一种鱼类脑组织总RNA的提取方法

    公开(公告)号:CN104212795B

    公开(公告)日:2017-04-26

    申请号:CN201410503432.4

    申请日:2014-09-26

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明提供了一种鱼类脑组织总RNA的提取方法,具体为:将鱼类脑组织经液氮速冻,Trizol裂解液处理后低温高速离心,经硫酸铵、氯仿‑正丁醇萃取后,加入异丙醇‑醋酸钠混合,混合液经RNA纯化吸附柱吸附纯化后,进行DNA酶处理,经洗涤而获得鱼类脑组织总RNA。本发明所述提取方法,可避免鱼脑组织中的脂类(磷脂、糖脂和胆固醇)和蛋白质等对RNA提取的影响,获得纯度稳定、完整性好、重复性高、无污染的RNA分离纯化方法。

    一种金鳟与北极红点鲑杂交三倍体苗种的制备方法

    公开(公告)号:CN103283649B

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201310195172.4

    申请日:2013-05-23

    IPC分类号: A01K61/00

    CPC分类号: Y02A40/81

    摘要: 本发明提供了一种金鳟与北极红点鲑杂交三倍体苗种的制备方法,是将金鳟雌性亲鱼卵子与北极红点鲑雄性亲鱼精子体外受精,受精卵受精12-14min后移入浓度为170-190mg/L、温度为9-11℃的6-DMAP的溶液中浸泡处理14-16min后移入6-8℃的水体中孵化。50天左右,受精卵孵化出杂交三倍体仔鱼。孵化期间受精卵发眼率为78%以上,苗种孵化率达到90%以上,得到的仔鱼经流式细胞仪检测,三倍体率达到95%。本发明提供的金鳟与北极红点鲑杂交三倍体苗种制备方法,缓解了鲑鳟鱼养殖过程中个体出现了性早熟、个体小型化、病害滋生等问题,具有杂交和三倍体优势,具有较好的市场价值。

    一种鱼类精巢组织总RNA的提取方法

    公开(公告)号:CN104212796A

    公开(公告)日:2014-12-17

    申请号:CN201410505252.X

    申请日:2014-09-26

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明提供了一种鱼类精巢组织总RNA的提取方法,将鱼类精巢组织经液氮速冻,Trizol裂解液处理后匀浆、过滤、离心,经蛋白酶K消化、氯仿-正丁醇混合液萃取后,再经异丙醇-醋酸钠沉淀,DNA酶处理后,经洗涤而获得鱼类精巢组织总RNA。本发明所述提取方法可避免鱼类精巢组织中的大量的蛋白成分和结缔组织对RNA提取的影响,获得纯度稳定、完整性好、重复性高、无污染的RNA分离纯化方法。

    一种诱导哲罗鲑稚鱼开口及驯养的方法

    公开(公告)号:CN103907551A

    公开(公告)日:2014-07-09

    申请号:CN201310597448.1

    申请日:2013-11-22

    IPC分类号: A01K61/00 A23K1/18 A23K1/10

    CPC分类号: Y02A40/81

    摘要: 本发明公开一种诱导哲罗鲑稚鱼开口及驯养的方法,包括:上浮管理期,稚鱼完全上浮后稳定1-2天再用一筛绢将其倒到已消毒孵化缸里;诱食投喂期,将鲑鳟鱼饲料与南极虾粉2-3:1混合投喂4-5天,再将混合比改为3-4:1投喂3-4天,再将混合比改为6-8:1投喂2-3天;全人工饲料投喂期,采用0.6-0.8mm的鲑鳟鱼饲料,第一阶段3-4天,训练稚鱼抢食性摄食,第二阶段3-4天,培养稚鱼的摄食节律,此时稚鱼抢食纯正的全人工饲料。本发明可解决哲罗鲑稚鱼规模化驯养缺乏来源广、易保存、无病源污染且适口性强的常规饵料问题。

    一种诱导哲罗鲑稚鱼开口及驯养的方法

    公开(公告)号:CN103907551B

    公开(公告)日:2015-07-15

    申请号:CN201310597448.1

    申请日:2013-11-22

    IPC分类号: A01K61/00 A23K1/18 A23K1/10

    CPC分类号: Y02A40/81

    摘要: 本发明公开一种诱导哲罗鲑稚鱼开口及驯养的方法,包括:上浮管理期,稚鱼完全上浮后稳定1-2天再用一筛绢将其倒到已消毒孵化缸里;诱食投喂期,将鲑鳟鱼饲料与南极虾粉2-3:1混合投喂4-5天,再将混合比改为3-4:1投喂3-4天,再将混合比改为6-8:1投喂2-3天;全人工饲料投喂期,采用0.6-0.8mm的鲑鳟鱼饲料,第一阶段3-4天,训练稚鱼抢食性摄食,第二阶段3-4天,培养稚鱼的摄食节律,此时稚鱼抢食纯正的全人工饲料。本发明可解决哲罗鲑稚鱼规模化驯养缺乏来源广、易保存、无病源污染且适口性强的常规饵料问题。

    一种北极红点鲑三倍体苗种的制备方法

    公开(公告)号:CN103250667B

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201310195501.5

    申请日:2013-05-23

    IPC分类号: A01K61/00

    CPC分类号: Y02A40/81

    摘要: 本发明提供了一种北极红点鲑三倍体苗种的制备方法。是将北极红点鲑受精卵在6-8℃条件下,受精卵受精12-14min后移入浓度为220-240mg/L、温度为9-11℃的6-DMAP(6-二甲基氨基嘌呤)的溶液中浸泡处理14-16min后移入6-8℃的水体中正常孵化。60天左右,受精卵孵化出北极红点鲑三倍体仔鱼。孵化期间受精卵发眼率为61%以上,苗种孵化率达到90%以上,得到的仔鱼经流式细胞仪检测,三倍体率达到79%。本发明提供的北极红点鲑三倍体苗种制备方法,缓解了由于长期的近亲繁殖和缺乏系统的选育,导致养殖个体出现了性早熟、个体小型化、病害滋生等问题,具有较好的市场价值。

    一种北极红点鲑三倍体苗种的制备方法

    公开(公告)号:CN103250667A

    公开(公告)日:2013-08-21

    申请号:CN201310195501.5

    申请日:2013-05-23

    IPC分类号: A01K61/00

    CPC分类号: Y02A40/81

    摘要: 本发明提供了一种北极红点鲑三倍体苗种的制备方法。是将北极红点鲑受精卵在6-8℃条件下,受精卵受精12-14min后移入浓度为220-240mg/L、温度为9-11℃的6-DMAP(6-二甲基氨基嘌呤)的溶液中浸泡处理14-16min后移入6-8℃的水体中正常孵化。60天左右,受精卵孵化出北极红点鲑三倍体仔鱼。孵化期间受精卵发眼率为61%以上,苗种孵化率达到90%以上,得到的仔鱼经流式细胞仪检测,三倍体率达到79%。本发明提供的北极红点鲑三倍体苗种制备方法,缓解了由于长期的近亲繁殖和缺乏系统的选育,导致养殖个体出现了性早熟、个体小型化、病害滋生等问题,具有较好的市场价值。

    一种鲑鳟鱼三倍体苗种的制备方法

    公开(公告)号:CN102696515B

    公开(公告)日:2013-08-21

    申请号:CN201210180033.X

    申请日:2012-06-01

    IPC分类号: A01K61/00

    CPC分类号: Y02A40/81

    摘要: 本发明提供了一种鲑鳟鱼三倍体苗种的制备方法。本发明将硬头鳟雌性亲鱼与北极红点鲑雄性亲鱼杂交,7℃条件下,受精卵受精20min后移入26℃水体中热休克20min后,入7℃水体中孵化60天左右,受精卵孵化出仔鱼。孵化期间受精卵发眼率为75%以上,苗种孵化率达到90%以上,得到的仔鱼经流式细胞仪检测,三倍体率为90%-95%。本发明提供的鲑鳟鱼三倍体苗种制备方法,缓解了虹鳟鱼养殖过程中由于长期的近亲繁殖和缺乏系统的选育,导致养殖个体出现了性早熟、个体小型化、病害滋生等问题,同时杂交三倍体具有杂交和三倍体两种优势,在生长速度和抗病能力上明显优于现有的二倍体虹鳟鱼,具有较好的经济效益和市场价值。

    一种杂交全雌金鳟鱼苗种的培育方法

    公开(公告)号:CN102812913A

    公开(公告)日:2012-12-12

    申请号:CN201210320756.5

    申请日:2012-08-31

    发明人: 徐绍刚

    IPC分类号: A01K61/00

    CPC分类号: Y02A40/81

    摘要: 本发明提供了一种杂交全雌金鳟鱼苗种的培育方法。本发明使用雄性激素诱导性成熟期的金鳟亲鱼获得具有雄性功能的金鳟伪雄鱼;使硬头鳟亲鱼卵子与金鳟伪雄鱼精子受精,孵化,获得杂交全雌金鳟鱼苗种。孵化期间受精卵发眼率为81%以上,苗种孵化率达到92%以上,得到的鱼苗经检测,雌性率为100%,苗种金鳟率(体色为金黄色)达到90%以上,苗种培养30天增重率为122%以上,成活率达到98%以上。本发明提供的杂交全雌金鳟鱼苗种培育方法与纯种金鳟交配产生的苗种相比,既保持金鳟率不变,又获得了具备杂交和全雌双重优势的金鳟苗种,具有较好的经济效益和市场价值。

    一种鱼类肌肉组织总RNA的提取方法

    公开(公告)号:CN104313013A

    公开(公告)日:2015-01-28

    申请号:CN201410505253.4

    申请日:2014-09-26

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明提供了一种鱼类肌肉组织总RNA的提取方法,将鱼类肌肉组织经液氮速冻,Trizol裂解液处理后低温高速离心,经硫酸铵、氯仿-正丁醇萃取后,再经异丙醇-醋酸钠和氯化锂沉淀,DNA酶处理后,经洗涤获得鱼类肌肉组织总RNA。本发明所述提取方法,可避免鱼肌肉组织中的内源性RNA酶、多糖(主要是肌糖原)和蛋白等对RNA提取的影响,获得一种低降解、多糖蛋白去除彻底的RNA分离纯化方法,提取的RNA纯度稳定、完整性好、重复性高、无污染,满足后续实验要求。