-
公开(公告)号:CN101974654A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010519281.3
申请日:2010-10-26
申请人: 云南省烟草公司昭通市公司 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 , 云南省烟草农业科学研究院
摘要: 本发明是一种马铃薯Y病毒烟草分离物不同株系的检测方法。通过马铃薯Y病毒特异性抗体诱捕病株样品中的马铃薯Y病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用马铃薯Y病毒不同株系外壳蛋白基因简并引物进行一步法反转录聚合酶链式反应(one stepRT-PCR)、利用限制性内切酶EcoR V对PCR产物进行酶切,琼脂糖凝胶电泳检测目的片段。该方法将快速、特异和高灵敏度的免疫捕捉RT-PCR与快捷的PCR产物酶切鉴定,从而快速、简便的检测马铃薯Y病毒烟草分离物不同株系。
-
公开(公告)号:CN102352418B
公开(公告)日:2014-04-30
申请号:CN201110350853.4
申请日:2011-11-09
申请人: 云南省烟草公司昭通市公司 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 , 云南省烟草农业科学研究院
摘要: 本发明提供了一种快速检测马铃薯Y病毒烟草分离物的方法,其步骤包括通过马铃薯Y病毒烟草分离物特异性抗体诱捕病株样品中的马铃薯Y病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用马铃薯Y病毒外壳蛋白基因3′末端引物及四条特异反应引物进行一步法反转录环介导等温扩增(Reverse-transcription?Loop-Mediated?Isothermal?Amplification,RT-LAMP)法扩增,肉眼观察或浊度仪在400nm波长下检测沉淀浊度或电泳条带观察,判断样品中是否带有病毒。该方法将快速、特异和高灵敏度的病毒免疫捕捉与快捷的RT-LAMP法结合,从而快速、简便的检测烟草样品中的马铃薯Y病毒。
-
公开(公告)号:CN102352418A
公开(公告)日:2012-02-15
申请号:CN201110350853.4
申请日:2011-11-09
申请人: 云南省烟草公司昭通市公司 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 , 云南省烟草农业科学研究院
摘要: 本发明提供了一种快速检测马铃薯Y病毒烟草分离物的方法,其步骤包括通过马铃薯Y病毒烟草分离物特异性抗体诱捕病株样品中的马铃薯Y病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用马铃薯Y病毒外壳蛋白基因3′末端引物及四条特异反应引物进行一步法反转录环介导等温扩增(Reverse-transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification,RT-LAMP)法扩增,肉眼观察或浊度仪在400nm波长下检测沉淀浊度或电泳条带观察,判断样品中是否带有病毒。该方法将快速、特异和高灵敏度的病毒免疫捕捉与快捷的RT-LAMP法结合,从而快速、简便的检测烟草样品中的马铃薯Y病毒。
-
公开(公告)号:CN103740865A
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201410034604.8
申请日:2014-01-25
申请人: 云南省烟草农业科学研究院 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
CPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12Q2537/143
摘要: 本发明公开了一种烟草花叶型病株中烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒3种病毒的检测方法。通过烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒特异性混合抗体诱捕病样中病毒,不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应,专门针对烟草生产过程对烟草中上部叶片为害较为严重且不能从症状区分病原而建立的一种单管同时检测3种病毒中的1、2或3种不同病毒组合的方法,检测时间仅需5小时。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合,同时设置健康烟草随机引物cDNA产物和相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照,从而快速、准确、灵敏的检测田间烟草植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等。
-
公开(公告)号:CN103740865B
公开(公告)日:2015-04-01
申请号:CN201410034604.8
申请日:2014-01-25
申请人: 云南省烟草农业科学研究院 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
摘要: 本发明公开了一种烟草花叶型病株中烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒3种病毒的检测方法。通过烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒特异性混合抗体诱捕病样中病毒,不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应,专门针对烟草生产过程对烟草中上部叶片为害较为严重且不能从症状区分病原而建立的一种单管同时检测3种病毒中的1、2或3种不同病毒组合的方法,检测时间仅需5小时。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合,同时设置健康烟草随机引物cDNA产物和相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照,从而快速、准确、灵敏的检测田间烟草植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等。
-
公开(公告)号:CN102410948A
公开(公告)日:2012-04-11
申请号:CN201110209776.0
申请日:2011-07-26
申请人: 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号: G01N1/28
摘要: 本发明提供了一种烟叶原色腊叶标本的制作方法,包括定型、定色、干燥、回潮等步骤,定型主要采取吸水纸、吸湿剂、吸水纸、标本依次叠放于标本夹中,按此方式依次叠放n层(优选5~8层)标本;再经45~55℃环境下恒温定色15~18小时;在55~65℃环境下恒温干燥3~6小时;连同吸水纸和标本一同在相对湿度大于70%的室温环境下回潮处理6~12小时,得到原色腊叶标本。本发明方法制作标本更快速,比常规压制法缩短了6~8天的时间,保色效果好,在标本保存期内,颜色保持不变;含水量控制在8%~10%范围内,防止了标本脆裂,维持了标本的完整性。本发明特别适合烟叶原色蜡叶标本制作,对保存病害烟叶的原始形状、色彩特别有利,大大提高标本的科研价值和经济性。
-
公开(公告)号:CN106070255A
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201610442613.X
申请日:2016-06-20
申请人: 云南农业大学 , 云南省烟草农业科学研究院 , 昆明百事德生物化学科技有限公司
CPC分类号: A01N43/90
摘要: 本发明公开了一种防治植物细菌性病害的新农药,由以下按照重量百分比的原料制备而成:硫酸小檗碱1‑10%、增溶剂1‑10%、农药助剂5‑15%、防腐剂0.1‑1%;其中,硫酸小檗碱为化学合成或中药中提取纯化,分子式为C20H18NO8S;增溶剂与硫酸小檗碱的摩尔比为1:1‑2;本发明防治植物细菌性病害的新农药主要含有硫酸小檗碱0.5%~1%,加上增溶剂、农药助剂与水补足到100%;该新农药的剂型为微乳剂、水剂或水乳剂;使用方法为:稀释500~1000倍液,于烟苗移栽后7‑10天左右进行灌根或喷淋烟株根茎基部,每间隔7‑10d用药1次,连续用药3‑4次;本发明抗菌谱广,对烟草青枯病等植物细菌性病害的防治效果优于农用链霉素,不易产生抗药性,对人、畜低毒,没有残留,环境污染小。
-
公开(公告)号:CN103173393A
公开(公告)日:2013-06-26
申请号:CN201310087788.X
申请日:2013-03-19
申请人: 云南省烟草农业科学研究院
摘要: 本发明公开了一种烟草野火病菌分离方法,选典型烟草野火病病株,取干燥、干净病叶,将其上的病斑沿病健交界处剪下;将病斑的中心点切成“+”或“米”字形切口,病斑置于凹玻片的凹槽边缘、切口位于凹槽1/3~1/2处;在凹槽中滴加150~300μL无菌水,盖上盖玻片,选取有喷菌现象的凹玻片收集喷菌液;在无菌条件下将喷菌液5倍或10倍倍比梯度稀释,取稀释53~5或103~5倍的稀释液100~200μL涂布于KMB培养基平板,在24~28℃下培养48~72h;在紫外光下选择有绿色荧光的单菌落,经致病力测定,形成褐色枯死病斑和淡黄色晕圈的即为目标菌落。本发明集分离、纯化、鉴定为一体,分离病菌效率高、准确性强,适用于田间采样的及时分离,分离病菌的纯度高,保持了病菌野生型特性。
-
公开(公告)号:CN102499229A
公开(公告)日:2012-06-20
申请号:CN201110330764.3
申请日:2011-10-26
申请人: 云南省烟草农业科学研究院
摘要: 本发明涉及一种防治烟草漂浮育苗蚜传病害的方法,属防治烟草蚜传病害技术领域。本发明方法的具体步骤如下:a、在传统的育苗拱棚端头设置长2米、宽2米、高2米的供3至4人使用的蚊帐式防虫网;b、蚊帐式防虫网与育苗拱棚端头开口处严密对接;c、蚊帐式防虫网四周用砖头压严;d、蚊帐式防虫网的开口为交错式开口并用夹子夹严;e、烟草漂浮育苗时期,操作人员迅速进入蚊帐式防虫网,并以此为操作平台进行间苗及剪苗。本发明与现有的技术相比,具有方法简单易操作,能够有效解决苗期的蚜传病害,培育出健康的壮苗,大幅减少蚜传病害对烟草造成的经济损失。
-
公开(公告)号:CN105248393A
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201510765604.X
申请日:2015-11-11
申请人: 云南省烟草农业科学研究院
摘要: 本发明公开一种性引诱剂防治烟草害虫斜纹夜蛾的方法,将性诱剂诱芯与诱捕器按常规组装后固定在竹竿上,竹竿插入烟墒土中,并确保稳定,还包括下列操作:所述诱捕器的进虫口距墒面的垂直距离为110~150cm,每根竹竿固定一个诱捕器,诱捕始期为烟苗移栽后至烟株摆盘期间,且持续诱捕时间不少于60天,诱捕器分布密度根据种植面积确定,田间各部位安置诱捕器的数量为种烟边界>中心点>次中心。本发明对斜纹夜蛾的防治效果为81.09%~94.43%。使用性诱剂防治夜蛾能有效减少用工量,降低防治成本,具有良好的经济效益和社会效益,同时,使用性诱剂减少了化学农药的使用次数和使用量,减少了环境污染,保护了有益生物。
-
-
-
-
-
-
-
-
-