公开(公告)号：CN114134121A

公开(公告)日：2022-03-04

申请号：CN202111473851.4

申请日：2021-11-30

申请人： 南通大学

发明人： 刘建喜 ,  张志恒 ,  孟庆余 ,  高永静

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/66 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/91

摘要： 本发明公开了一种基于荧光素酶的新冠病毒棘突蛋白和人血管紧张素酶互作检测细胞模型及应用，采用NanoBiT荧光素酶互补原理，在ACE2蛋白的氨基端和RBD羧基端分别接入荧光素大小亚基，两者互补得到有功能的可催化荧光底物发光的功能性复合物。利用该方法检测蛋白抑制剂活性具有灵敏，快捷，信号强、可逆、干扰小、检测方便和成本可控等优点。

公开(公告)号：CN114134119A

公开(公告)日：2022-03-04

申请号：CN202111443254.7

申请日：2021-11-30

申请人： 南通大学

发明人： 高永静 ,  刘建喜 ,  孟庆余 ,  张志恒

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N5/071 ,  C12N15/85 ,  C12N15/53 ,  C12Q1/66

摘要： 本发明公开了一种基于荧光素酶的GPR151孤儿受体配基高通量药物筛选细胞模型及应用，首先将编码SRE荧光素酶的质粒稳定转染到HEK293细胞；再将编码有标签的GPR151和GPR176的质粒分别转染该HEK293细胞，利用抗生素稳定筛选4周得到稳定表达株；本发明可用于对受体的配基筛选，甄别和核实，也可用于其它受体的激动剂和抑制剂的高通量筛选。本发明采用NanoBiT技术，不受于偶联G蛋白类型的限制，具有标签小、灵敏、快捷、可逆和适于高通量筛选等优势。

公开(公告)号：CN114107437A

公开(公告)日：2022-03-01

申请号：CN202111473852.9

申请日：2021-11-30

申请人： 南通大学

发明人： 刘建喜 ,  张志恒 ,  刘霞 ,  孟庆余 ,  高永静 ,  张翼德

IPC分类号： C12Q1/66 ,  C12Q1/37

摘要： 本发明公开了一种基于荧光素酶亚基互补的主蛋白酶抑制剂活性检测系统及在药物筛选中的应用，将含有蛋白酶酶切位点的多肽序列插入到荧光素酶的两个亚基之间。在蛋白酶没有活性的情况下，荧光素酶两个亚基相互作用的完整性得到保护，因此整个结构具有荧光素酶活性，可以催化化学底物发出荧光。在蛋白酶表现出活性的情况下，连接荧光素酶两个亚基之间的蛋白酶酶切位点的多肽序列被蛋白酶切断，亚基相互作用的完整性被破坏，荧光素酶不再具有荧光素酶活性。据此可以评价主蛋白酶在各种化合物影响下的活性，进而推断化合物对主蛋白酶活性的抑制能力。