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发明公开
一种蛛形纲动物胚胎HCR原位杂交方法及其应用审中-实审

公开(公告)号：CN118326012A

公开(公告)日：2024-07-12

申请号：CN202410573362.3

申请日：2024-05-10

申请人： 中国科学院动物研究所

发明人： 王书慧 , 李枢强

IPC分类号： C12Q1/6841 , C12Q1/6888

摘要： 本发明提供了一种蛛形纲动物胚胎HCR原位杂交方法及其应用，包括：采用甲醛‑正庚烷双相固定液将蛛形纲动物胚胎固定形态，依次进行去除胚胎卵黄、通透、预杂交、采用靶向探针进行杂交、封闭与抗体孵育和制片检测。本发明的方法相比于传统的蜘蛛WISH原位杂交，获得的探针特异性更强、杂交信号更亮、结果更可靠；本发明的消化方法适用于多种蛛形纲动物胚胎，比传统的原位杂交更简便，专一性和准确性高，从0.1‑0.7mm的胚胎，从胚中期到胚晚期都适用，跨越了胚胎发育的大部分时期；从根本上提升了原位杂交的效率，解决了蛛形纲动物不能直接进行HCR原位杂交的问题，减少工作量，为大规模基因检测提供了技术支持。