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公开(公告)号:CN102816232A
公开(公告)日:2012-12-12
申请号:CN201110453668.8
申请日:2011-12-30
申请人: 华南师范大学
摘要: 本发明公开了花生2s清蛋白组分中2s-4b蛋白及其生产方法。本发明根据本实验室得到的花生2s蛋白双向电泳及2s-4b的MS质谱分析结果,设计一对简并引物,采用RACE的方法克隆出2s-4b基因。构建pET-32a-2s-4b融合表达载体,诱导得到大小约40kDa的2s-4b融合蛋白,对2s-4b融合进行复性、肠激酶酶切得到具有蛋白酶抑制剂活性的2s-4b蛋白。本发明2s-4b蛋白能诱导肺腺癌A549细胞凋亡,并对其凋亡机制进行了研究。具有广阔的应用前景。本发明蛋白的特点是,可在大肠杆菌中高效表达、稳定性好、纯度高且有高活性,适合规模化和产业化。
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公开(公告)号:CN102816232B
公开(公告)日:2014-07-16
申请号:CN201110453668.8
申请日:2011-12-30
申请人: 华南师范大学
摘要: 本发明公开了花生2s清蛋白组分中2s-4b蛋白及其生产方法。本发明根据本实验室得到的花生2s蛋白双向电泳及2s-4b的MS质谱分析结果,设计一对简并引物,采用RACE的方法克隆出2s-4b基因。构建pET-32a-2s-4b融合表达载体,诱导得到大小约40kDa的2s-4b融合蛋白,对2s-4b融合进行复性、肠激酶酶切得到具有蛋白酶抑制剂活性的2s-4b蛋白。本发明2s-4b蛋白能诱导肺腺癌A549细胞凋亡,并对其凋亡机制进行了研究。具有广阔的应用前景。本发明蛋白的特点是,可在大肠杆菌中高效表达、稳定性好、纯度高且有高活性,适合规模化和产业化。
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