一种新型荧光实时定量检测miRNA的方法

    公开(公告)号:CN102851352A

    公开(公告)日:2013-01-02

    申请号:CN201110174524.9

    申请日:2011-06-27

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明涉及分子检测领域,具体地,本发明涉及一种新型荧光实时定量检测miRNA的方法。根据本发明的新型荧光实时定量检测miRNA的方法包括,所述方法利用miRNA、通用引物和特异性引物进行荧光定量PCR扩增1)设计靶标miRNA的特异性引物,包括直链和茎环引物,以及通用引物;2)以miRNA提供碱基堆积力,帮助特异性引物和通用引物结合,利用DNA聚合酶延伸特异性引物;3)以上述延伸的DNA链为模板继续延伸通用引物;4)根据荧光定量PCR结果判断检测样品中是否含有靶标miRNA。本发明的方法在整个操作过程中既无需反转录过程,也无需荧光标记探针,且操作简单,因此可以大大提高检测效率、缩短检测周期、降低检测成本,适用于早期诊断和临床检测。

    编码悬浮微芯片、其制备方法及应用

    公开(公告)号:CN102788779A

    公开(公告)日:2012-11-21

    申请号:CN201210329727.5

    申请日:2012-09-07

    IPC分类号: G01N21/75 G01N21/76

    摘要: 本发明公开了一种编码悬浮微芯片、其制备方法及应用。该微芯片包括:透明基底,以及,用作图形识别码的不透明平面微结构,所述不透明平面微结构分布在透明基底表面。优选的,所述不透明平面微结构包括形成于透明基底表面的高反光堆叠结构层。该微芯片可经半导体微加工工艺制得,其应用模式为:首先利用悬浮在液相体系中的微芯片上的探针分子捕获待测物分子,再将微芯片从液相体系中分离、清洗,之后分别在可见光通道和荧光通道对微芯片成像,以分别确定微芯片所捕获的目标分子身份和对目标分子进行定量分析。本发明实现了具有高通量、良好检测精度的编码悬浮微芯片的低成本制造,可应用于对液体样品中的多重生物/医学指标同时进行检测。

    基于生物芯片的检测核酸降解组mRNA的通用探针方法

    公开(公告)号:CN103074419A

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201210371574.0

    申请日:2012-09-27

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种基于生物芯片的检测核酸降解组mRNA的通用探针方法,包括如下步骤:1)采用生物信息学方法,预测可能被小分子RNA降解的目标核酸降解组mRNA;2)提供检测探针,所述检测探针的一部分核酸序列与通用报告探针互补,另一部分核酸序列至少与所述目标核酸降解组mRNA断裂处的核酸序列互补;3)将所述检测探针固定在生物芯片基质上形成生物芯片;4)将待检测样本的RNA和通用报告探针一起混入杂交液中与生物芯片杂交;5)洗涤杂交后的生物芯片,检测杂交结果。本发明能够高通量的检测小分子RNA介导的靶基因mRNA降解产物,可对已被生物信息学预测到的大量靶基因进行验证,且操作简便,利于推广,价格低廉,具有高性价比。

    用于大肠癌诊断的尿液microRNA生物标志物、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN107904310B

    公开(公告)日:2020-09-01

    申请号:CN201711212959.1

    申请日:2017-11-28

    摘要: 本发明公开了一种用于大肠癌诊断的尿液microRNA生物标志物、试剂盒及其应用。所述用于大肠癌诊断的microRNA生物标志物包含microRNA hsa‑miR‑92b‑5p、hsa‑miR‑4706、hsa‑miR‑3665、hsa‑miR‑3652、hsa‑miR‑3714和hsa‑miR‑550a‑3‑5p中的任意一种或两种以上的组合。所述试剂盒包括针对所述生物标志物中的部分或全部microRNA进行PCR检测所用的引物组及探针。本发明提供的生物标志物及相应引物组和探针可以用于制备诊断试剂盒,且其在应用于尿液样本的大肠癌诊断时,具有优异的灵敏度与特异性。

    外泌体的改造方法
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118725135A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202411217315.1

    申请日:2024-09-02

    IPC分类号: C07K16/46 C12N15/13 C12N5/071

    摘要: 本发明涉及生物工程领域,公开了连接外泌体和靶标的融合蛋白及其在构建和/或改造外泌体的应用,以及外泌体的改造方法。所述融合蛋白为蛋白质αCD9‑x‑αFc,其序列如SEQ ID NO.2所示;构建和/或改造外泌体的方法,其包括利用所述融合蛋白,连接靶标与外泌体。利用所述融合蛋白,通过构建或改造外泌体,可以高效的将不同靶向的靶标展示到外泌体的表面,增强外泌体的靶向递送效果。

    一种检测核酸降解组的通用探针芯片方法

    公开(公告)号:CN103074418A

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201210364857.2

    申请日:2012-09-27

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 一种检测核酸降解组的通用探针方法,包括如下步骤:1)采用生物信息学方法预测可能被小分子RNA降解的目标核酸降解组mRNA;2)设计一端部的部分核酸序列与目标核酸降解组mRNA断裂处的部分核酸序列互补的检测探针;3)将检测探针固定在生物芯片基质上形成生物芯片;4)提取待检测样本RNA,在其5’端接上一段接头,并进行反转录;5)采用与接头序列互补的正向引物以及与反转录产物部分互补的反向引物对反转录产物进行PCR扩增;6)将PCR扩增产物和通用报告探针混入杂交液中与生物芯片杂交;7)洗涤杂交后的生物芯片,检测杂交结果。本发明能够高通量的检测小分子RNA介导的靶基因mRNA降解产物,且操作简便,价格低廉,具有高性价比,利于推广。