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发明公开
一种棉铃虫中肠丝氨酸蛋白酶基因的原核表达方法无效

公开(公告)号：CN110079515A

公开(公告)日：2019-08-02

申请号：CN201910409021.1

申请日：2019-05-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 杨亦桦 , 王朦 , 张双双 , 吴益东

IPC: C12N9/64 , C12N15/57 , C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种棉铃虫中肠丝氨酸蛋白酶基因的原核表达方法。一种棉铃虫中肠丝氨酸蛋白酶基因的原核表达方法，包括以下步骤：提取棉铃虫幼虫中肠的总RNA，克隆棉铃虫中肠蛋白酶基因片段；将棉铃虫中肠蛋白酶基因构建在带有His和Gst双标签的Pet41表达载体上；重组蛋白的表达、纯化、浓缩、标签切除及鉴定。本方法直接表达棉铃虫中肠丝氨酸蛋白酶的成熟肽，避免了表达酶原后对酶原进行体外激活步骤，提高了表达具有生物活性的中肠丝氨酸蛋白酶的成功率。

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