公开(公告)号：CN105779328A

公开(公告)日：2016-07-20

申请号：CN201410827884.8

申请日：2014-12-25

申请人： 中国石油天然气股份有限公司

发明人： 李十中 ,  齐泮仑 ,  杜然 ,  何皓 ,  范桂芳 ,  付兴国 ,  胡徐腾 ,  孙洪磊 ,  李顶杰 ,  雪晶 ,  郑蕾 ,  张家仁

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12R1/01

摘要： 本发明公开了一种热纤梭菌的培养方法，包括以下步骤，步骤一：配制种子液培养基GS-2，将菌种ATCC27405接种于该种子液培养基；步骤二：配制发酵培养基并灭菌；步骤三：将培养好的种子液按一定比例接入到装有发酵培养基的厌氧瓶或发酵罐中；步骤四：温度60℃，厌氧，罐或瓶压为-0.1MPa～0.1MPa，控制氢气分压为0.01MPa，间歇性搅拌进行发酵。本发明的优点在于提供了一种快速获取热纤梭菌大量菌体浓度的发酵培养基和培养条件，并通过条件性诱导，获得了高密低的菌体浓度(常规培养的6-9倍)和显著提升的单位质量纤维素酶活力。

公开(公告)号：CN106867990A

公开(公告)日：2017-06-20

申请号：CN201510920113.8

申请日：2015-12-10

申请人： 中国石油天然气股份有限公司

发明人： 齐泮仑 ,  李十中 ,  何皓 ,  杜然 ,  胡徐腾 ,  范桂芳 ,  孙洪磊 ,  李顶杰 ,  雪晶 ,  张佳 ,  张家仁 ,  侯丹 ,  孙立明 ,  李萌萌

IPC分类号： C12N11/08 ,  C12N11/04

摘要： 本发明公开了属于酶制剂领域的一种固定化β-葡萄糖苷酶的制备方法。该方法采用果糖做致孔剂，通过正硅酸乙酯水解反应溶胶-凝胶法来制备固定化β-葡萄糖苷酶。通过加入不同浓度的果糖水溶液和不同剂量的β-葡萄糖苷酶来制备不同的固定化β-葡萄糖苷酶样品。所得固定化β-葡萄糖苷酶可以避免纤维素酶解过程中的无效吸附，显著提高纤维素酶解转化效率，固定化酶具有机械强度好，重复利用次数多的优势，可以降低纤维素水解糖化成本。

公开(公告)号：CN106867990B

公开(公告)日：2019-12-10

申请号：CN201510920113.8

申请日：2015-12-10

申请人： 中国石油天然气股份有限公司

发明人： 齐泮仑 ,  李十中 ,  何皓 ,  杜然 ,  胡徐腾 ,  范桂芳 ,  孙洪磊 ,  李顶杰 ,  雪晶 ,  张佳 ,  张家仁 ,  侯丹 ,  孙立明 ,  李萌萌

IPC分类号： C12N11/08 ,  C12N11/04

摘要： 本发明公开了属于酶制剂领域的一种固定化β‑葡萄糖苷酶的制备方法。该方法采用果糖做致孔剂，通过正硅酸乙酯水解反应溶胶‑凝胶法来制备固定化β‑葡萄糖苷酶。通过加入不同浓度的果糖水溶液和不同剂量的β‑葡萄糖苷酶来制备不同的固定化β‑葡萄糖苷酶样品。所得固定化β‑葡萄糖苷酶可以避免纤维素酶解过程中的无效吸附，显著提高纤维素酶解转化效率，固定化酶具有机械强度好，重复利用次数多的优势，可以降低纤维素水解糖化成本。

公开(公告)号：CN105779491A

公开(公告)日：2016-07-20

申请号：CN201410822236.3

申请日：2014-12-25

申请人： 中国石油天然气股份有限公司

发明人： 齐泮仑 ,  李十中 ,  何皓 ,  杜然 ,  付兴国 ,  范桂芳 ,  胡徐腾 ,  孙洪磊 ,  李顶杰 ,  雪晶 ,  郑蕾 ,  张家仁

IPC分类号： C12N15/81 ,  C12N9/42 ,  C12P19/14 ,  C12P19/04 ,  C12P19/02 ,  C12R1/84

摘要： 本发明提供了一种嗜热β-1，4木聚糖酶-His融合蛋白基因工程菌的构建方法，所述的嗜热β-1，4木聚糖酶-His融合蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述构建方法包括以下步骤：步骤A：高温烷烃地芽孢杆菌的培养；步骤B：基因组DNA的提取与融合蛋白基因序列构建；步骤C：设计引物及用聚合酶链式反应(PCR)法钓取嗜热β-1，4木聚糖酶-His融合蛋白目的基因；步骤D：构建重组表达载体；步骤E：将重组表达载体转化到宿主细胞中。发明的嗜热β-1，4木聚糖酶具有极高的热稳定性，耐碱性环境以及对金属离子、有机溶剂及表面活性剂的抗性，可用于生物质能源生产、功能糖、功能糖醇生产中。