公开(公告)号：CN111172180A

公开(公告)日：2020-05-19

申请号：CN202010010949.5

申请日：2020-01-06

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙坚 ,  贺骞 ,  余军军 ,  崔超月 ,  陈冲 ,  廖晓萍 ,  刘雅红

IPC: C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12N9/02 ,  A62D3/02 ,  C12R1/84 ,  A62D101/28

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的应用，为构建一种可分泌四环素类抗生素降解酶的真核表达系统，从而为四环素类抗生素的降解提供了一种新的途径，本发明在基因tet(X)序列的基础上经过优化得到适用于真核表达系统的tet(X)*序列，并首次使用pPIC9K载体将优化后的基因稳定的转入到毕赤酵母GS115中，构建得到一种工程酵母，该工程酵母具有表达Tet(X)蛋白的能力。通过工程酵母的表达效果试验可见，该工程酵母外源基因所表达的蛋白质在NADPH、Mg2+、O2的参与下表现出生物功能，对四环素类抗生素具有高效的降解作用。