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公开(公告)号:CN110656088A
公开(公告)日:2020-01-07
申请号:CN201810715685.6
申请日:2018-06-29
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明提供了一种稳定表达人源CaSR(钙敏感受体)基因的细胞模型,保藏在中国典型培养物保藏中心,命名为中国仓鼠卵巢细胞CHO-CaSR,保藏编号为CCTCC NO:C201893,其构建方法是,将SNAP标签与CaSR基因通过连接序列cacgcgt相连,得到融合有SNAP标签的CaSR基因,将其与表达载体连接构建含有CaSR基因的重组质粒,将重组质粒转染哺乳动物细胞,经药物筛选培养成能稳定表达CaSR基因的细胞株。该细胞模型既可用于筛选以CaSR为靶点的活性物质,又可通过SNAP-tag与均相时间分辨荧光技术(HTRF)联合应用,准确快速研究CaSR与其它蛋白的相互作用及其寡聚化。该细胞模型能够高通量、低成本的筛选以CaSR为靶点的活性物质,筛选方法步骤简单可控,成本低,通量高,具有很好的稳定性和可靠性。