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公开(公告)号：CN110205321A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910393360.5
申请日：2019-05-13
申请人： 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种DNA片段及其在构建表达红色荧光蛋白基因的重组流感病毒中的应用。本发明在H9N2流感病毒毒株的NS1基因后面插入mCherry荧光基因，其中，完整NS基因以NS1基因、mCHerry荧光基因和NEP基因依次连接而成，该基因与NEP基因中间用可以被蛋白酶识别并切割的PTV-1 2A序列相连，从而构成荧光蛋白标记的NS融合基因，其核苷酸如SEQ ID NO:1所示。本发明构建的重组流感病毒为可产生表达红色荧光蛋白的活病毒，其在病毒传代的过程中较为稳定，不影响病毒自身的功能，且生长曲线与滴度与野生病毒株相似，可将其用于后续研究，对抗流感病毒药物的研发、筛选和生产具有重要意义。
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公开(公告)号：CN110184284B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201910429596.X
申请日：2019-05-22
申请人： 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种携带NanoLuc基因的重组禽流感病毒及其在活体成像小鼠模型中的应用。本发明提供了一种DNA片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，可将其用于构建重组质粒、重组病毒和小鼠模型。本发明中构建一种重组禽流感病毒，其与野生型病毒的复制能力和致病力相近。在SPF鸡胚传代中，收集的4代病毒液都能检测到NanoLuc荧光素酶基因，具有良好的稳定性。本发明中还成功构建了活体成像小鼠模型，具有可视化功能，在不需要剖解小鼠情况下，能够检测流感病毒在小鼠的分布位置。能够实现纵向评估，在同一小鼠上连续时间观察流感病毒的感染动态过程，为流感病毒的研究补充了一种可视化工具。
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公开(公告)号：CN110184284A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910429596.X
申请日：2019-05-22
申请人： 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种携带NanoLuc基因的重组禽流感病毒及其在活体成像小鼠模型中的应用。本发明提供了一种DNA片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，可将其用于构建重组质粒、重组病毒和小鼠模型。本发明中构建一种重组禽流感病毒，其与野生型病毒的复制能力和致病力相近。在SPF鸡胚传代中，收集的4代病毒液都能检测到NanoLuc荧光素酶基因，具有良好的稳定性。本发明中还成功构建了活体成像小鼠模型，具有可视化功能，在不需要剖解小鼠情况下，能够检测流感病毒在小鼠的分布位置。能够实现纵向评估，在同一小鼠上连续时间观察流感病毒的感染动态过程，为流感病毒的研究补充了一种可视化工具。
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公开(公告)号：CN110205321B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201910393360.5
申请日：2019-05-13
申请人： 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种DNA片段及其在构建表达红色荧光蛋白基因的重组流感病毒中的应用。本发明在H9N2流感病毒毒株的NS1基因后面插入mCherry荧光基因，其中，完整NS基因以NS1基因、mCHerry荧光基因和NEP基因依次连接而成，该基因与NEP基因中间用可以被蛋白酶识别并切割的PTV‑1 2A序列相连，从而构成荧光蛋白标记的NS融合基因，其核苷酸如SEQ ID NO:1所示。本发明构建的重组流感病毒为可产生表达红色荧光蛋白的活病毒，其在病毒传代的过程中较为稳定，不影响病毒自身的功能，且生长曲线与滴度与野生病毒株相似，可将其用于后续研究，对抗流感病毒药物的研发、筛选和生产具有重要意义。
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