 ,  都菲 ,  顿舒尧 ,  徐韶妍 ,  冯明星

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P23/00 ,  C12N15/70

摘要： 本申请属于烟草基因工程技术领域，具体涉及GGPPS定向突变蛋白专利申请事宜。现有GGPPS蛋白的154、161和218这三个位点位于酶的催化口袋，209和233这两个位点位于酶分子表面；基于这五个位点，本申请提供了GGPPS系列定向突变蛋白，其中包括：系列单位点突变蛋白、双位点突变蛋白、三位点突变蛋白、四位点突变蛋白、五位点突变蛋白。发明人利用CAST技术构建“小而精”的突变体文库，通过进一步筛选以及基于定向进化需要，发明人对特定位点氨基酸突变类型做了详细分析。初步实验结果表明，特定位点氨基酸突变后，β-胡萝卜素合成量得到了明显提高，为进一步作物新品种培育奠定了一定技术基础。