公开(公告)号：CN117625612A

公开(公告)日：2024-03-01

申请号：CN202311612553.8

申请日：2023-11-29

申请人： 台州恩泽医疗中心(集团)

发明人： 王学全 ,  杨海华 ,  张乐乐 ,  郭乐 ,  丁嘉佩

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10

摘要： 本申请涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术特异性靶向敲除IGF2BP1的sgRNA载体设计及其在肺腺癌应用，通过选择自带Cas9蛋白的慢病毒敲除载体，操作简单，慢病毒敲除系统在转染细胞时对细胞毒性小，阳性率高。双sgRNA通过靶向两个位点，比起单靶点的基因敲除方法，能降低脱靶率，提高基因敲除的效率。该sgRNA特异性强，实现了蛋白水平的完全敲除。可以通过本发明来构建不同目的基因的敲除载体，且无种属限制。本发明揭露IGF2BP1在人肺腺癌细胞中可与HNF4α的mRNA结合，并促进其m6A修饰，增加其稳定性，并促进HNF4α蛋白的表达。