一种通过外膜缺陷制备革兰氏阴性细菌感受态细胞的方法

    公开(公告)号:CN110878276B

    公开(公告)日:2021-06-29

    申请号:CN201811036515.1

    申请日:2018-09-06

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明公开了一种通过外膜缺陷制备革兰氏阴性细菌感受态细胞的方法。本发明方法包括:敲除和/或抑制革兰氏阴性细菌的基因组中与外膜脂多糖(LPS)相关的基因,获得外膜缺陷型菌株;利用所述外膜缺陷型菌株制备感受态细胞。本发明方法可提高野生型即可进行电转或化学转化的菌株(如嗜虫假单胞菌)的转化效率。更重要地,对于野生型不能进行电转或化学转化的革兰氏阴性菌株(如嗜盐菌等)而言,由此外膜缺陷型菌株制备的感受态细胞可以进行电转或化学转化DNA分子,可转化各种质粒,并表达其功能性的基因。该方法将在革兰氏阴性细菌基因编辑方面发挥重要应用。

    一种通过外膜缺陷制备革兰氏阴性细菌感受态细胞的方法

    公开(公告)号:CN110878276A

    公开(公告)日:2020-03-13

    申请号:CN201811036515.1

    申请日:2018-09-06

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明公开了一种通过外膜缺陷制备革兰氏阴性细菌感受态细胞的方法。本发明方法包括:敲除和/或抑制革兰氏阴性细菌的基因组中与外膜脂多糖(LPS)相关的基因,获得外膜缺陷型菌株;利用所述外膜缺陷型菌株制备感受态细胞。本发明方法可提高野生型即可进行电转或化学转化的菌株(如嗜虫假单胞菌)的转化效率。更重要地,对于野生型不能进行电转或化学转化的革兰氏阴性菌株(如嗜盐菌等)而言,由此外膜缺陷型菌株制备的感受态细胞可以进行电转或化学转化DNA分子,可转化各种质粒,并表达其功能性的基因。该方法将在革兰氏阴性细菌基因编辑方面发挥重要应用。