一种基于AP-SWATH技术在植物中筛选获取诱饵蛋白的互作蛋白的方法

    公开(公告)号:CN119395302A

    公开(公告)日:2025-02-07

    申请号:CN202411537430.7

    申请日:2024-10-31

    Abstract: 本发明公开了一种基于AP‑SWATH技术在植物中筛选获取诱饵蛋白的互作蛋白的方法,获得融合亲和标签的过表达诱饵基因的转基因植物后,提取植物总蛋白,以免疫沉淀的方法捕获蛋白质复合物,以检测获取诱饵蛋白的互作蛋白。本发明首次在植物体内通过AP‑SWATH技术筛选互作蛋白,在植物中稳定且高效寻找高特异性的准确富集到靶蛋白的特异性相互作用蛋白,并实现复合蛋白质的准确鉴定和定量;其验证蛋白质互作过程效率高,可对植物体内某一确定基因的互作蛋白进行捕获,更具广泛性。所获得的样品回收率高和捕获瞬态相互作用的操作速度快,更容易获得高纯度蛋白复合物。

    一种植物可变剪接的实时荧光定量PCR检测方法及应用

    公开(公告)号:CN114032320A

    公开(公告)日:2022-02-11

    申请号:CN202111224481.0

    申请日:2021-10-21

    Abstract: 本发明公开了一种植物可变剪接的实时荧光定量PCR检测方法及应用,该方法是利用绝对定量和相对定量两种方法计算不同转录本的表达量差异。本发明的技术能够对植物转录本进行快速检测和分析,为植物可变剪接的研究工作提供了检测手段和分析技术。本发明的一种植物可变剪接的实时荧光定量PCR检测方法及应用,过qRT‑PCR收集基因不同转录本特异性区段的荧光信号,绘制标准曲线计算不同转录本的精确拷贝数量,以检测植物可变剪接事件存在与否,并分析不同处理或状态下的可变剪接事件变化,为植物发育或逆境胁迫等过程中可变剪接机制的研究提供佐证。

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