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公开(公告)号：CN102586198A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210016518.5
申请日：2012-01-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及其制备与应用。本发明通过将siRNA-3D的转录模板、siRNA-L的转录模板、siRNA-2B的转录模板与siRNA-VP1的转录模板分别与U6启动子连接，克隆入载体pAdeno-X，得到能分别转录、串联结构的质粒，再将该质粒线性化后通过包装细胞包装，得到重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1。该重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒rAdeno-2B-VP1应用的效果。可见，本发明提供的重组质粒能有效抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。
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公开(公告)号：CN102399910A
公开(公告)日：2012-04-04
申请号：CN201110417367.X
申请日：2011-12-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下：5’-AGTAGGACCC TATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTT AAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强，可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤：模板为猪样本的cDNA，利用前述引物，进行PCR反应，得到扩增产物；通过电泳检测扩增产物，做出如下判断：没有扩增产物，证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染；扩增产物长度为154bp，证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪；扩增产物长度不是154bp，初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析，且实用价值高，能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。
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公开(公告)号：CN102512694B
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201210004296.5
申请日：2012-01-06
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K48/00
Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的生物制剂及其制备方法与应用。该生物制剂的活性部分为siRNA-VP1和siRNA-2B；siRNA-VP1的转录模板的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；siRNA-2B的转录模板的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过将siRNA-VP1的转录模板和siRNA-2B的转录模板分别与U6启动子连接，克隆入人复制缺陷型5型腺病毒质粒载体pAdeno-X，得到能分别转录、串联结构的质粒；接着通过包装细胞包装，得到该重组腺病毒Adeno-2B-VP1。通过实验证实，重组腺病毒Adeno-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒Adeno-2B和Adeno-VP1分别单独应用或联合应用的效果。该生物制剂能有抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。
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公开(公告)号：CN102586198B
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN201210016518.5
申请日：2012-01-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及其制备与应用。本发明通过将siRNA-3D的转录模板、siRNA-L的转录模板、siRNA-2B的转录模板与siRNA-VP1的转录模板分别与U6启动子连接，克隆入载体pAdeno-X，得到能分别转录、串联结构的质粒，再将该质粒线性化后通过包装细胞包装，得到重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1。该重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒rAdeno-2B-VP1应用的效果。可见，本发明提供的重组质粒能有效抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。
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公开(公告)号：CN103276104B
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201310154212.0
申请日：2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测，易于大范围推广应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103276103B
公开(公告)日：2014-09-24
申请号：CN201310153789.X
申请日：2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪流行性腹泻病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN103276104A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310154212.0
申请日：2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN102399910B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201110417367.X
申请日：2011-12-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下：5’-AGTAGGACCCTATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTTAAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强，可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤：模板为猪样本的cDNA，利用前述引物，进行PCR反应，得到扩增产物；通过电泳检测扩增产物，做出如下判断：没有扩增产物，证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染；扩增产物长度为154bp，证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪；扩增产物长度不是154bp，初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析，且实用价值高，能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。
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公开(公告)号：CN103276103A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310153789.X
申请日：2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪流行性腹泻病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN102512694A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201210004296.5
申请日：2012-01-06
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K48/00 , A61K31/713 , A61K39/235 , A61K35/76 , C12N15/113 , C12N15/861 , C12N7/01 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的生物制剂及其制备方法与应用。该生物制剂的活性部分为siRNA-VP1和siRNA-2B；siRNA-VP1的转录模板的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；siRNA-2B的转录模板的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过将siRNA-VP1的转录模板和siRNA-2B的转录模板分别与U6启动子连接，克隆入人复制缺陷型5型腺病毒质粒载体pAdeno-X，得到能分别转录、串联结构的质粒；接着通过包装细胞包装，得到该重组腺病毒Adeno-2B-VP1。通过实验证实，重组腺病毒Adeno-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒Adeno-2B和Adeno-VP1分别单独应用或联合应用的效果。该生物制剂能有抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。
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