公开(公告)号：CN107354143A

公开(公告)日：2017-11-17

申请号：CN201710689763.5

申请日：2017-08-11

申请人： 南京林业大学 ,  江苏康缘药业股份有限公司

发明人： 赵林果 ,  石学佳 ,  萧伟 ,  王振中 ,  李琦

IPC分类号： C12N11/08 ,  C12P19/14

CPC分类号： Y02P20/588 ,  C12N11/08 ,  C12N9/2445 ,  C12P19/14 ,  C12Y302/01021

摘要： 一种固定化β-葡萄糖苷酶及其制备方法和应用，步骤为（1）大孔树脂预处理；（2）大孔吸附树脂NKA-9聚醚酰亚胺表面改性；（3）大孔树脂吸附β-葡萄糖苷酶；（4）戊二醛交联反应修饰。本发明首次利用金属离子Zn2+作为利用大孔吸附树脂固定化β-葡萄糖苷酶的激活剂、热稳定剂。Zn2+的参与使β-葡萄糖苷酶的催化效率提高了20%以上；使固定化酶NKA-9II的催化效率提高了92%以上。相对于起始酶活，Zn2+的参与，在85℃条件下，温育7 h，固定化酶NKA-9II的酶活还保持在80%以上；90℃条件下温育7 h，固定化酶NKA-9II的酶活还保持在54%以上。

公开(公告)号：CN106318957A

公开(公告)日：2017-01-11

申请号：CN201610945270.9

申请日：2016-10-26

申请人： 南京林业大学

发明人： 赵林果 ,  葛林 ,  石学佳 ,  裴建军 ,  吴涛 ,  陈安娜

IPC分类号： C12N15/56 ,  C12N9/24 ,  C12P19/60

CPC分类号： C12N9/2402 ,  C12P19/60 ,  C12Y302/0104

摘要： 土曲霉CCF 3059 α-L-鼠李糖苷酶突变体及其应用，包括如SEQ ID NO:2所示的D594Q基因、SEQ ID NO:3所示的D594R基因、SEQ ID NO:4所示的D594C基因、SEQ ID NO:5所示的G827K基因、SEQ ID NO:6所示的G827M基因和SEQ ID NO:7所示的G828A基因。突变酶MRha-D594Q 最适温度和原酶MRha均为65℃；但与原酶MRha相比，突变酶MRha-D594Q在70℃和75℃时仍保持较高的酶活性；添加山梨醇能够进一步提高突变酶MRha-D594Q的热稳定性，在70℃的半衰期提高了7.8倍。

公开(公告)号：CN106318957B

公开(公告)日：2019-05-07

申请号：CN201610945270.9

申请日：2016-10-26

申请人： 南京林业大学

发明人： 赵林果 ,  葛林 ,  石学佳 ,  裴建军 ,  吴涛 ,  陈安娜

IPC分类号： C12N15/56 ,  C12N9/24 ,  C12P19/60

摘要： 土曲霉CCF 3059 α‑L‑鼠李糖苷酶突变体及其应用，包括如SEQ ID NO:2所示的D594Q基因、SEQ ID NO:3所示的D594R基因、SEQ ID NO:4所示的D594C基因、SEQ ID NO:5所示的G827K基因、SEQ ID NO:6所示的G827M基因和SEQ ID NO:7所示的G828A基因。突变酶MRha‑D594Q最适温度和原酶MRha均为65℃；但与原酶MRha相比，突变酶MRha‑D594Q在70℃和75℃时仍保持较高的酶活性；添加山梨醇能够进一步提高突变酶MRha‑D594Q的热稳定性，在70℃的半衰期提高了7.8倍。