一种类器官培养自动化系统及方法

    公开(公告)号:CN117778177A

    公开(公告)日:2024-03-29

    申请号:CN202311601382.9

    申请日:2023-11-27

    摘要: 本发明涉及类器官培养技术领域,尤其涉及一种类器官培养自动化系统,包括任务输入模块、任务拆分模块、任务时序排列模块、种细胞自动作业子模块、倒扣培养皿自动作业子模块、添加培养基自动作业子模块、样本培养自动作业子模块;本发明的一种类器官培养自动化系统,能够替代以往传统的采用纯人工手动操作的方式来自动完成类器官培养工序,能够大大地减少培养学习成本,类器官培养工序整个操作更加精准、实验结果能够得到保证,能够减少大量的重复性操作劳动、减轻操作人员的负担,能够提升效率,能够更好地适用于各种大规模、大数据的类器官培养药敏检测。

    一种类器官培养药敏检测一体化系统及方法

    公开(公告)号:CN117778166A

    公开(公告)日:2024-03-29

    申请号:CN202311601445.0

    申请日:2023-11-27

    摘要: 本发明涉及类器官培养药敏检测技术领域,尤其涉及一种类器官培养药敏检测一体化系统,包括任务输入模块、任务拆分模块、任务时序排列模块、类器官培养前预处理自动作业模块、类器官培养自动作业模块、类器官药敏检测自动作业模块;本发明的一种类器官培养药敏检测一体化系统,能够替代以往传统的采用纯人工手动操作的方式来自动进行类器官培养药敏检测,能够大大地减少培养学习成本,实验整个操作更加精准、实验结果能够得到保证,能够减少大量的重复性操作劳动、减轻操作人员的负担,能够提升效率,能够更好地适用于大批量的生物医疗实验。

    一种微量原代组织类器官培养前的扩增培养方法

    公开(公告)号:CN115322948B

    公开(公告)日:2023-08-29

    申请号:CN202210858856.7

    申请日:2022-07-20

    IPC分类号: C12N5/071 C12N5/09

    摘要: 一种微量原代组织类器官培养前的扩增培养方法,包括如下步骤:(1)将微量组织放入带有培养基的低吸附离心管中;(2)离心;(3)离心物料去除上清,加入DMEM培养基重悬清洗,一次细胞液离心获得二次离心物料;(4)去除上清;加入组织处理液,消化处理;(5)终止消化,然后离心;(6)去除上清;(7)加入DMEM/F1培养基,进行重悬沉淀;(8)滴加到超低粘附培养板中;置于摇床上,启动摇床;置于恒温培养箱中培养;(9)培养2~8天后离心,然后去除上清,获得细胞回收液。本发明可以在类器官培养前扩增细胞,恢复细胞活性,提高类器官样本培养成功率;可以培养微量样本,适用于多种组织来源和类型的样本。

    一种骨肉瘤类器官培养基及培养方法

    公开(公告)号:CN114921413B

    公开(公告)日:2023-03-24

    申请号:CN202210613770.8

    申请日:2022-05-31

    发明人: 邹欢 朱宇 徐丛 黄敏

    IPC分类号: C12N5/09 C12N5/071 C12Q1/02

    摘要: 本发明涉及一种骨肉瘤类器官培养基及培养方法,该培养基由基础培养基DMEM/F12,溶解于所述基础培养基中的营养因子和特异性细胞因子组成;所述营养因子由以下组分组成:Glutamine,MEM非必需氨基酸,丙酮酸钠,不含维生素A的B27,N‑乙酰半胱氨酸,烟酰胺,P/S;所述特异性细胞因子由以下组分组成:wnt3a,R‑spondin1,IGF1,成纤维细胞生长因子2。本发明的培养基不仅可以提高骨肉瘤类器官的生长速度以及培养稳定性,而且还能明显的延长培养时间和传代次数,且骨肉瘤类器官与原肿瘤组织特性具有高度一致性。

    一种上皮来源肿瘤细胞纳米磁珠分选方法

    公开(公告)号:CN115637256A

    公开(公告)日:2023-01-24

    申请号:CN202211349510.0

    申请日:2022-10-31

    IPC分类号: C12N5/09

    摘要: 一种上皮来源肿瘤细胞纳米磁珠分选方法,具体操作方式如下:(1)将carboxy l ic aci d活化的磁性纳米粒子加入1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺活化;然后加入抗EpCam单克隆抗体、抗Ki‑67单克隆抗体和/或抗泛CK单克隆抗体,于室温反应,反应完成后用PBS清洗,获得磁珠前驱体;加入牛血清白蛋白封闭非特异性吸附位点,制成功能磁珠;(2)制备肿瘤细胞样本(3)细胞分选:取功能磁珠,加入肿瘤细胞样本,使用磁力架进行分选,收集肿瘤细胞进行计数,使用流式细胞仪进行肿瘤细胞比例检测。本发明通过便捷的方法,制备了功能磁珠,将功能磁珠与肿瘤细胞样本进行一步法快速分选,较为精准地筛选肿瘤细胞使其能够快速应用于肿瘤类器官的培养。

    一种微量原代组织类器官培养前的扩增培养方法

    公开(公告)号:CN115322948A

    公开(公告)日:2022-11-11

    申请号:CN202210858856.7

    申请日:2022-07-20

    IPC分类号: C12N5/071 C12N5/09

    摘要: 一种微量原代组织类器官培养前的扩增培养方法,包括如下步骤:(1)将微量组织放入带有培养基的低吸附离心管中;(2)离心;(3)离心物料去除上清,加入DMEM培养基重悬清洗,一次细胞液离心获得二次离心物料;(4)去除上清;加入组织处理液,消化处理;(5)终止消化,然后离心;(6)去除上清;(7)加入DMEM/F1培养基,进行重悬沉淀;(8)滴加到超低粘附培养板中;置于摇床上,启动摇床;置于恒温培养箱中培养;(9)培养2~8天后离心,然后去除上清,获得细胞回收液。本发明可以在类器官培养前扩增细胞,恢复细胞活性,提高类器官样本培养成功率;可以培养微量样本,适用于多种组织来源和类型的样本。

    肺癌成纤维细胞与肺癌类器官共培养模型的构建方法

    公开(公告)号:CN115094022A

    公开(公告)日:2022-09-23

    申请号:CN202210614040.X

    申请日:2022-05-31

    IPC分类号: C12N5/071 C12N5/09

    摘要: 肺癌成纤维细胞与肺癌类器官共培养模型的构建方法,包括肺癌/肺成纤维细胞分离,肺癌/肺成纤维细胞的培养、传代和肺癌/肺成纤维细胞‑肺癌/肺类器官共培养三个步骤。主要解决的技术问题是通过分离肺癌患者来源的肺癌成纤维细胞和肿瘤细胞,或者正常肺组织来源的肺成纤维细胞和肺泡细胞,建立快速、简单、有效的肺癌成纤维细胞‑肺癌类器官共培养、肺成纤维细胞‑肺类器官共培养技术;该模型不仅能够更好地模拟患者真实的病理状态,还能为成纤维细胞和肿瘤细胞的相互作用提供研究平台,有利于肺癌/肺纤维化患者的病理机制、药物筛选和新药研发的体外研究。

    一种骨肉瘤类器官培养基及培养方法

    公开(公告)号:CN114921413A

    公开(公告)日:2022-08-19

    申请号:CN202210613770.8

    申请日:2022-05-31

    发明人: 邹欢 朱宇 徐丛 黄敏

    IPC分类号: C12N5/09 C12N5/071 C12Q1/02

    摘要: 本发明涉及一种骨肉瘤类器官培养基及培养方法,该培养基包括:基础培养基DMEM/F12,溶解于所述基础培养基中的营养因子和特异性细胞因子;所述营养因子包括以下终浓度的组分:1‑5mM的Glutamine,1%‑2%的MEM非必需氨基酸,1‑5mM的丙酮酸钠,0.5‑2×的不含维生素A的B27,1‑2mM的N‑乙酰半胱氨酸,5‑20mM的烟酰胺,0.5%‑1%的P/S;所述特异性细胞因子包括以下终浓度的组分:5‑20ng/ml的wnt3a,200‑1000ng/ml的R‑spondin1,5‑20ng/ml的IGF1,5‑50ng/ml的成纤维细胞生长因子2(FGF2)。本发明的培养基不仅可以提高骨肉瘤类器官的生长速度以及培养稳定性,而且还能明显的延长培养时间和传代次数,且骨肉瘤类器官与原肿瘤组织特性具有高度一致性。

    肺纤维化体外模型的构建方法
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN114891720A

    公开(公告)日:2022-08-12

    申请号:CN202210442382.8

    申请日:2022-04-25

    摘要: 类器官肺纤维化体外模型的构建方法,步骤包括:(1)获取肺组织,清洗、剪碎;(2)置于trypsin或IV型胶原酶中,摇晃消化获得细胞小团块;(3)用2倍HBSS终止消化,离心收集细胞沉淀;(4)进行红细胞裂解处理后,一部分细胞种胶,胶滴凝固后加入类器官培养基进行类器官培养,另一部分细胞用成纤维细胞培养基贴壁培养,获得成纤维细胞;(5)肺类器官纤维化模型的构建;(7)成纤维细胞‑肺类器官共培养体系的纤维化模型的构建;(8)成纤维细胞‑免疫细胞‑肺类器官共培养体系的纤维化模型的构建。本发明的方法为肺纤维化疾病机制的研究、新药研发、药物敏感性检测和临床前患者反应性监测提供更有利的支持。

    一种用于siRNA转染3D类器官的组合物、培养基及应用

    公开(公告)号:CN113355289B

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN202110603671.7

    申请日:2021-05-31

    IPC分类号: C12N5/10 C12N15/113

    摘要: 本发明提供一种用于siRNA转染3D类器官的组合物、培养基及应用。所述组合物包括:血清蛋白、卵清蛋白中的至少一种与连接蛋白、血清代替物中的至少一种复配。培养基包括:基础培养基;以下至少一种终浓度组成的促进转染细胞外基质成分:1‑10%HSA(wt/v),1‑10%BSA(wt/v),1‑10%OVA(wt/v);以下至少一种终浓度组成的促进转染3D类器官成分:10‑500ng/mLconnexin‑43,10‑500ng/mL connexin‑26,1‑5%血清代替物。本发明siRNA转染3D类器官的技术耗时少,效率高,不需要机械破坏3D类器官的形态,适用范围广,可广泛用于癌症或正常组织类器官的siRNA转染。