公开(公告)号：CN109161515B

公开(公告)日：2021-12-03

申请号：CN201810886568.6

申请日：2018-08-06

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘文斌 ,  曹秀飞 ,  蒋广震 ,  戴永军 ,  袁向阳 ,  王聪聪 ,  黄洋洋

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了团头鲂原代肝细胞的分离培养方法。选取健康、体重为30‑50g的团头鲂幼鱼，用1％高锰酸钾进行全身消毒，从尾静脉采血后，无菌解剖采取肝脏。用胶原酶消化后经200目细胞筛过滤得到细胞悬液，经红细胞裂解液去除肝细胞中多余的红细胞，再经梯度离心去除细胞碎片。向得到的细胞沉淀加入适量完全培养基悬浮细胞，然后用细胞计数仪计算并调整细胞浓度，铺板后，放入28℃，5％CO2的细胞培养箱培养，48小时后观察贴壁情况。本发明创新性结合了研究物种的特点来分离培养肝细胞，得到的细胞活率高达90％以上，符合原代培养要求，为进一步开展团头鲂原代肝细相关实验提供理论依据及技术支持。

公开(公告)号：CN109161515A

公开(公告)日：2019-01-08

申请号：CN201810886568.6

申请日：2018-08-06

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘文斌 ,  曹秀飞 ,  蒋广震 ,  戴永军 ,  袁向阳 ,  王聪聪 ,  黄洋洋

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了团头鲂原代肝细胞的分离培养方法。选取健康、体重为30-50g的团头鲂幼鱼，用1％高锰酸钾进行全身消毒，从尾静脉采血后，无菌解剖采取肝脏。用胶原酶消化后经200目细胞筛过滤得到细胞悬液，经红细胞裂解液去除肝细胞中多余的红细胞，再经梯度离心去除细胞碎片。向得到的细胞沉淀加入适量完全培养基悬浮细胞，然后用细胞计数仪计算并调整细胞浓度，铺板后，放入28℃，5％CO2的细胞培养箱培养，48小时后观察贴壁情况。本发明创新性结合了研究物种的特点来分离培养肝细胞，得到的细胞活率高达90％以上，符合原代培养要求，为进一步开展团头鲂原代肝细相关实验提供理论依据及技术支持。

公开(公告)号：CN117814153A

公开(公告)日：2024-04-05

申请号：CN202410114560.3

申请日：2024-01-26

Applicant: 南京农业大学 ,  南京诺齐生物科技有限公司

Inventor： 蒋广震 ,  王建峰 ,  郭慧星 ,  吕东海 ,  华皓坤 ,  曹秀飞 ,  唐志刚 ,  刘文斌

IPC: A01K61/59 ,  A23K20/105 ,  A23K20/168 ,  A23K50/80 ,  A23K10/22 ,  A23K10/37 ,  A23K20/158 ,  A23K20/163 ,  A23K20/28 ,  A23K30/00 ,  A23K10/18 ,  G01N33/00 ,  G01D21/02 ,  G01N33/483 ,  C12Q1/60

Abstract: 本发明公开了一种中华绒螯蟹饲料中胆固醇替代研究及促进性腺发育的方法，通过测定不同胆固醇含量组以及不同角鲨烯含量组中华绒螯蟹的生长性能以及中华绒螯蟹幼蟹在不同日粮饲喂下的肝胰腺胆固醇沉积量，制作中华绒螯蟹幼蟹在不同胆固醇水平饲喂下肝胰腺胆固醇沉积量的线性模型，并分析不同添加量角鲨烯替代胆固醇的生物学效价，该方法可作为筛选胆固醇替代物的有效方法。此外，试验结果表明，与现有的市售中华绒螯蟹饲料和冰鲜鱼养殖相比，通过向中华绒螯蟹饲料基础配方中添加0.4％的角鲨烯，可以有效改善育成期中华绒螯蟹生长和性腺发育不佳的情况，基本达到冰鲜鱼养殖效果。

公开(公告)号：CN110317818A

公开(公告)日：2019-10-11

申请号：CN201910605481.1

申请日：2019-07-05

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 蒋广震 ,  曹秀飞 ,  刘文斌 ,  李向飞 ,  张定东

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/12 ,  C12Q1/48 ,  A61K45/00 ,  A61K31/37 ,  A61P1/16

Abstract: 本发明提供了IRE1蛋白及其应用。本发明公开了IRE1抑制剂4μ8c能有效抑制IRE1的核酸内切酶活性，阻断XBP1剪切，增加MTTP蛋白表达，促进VLDL合成，增加肝脏脂质外泌。本发明还公开了基于所述IRE1/MTTP为靶点，筛选促进动物肝脏脂质外泌和防治营养性脂肪肝有效物质的方法。本发明首次揭示IRE1蛋白在调节肝脏脂质外泌过程中具有重要的作用，从而为防治脂肪肝药物的研究提供了有效的靶点。