一种高效高纯度分离细胞线粒体基因组的方法

    公开(公告)号:CN115161313A

    公开(公告)日:2022-10-11

    申请号:CN202210636586.5

    申请日:2022-06-07

    IPC分类号: C12N15/10 C12N15/11

    摘要: 本发明属于DNA提取技术领域,具体公开了一种高效高纯度分离细胞线粒体基因组的方法,包括:利用细胞预处理试剂对细胞培养物进行预处理,并收集细胞;利用细胞轻柔裂解液对预处理后的细胞进行裂解;将裂解后的溶液进行离心,分离上清液,纯化得到细胞线粒体基因组;细胞轻柔裂解液包括0.1%~15%NP‑40、0.001~0.1mol/L三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐、0.001~0.2mol/L乙二胺四乙酸、0.1~1mol/L醋酸钠、0.1~0.5mol/L醋酸钾和0.001~0.1mol/L柠檬酸钠。本发明方法可以从少量培养细胞中高效获得高纯度线粒体基因组DNA,耗时短,设备要求低,操作简单,重复性好。

    一种结核分枝杆菌Rv3444-Rv3445双基因缺失菌株及其制备和应用

    公开(公告)号:CN118240732A

    公开(公告)日:2024-06-25

    申请号:CN202410388000.7

    申请日:2024-04-01

    摘要: 本发明公开了一种结核分枝杆菌Rv3444‑Rv3445双基因缺失菌株及其制备和应用,所述Rv3444‑Rv3445双基因缺失菌株相对野生型结核分枝杆菌同时缺失了Rv3444和Rv3445基因,相较于野生型结核分枝杆菌,该Rv3444‑Rv3445双基因缺失菌株在细胞和小鼠水平呈现明显的毒力减弱和改变宿主表观遗传的能力,且所示性状与Rv3444和Rv3445基因的缺失相关。本发明Rv3444‑Rv3445双基因缺失菌株的成功构建及其所涉及基因Rv3444和Rv3445相关功能的研究,对阐明分枝杆菌属成员的相关致病机制以及开发更为安全有效的疫苗具有重要的参考价值。