公开(公告)号：CN116855528A

公开(公告)日：2023-10-10

申请号：CN202310822920.0

申请日：2023-07-06

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 罗靖 ,  李蕊蕊 ,  徐丰元 ,  陈訾强 ,  李周子迪 ,  魏倩怡 ,  戈穗 ,  胡海荣 ,  王彩云

IPC: C12N15/82 ,  C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  A01H6/56 ,  A01H6/20 ,  A01H5/02

Abstract: 本发明公开了一种调控百合花朵衰老的LoZAT12基因及应用，涉及植物基因工程技术领域，LoZAT12基因为东方百合‘西伯利亚’锌指蛋白类转录因子基因，其序列如SEQ ID NO.1所示；所述LoZAT12基因编码的蛋白质的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述LoZAT12基因的3’端非翻译区(3’‑UTR)序列如SEQ ID NO.3所示。LoZAT12基因在调控百合花朵衰老中的应用，包括如下步骤：(1)LoZAT12的表达模式分析；(2)LoZAT12基因的全长和3’‑UTR克隆；(3)LoZAT12基因在百合花朵中的瞬时沉默；(4)LoZAT12基因在百合花朵中的瞬时过表达；(5)LoZAT12基因在拟南芥中的稳定过表达。本发明突破了传统育种手段的障碍，为百合花朵衰老调控提供了重要的基因工程的方法。

公开(公告)号：CN115992169A

公开(公告)日：2023-04-21

申请号：CN202210782261.8

申请日：2022-07-05

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 罗靖 ,  李蕊蕊 ,  李周子迪 ,  张钰婕 ,  刘玉杰 ,  牛海瑞 ,  王彩云

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/65 ,  C12N15/56 ,  A01H6/56 ,  A01H5/02

Abstract: 本发明公开了一种高效的百合花被片瞬时表达方法及应用，涉及植物基因工程技术领域，以东方百合‘西伯利亚’盛开花朵的花被片为材料，利用农杆菌介导法，将携带GUS报告基因的PBI121载体转入百合花被片。通过正交试验确定农杆菌菌株类型、乙酰丁香酮(AS)浓度和抽吸气压三个因素对GUS基因瞬时表达效率的影响，利用该方法进行一个带GFP标签蛋白的Super1300载体的转化以及LoWRKY33、LoSAG5和LoSAG10等三个基因的功能验证，表明目的基因编码的蛋白能在百合花被片中顺利表达。该方法极大地缩短了百合中基因功能验证的时间，为百合花朵开放衰老过程中重要基因的筛选和功能研究奠定了良好的基础。

公开(公告)号：CN114717246A

公开(公告)日：2022-07-08

申请号：CN202210408653.8

申请日：2022-04-19

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 罗靖 ,  陈訾强 ,  李蕊蕊 ,  陈思嘉 ,  张通 ,  唐祺 ,  王彩云

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  C12N15/84 ,  A01H5/02 ,  A01H6/82 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域，公开了一种调控花朵衰老的RhBEE3基因及应用；RhBEE3基因为月季(Rosa hybrida‘Samantha’)基本螺旋‑环‑螺旋(bHLH)类转录因子，其核苷酸全长序列为SEQ ID.1所示，所编码的蛋白序列为SEQ ID.2所示，3’‑UTR序列为SEQ ID.3所示；基于3’‑UTR和全长序列分别构建了沉默和过表达载体，在月季花瓣中进行RhBEE3的瞬时沉默和过表达，通过观察表型变化、测定基因表达水平和电导率等发现RhBEE3可正向调控花朵衰老；通过叶盘法转化烟草(Nicotiana tabacum L.)，获得RhBEE3超表达的转基因植株，通过观察表型变化、测定基因表达水平和丙二醛(MDA)等发现RhBEE3超表达促进转基因株系花朵衰老；本发明突破了传统育种手段的障碍，为植物花朵衰老调控提供了重要的基因工程的方法。