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发明公开
一种检测猪细小病毒抗体的可视化蛋白芯片制备方法和检测方法无效

公开(公告)号：CN108318684A

公开(公告)日：2018-07-24

申请号：CN201810301162.7

申请日：2018-04-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 周斌 , 侯金秀 , 阚琳

IPC: G01N33/569

Abstract: 本发明提供一种检测猪细小病毒抗体的可视化蛋白芯片的制备方法，优化PPV VP2密码子，克隆至pColdI后，转化至大肠杆菌Rossetta 2，进行PPV VP2蛋白的表达。成功表达的VP2蛋白用镍磁珠纯化。将纯化后的PPV VP2蛋白点样到环氧基片，于37℃干燥过夜。次日将芯片表面贴上芯片围栏，每个围栏封闭、洗涤即得。检测时，将封闭后的芯片加入PPV抗体阳性猪血清，洗涤、干燥，加入兔抗猪金标二抗孵育、洗涤、干燥，每个围栏加入银染显色液显色，洗涤后干燥观察结果。本发明提供的检测猪细小病毒抗体的可视化蛋白芯片可用于实验室检测，也可满足基层养殖场，能够更快速、方便、高通量地检测猪细小病毒抗体的蛋白芯片诊断技术，及时监测猪群细小病毒抗体水平。

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