一种分别定量细菌荚膜多糖和脂多糖的方法

    公开(公告)号:CN115561190B

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202211527380.5

    申请日:2022-12-01

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种分别定量细菌荚膜多糖和脂多糖的方法,属于生物技术领域。该方法包括利用物理方法将细菌样品的菌体外膜上的脂多糖释放出来,离心分别收集第一上清液和第一沉淀;将第一上清液去除蛋白和脂质杂质后,加入沉淀剂,得到脂多糖干粉,复溶得到脂多糖溶液,利用硫酸‑苯酚法定量脂多糖;将第一沉淀用清洗液洗涤后加入表面活性剂处理,离心收集第二上清液;将第二上清液去除蛋白和脂质杂质后,加入沉淀剂,得到荚膜多糖干粉;将荚膜多糖干粉加入低浓度盐酸复溶,室温孵育后,得到荚膜多糖溶液,利用糖醛酸内酯测定法定量荚膜多糖。该方法实现在不裂解细菌菌体的情况下同时分离并定量脂多糖和荚膜多糖,提高了纯度和准确度。

    一种ST11-K64型肺炎克雷伯菌的荚膜多糖及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN118726506B

    公开(公告)日:2024-11-22

    申请号:CN202411228037.X

    申请日:2024-09-03

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种ST11‑K64型肺炎克雷伯菌的荚膜多糖及其制备方法与应用,属于生物技术领域,本发明的荚膜多糖以ST11‑K64型肺炎克雷伯菌为来源,经过分离纯化后获得的肺炎克雷伯菌中荚膜多糖,其分子结构主链是→[6)‑β‑D‑Manp‑(1]3→[4)‑β‑D‑Glcp‑(1]6→,4条侧链是β‑D‑Rhap‑(1→3)‑β‑D‑Rhap‑(1→、β‑D‑Manp‑(1→、β‑D‑Glcp‑(1→[3)‑β‑D‑Glcp‑(1]2→、β‑D‑Glcp‑(1→,其糖醛酸还原后单糖组成为摩尔比0.200:0.583:0.217的鼠李糖、葡萄糖、甘露糖;同时公开了该多糖组分产品的制备方法。本发明的荚膜多糖组分产品具有诱导小鼠脓毒症模型的作用,可以作为脓毒症动物模型诱导剂应用于脓毒症基础研究领域。

    一种分别定量细菌荚膜多糖和脂多糖的方法

    公开(公告)号:CN115561190A

    公开(公告)日:2023-01-03

    申请号:CN202211527380.5

    申请日:2022-12-01

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种分别定量细菌荚膜多糖和脂多糖的方法,属于生物技术领域。该方法包括利用物理方法将细菌样品的菌体外膜上的脂多糖释放出来,离心分别收集第一上清液和第一沉淀;将第一上清液去除蛋白和脂质杂质后,加入沉淀剂,得到脂多糖干粉,复溶得到脂多糖溶液,利用硫酸‑苯酚法定量脂多糖;将第一沉淀用清洗液洗涤后加入表面活性剂处理,离心收集第二上清液;将第二上清液去除蛋白和脂质杂质后,加入沉淀剂,得到荚膜多糖干粉;将荚膜多糖干粉加入低浓度盐酸复溶,室温孵育后,得到荚膜多糖溶液,利用糖醛酸内酯测定法定量荚膜多糖。该方法实现在不裂解细菌菌体的情况下同时分离并定量脂多糖和荚膜多糖,提高了纯度和准确度。

    一种ST11-K64型肺炎克雷伯菌的荚膜多糖及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN118726506A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202411228037.X

    申请日:2024-09-03

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种ST11‑K64型肺炎克雷伯菌的荚膜多糖及其制备方法与应用,属于生物技术领域,本发明的荚膜多糖以ST11‑K64型肺炎克雷伯菌为来源,经过分离纯化后获得的肺炎克雷伯菌中荚膜多糖,其分子结构主链是→[6)‑β‑D‑Manp‑(1]3→[4)‑β‑D‑Glcp‑(1]6→,4条侧链是β‑D‑Rhap‑(1→3)‑β‑D‑Rhap‑(1→、β‑D‑Manp‑(1→、β‑D‑Glcp‑(1→[3)‑β‑D‑Glcp‑(1]2→、β‑D‑Glcp‑(1→,其糖醛酸还原后单糖组成为摩尔比0.200:0.583:0.217的鼠李糖、葡萄糖、甘露糖;同时公开了该多糖组分产品的制备方法。本发明的荚膜多糖组分产品具有诱导小鼠脓毒症模型的作用,可以作为脓毒症动物模型诱导剂应用于脓毒症基础研究领域。

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