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公开(公告)号：CN111217914B
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202010102860.1
申请日：2020-02-19
申请人： 玉溪中烟种子有限责任公司 , 云南大学
IPC分类号： C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
摘要： 本发明公开了一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，所述的单克隆抗体的重链可变区序列包含SEQ ID NO.1所示的CDR1的氨基酸序列GYTFTDYY，SEQ ID NO.2所示的CDR2的氨基酸序列INPYNGDT和SEQ ID NO.3所示的CDR3的氨基酸序列AREDYSGSSYVANFDY；所述的单克隆抗体的轻链可变区序列包含SEQ ID NO.4所示的CDR1的氨基酸序列KSLLHSNGITY，SEQ ID NO.5所示的CDR2的氨基酸序列QMS和SEQ ID NO.6所示的CDR3的氨基酸序列AQNLELWT。本发明提供一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，以通过提供一个靶向蛋白研究的工具，使得对烟草和其它植物不同组织，不同生理条件下PPO蛋白表达变化及蛋白网络图谱的更深层次研究得以实现。
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公开(公告)号：CN107723270A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201711193369.9
申请日：2017-11-24
申请人： 玉溪中烟种子有限责任公司 , 云南大学 , 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12N5/04
CPC分类号： C12N5/04 , C12N5/0025
摘要： 烟草花粉管的半离体培养方法，具体步骤为：取烟草始开期雌蕊，授粉后置于28 ℃恒温箱中预培养；用剃须刀片切割预培养的花柱二分之一或四分之三部位，切割完毕后置于含培养基的载玻片上，在保湿盒中28 ℃继续培养24 h；培养结束后，花粉管从花柱切割部位成束长出；用眼科镊在显微镜下切取花粉管，悬浮于含培养基的离心管中，5000 rpm离心10 min即可获得半离体培养的烟草花粉管。本发明中的培养基组分简单有效，可重复性高，针对花柱不同切割部位设置不同的培养时间和培养基，易于操作，为高效收集烟草半离体培养花粉管提供了有效途径。该方式适用于自交授粉和没有花柱不亲和阻碍的杂交授粉组合，为研究烟草花粉管和雌蕊互作调控机制提供了稳定体系。
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公开(公告)号：CN107771785A
公开(公告)日：2018-03-09
申请号：CN201711190844.7
申请日：2017-11-24
申请人： 玉溪中烟种子有限责任公司 , 云南大学 , 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 提高低温冻存烟草花粉生活力的方法，包括采集花粉；液体培养法测定花粉活力；在花粉中添加低温保护剂可溶性淀粉和纳米微粒；花粉冻存：液氮速冻后分别保存在-20℃、-80℃和-196℃；花粉复融：冻存花粉取出后立即用流水冲5min。同时使用纳米微粒和可溶性淀粉作为低温冷冻保护剂，可以有效提高烟草花粉的低温冻存花粉活力。可溶性淀粉在低温冻存花粉时能保持花粉的干燥状态。羟基磷灰石纳米微粒对生物细胞膜就有较好的生物相容性，在增加冷却速率、提高细胞黏附程度和保护细胞遗传物质方面有重要的作用。在花粉复融时采用流水冲的方式，避免了在化冻过程中产生花粉细胞内的次生结冰对细胞膜体系的破坏，提高了花粉在低温长期冻存后的活力。
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公开(公告)号：CN111217914A
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN202010102860.1
申请日：2020-02-19
申请人： 云南大学
IPC分类号： C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
摘要： 本发明公开了一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，所述的单克隆抗体的重链可变区序列包含SEQ ID NO.2所示的CDR1的氨基酸序列GYTFTDYY，SEQ ID NO.4所示的CDR2的氨基酸序列INPYNGDT和SEQ ID NO.6所示的CDR3的氨基酸序列AREDYSGSSYVANFDY；所述的单克隆抗体的轻链可变区序列包含SEQ ID NO.9所示的CDR1的氨基酸序列KSLLHSNGITY，SEQ ID NO.11所示的CDR2的氨基酸序列QMS和SEQ ID NO.13所示的CDR3的氨基酸序列AQNLELWT。本发明提供一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，以通过提供一个靶向蛋白研究的工具，使得对烟草和其它植物不同组织，不同生理条件下PPO蛋白表达变化及蛋白网络图谱的更深层次研究得以实现。
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