公开(公告)号：CN102533753A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201010583790.2

申请日：2010-12-08

申请人： 华中农业大学

发明人： 杨在清 ,  雷霆 ,  龙勤强 ,  陈小冬 ,  周磊

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/53

摘要： 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及一种猪ERp44基因启动子区转录调控元件的克隆及功能验证。首次鉴定了猪ERp44基因启动子区，并将5’端逐步缺失和部分调控元件被改变的启动子序列插入报告基因上游，构建了一系列真核表达质粒，通过转染哺乳动物细胞瞬时表达，确定了猪ERp44基因启动子区的关键转录调控元件，发现转录因子PPARγ可结合到ERp44基因启动子区的调控位点，通过抑制ERp44基因的转录促进脂肪细胞因子脂联素的分泌。本发明对研究ERp44在脂肪细胞中的表达调控机制以及脂联素的分泌调节具有重要意义，有助于从分子水平阐明脂联素的系统生理功能，为治疗肥胖和胰岛素抵抗提供相关理论基础。

公开(公告)号：CN102485910B

公开(公告)日：2013-08-14

申请号：CN201010582320.4

申请日：2010-12-06

申请人： 华中农业大学

发明人： 杨在清 ,  周磊 ,  陈小冬 ,  雷霆

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明涉及一种猪脂肪沉积检测方法。步骤包括：1)从被测的猪组织中抽提总RNA，反转录得cDNA样品；2)用SEQ ID NO：2和3所示的引物对对步骤1)的cDNA样品进行PCR扩增，得到如SEQ ID NO：1所示的基因片段；3)利用SEQ ID NO：5和6所示的引物对看家基因进行PCR扩增，得到如SEQ ID NO：4所示的基因片段；4)对步骤2)和步骤3)的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，在凝胶成像系统中比较其光密度值。本发明以1月龄、3月龄、5月龄和7月龄的脂肪猪和遗瘦肉型猪为检测对象，检测了脂肪细胞因子抵抗素(resistin)的表达水平，以resistin的蛋白水平来反应猪的脂肪沉积情况。本发明具有快速、简便、准确及不影响猪正常生长等优点，适于在养殖过程中动态监控猪的脂肪沉积情况。

公开(公告)号：CN102485910A

公开(公告)日：2012-06-06

申请号：CN201010582320.4

申请日：2010-12-06

申请人： 华中农业大学

发明人： 杨在清 ,  周磊 ,  陈小冬 ,  雷霆

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明涉及一种猪脂肪沉积检测方法。步骤包括：1)从被测的猪组织中抽提总RNA，反转录得cDNA样品；2)用SEQ ID NO：2和3所示的引物对对步骤1)的cDNA样品进行PCR扩增，得到如SEQ ID NO：1所示的基因片段；3)利用SEQ ID NO：5和6所示的引物对看家基因进行PCR扩增，得到如SEQ ID NO：4所示的基因片段；4)对步骤2)和步骤3)的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，在凝胶成像系统中比较其光密度值。本发明以1月龄、3月龄、5月龄和7月龄的脂肪猪和遗瘦肉型猪为检测对象，检测了脂肪细胞因子抵抗素(resistin)的表达水平，以resistin的蛋白水平来反应猪的脂肪沉积情况。本发明具有快速、简便、准确及不影响猪正常生长等优点，适于在养殖过程中动态监控猪的脂肪沉积情况。