公开(公告)号：CN119413528A

公开(公告)日：2025-02-11

申请号：CN202411529237.9

申请日：2024-10-30

Applicant: 北京理工大学

Inventor： 张帅龙 ,  赵梦磊 ,  李航 ,  付斌 ,  郭宗良 ,  刘皓冰 ,  符荣鑫 ,  李博宇 ,  郭力瑗 ,  侯佳禄

IPC: G01N1/28 ,  G01N33/68 ,  C12N11/14 ,  C12N9/76

Abstract: 本发明公开了一种基于固定化酶和数字微流控技术结合的微量蛋白样本的高效酶解方法。本发明方法包括如下步骤：S1、将胰蛋白酶固定在磁珠上，得到固定化胰蛋白酶磁珠；S2、将蛋白样本溶液和还原剂溶液在数字微流控芯片中移动至混匀，进行第一次孵育；S3、将烷基化剂溶液和第一次孵育完毕的混合液在数字微流控芯片中移动至混匀，进行第二次孵育；S4、将固定化胰蛋白酶磁珠和第二次孵育完毕的混合液在数字微流控芯片中移动至混合，进行酶切反应，反应完毕后通过磁分离收集消化液。本发明方法可大大缩短酶解时间，实现自动化分析，显著简化蛋白质组学样本制备流程，显著减少样本损失，实现对微量蛋白的高效酶解。