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公开(公告)号：CN115161388A
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202210574725.6
申请日：2022-05-24
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6869 , C12N15/10 , C40B50/06
Abstract: 本发明公开了一种基于细菌的CUT&Tag测序建库方法，包括以下操作步骤：步骤S1，载体构建，将荧光基因克隆到中拷贝质粒中，设计酶切位点利用一步克隆法进行酶切，从而构建一个含有荧光基因、HIS标签、目的蛋白所对应基因序列的质粒载体，并将该质粒转化到受测菌株的感受态细胞；步骤S2，利用CUT&Tag技术起始样品处理；步骤S3，利用CUT&Tag技术试剂盒进行试验。本技术转座酶原位激活产生片段，分辨率高，背景信号低，信噪比高；步骤简单，省去了超声破碎和免疫共沉淀，节省了时间；将转座体产生的片段与测序接头整合，进行了pcr富集；程序高度灵敏，需要的起始材料量较少。
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