公开(公告)号：CN118879639A

公开(公告)日：2024-11-01

申请号：CN202310482300.7

申请日：2023-04-30

申请人： 丹麦生物技术系统公司 ,  北京美德泰康生物科技有限公司 ,  罗昀昀

发明人： 罗昀昀 ,  安妮特·丹尼尔森 ,  尼尔森·门松 ,  王建霞

IPC分类号： C12N5/20 ,  G01N33/569 ,  G01N33/58

摘要： 本发明涉及细胞分离技术领域，具体涉及一种半固体筛选培养基的制备方法和一种高效分离单个抗体分泌型杂交瘤细胞的方法。该方法将融合后的杂交瘤细胞和碳纳米标记物加入半固体培养基中。由于半固体培养基具有的特殊流动性使得融合后的杂交瘤细胞在半固体培养基上呈集落生长，彼此分离，每个集落克隆由单个细胞形成。目标杂交瘤细胞分泌的抗体分布在杂交瘤细胞集落的四周不发生游离，并与半固体培养基中的碳纳米标记的二抗或碳纳米标记的抗原进行免疫反应，从而在目标杂交瘤细胞的周围发生聚集形成黑色集落，黑色集落即为目标杂交瘤细胞。目标杂交瘤细胞分泌抗体的能力越强，其周围聚集的碳纳米也会越多，观察到的黑色集落的颜色就越黑，而不分泌抗体的细胞集落则是白色。通过观察集落的颜色可以分离和鉴别目标杂交瘤细胞分泌抗体的能力。