公开(公告)号：CN116083421A

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN202310214856.8

申请日：2023-03-08

申请人： 吉林农业大学

发明人： 孙喆 ,  周昱伽 ,  邵宏秋 ,  盛潇潇 ,  贺承光 ,  马红霞 ,  孔令聪 ,  王一鸣 ,  张海鹏 ,  武子淳 ,  李昊轩 ,  刘悦华 ,  王雨婷 ,  崔琪 ,  王秀然 ,  卢天成 ,  官丽莉 ,  周海蒙 ,  梁月东

IPC分类号： C12N15/10 ,  C12Q1/6806

摘要： 本发明公开了一种点击化学反应捕获细菌新生RNA方法，首先利用利福平对培养中的细菌的转录起始进行抑制，继续培养细菌时转录进行终结后去除利福平；在恢复生长前加入5‑乙炔尿密啶标记新生RNA，再利用点击化学反应将新生RNA与生物素‑PEG2‑C6‑叠氮长臂配体结合；再通过链霉亲和素与生物素的免疫亲和反应将磁珠与新生RNA结合，通过磁珠筛选纯化得到新生RNA。与现有技术相比，本发明利用转录抑制剂利福平将细菌转录同步后，利用点击化学反应将新形成的转录产物通过铜催化叠氮乙炔环化反应(CuAAC)进行提取分离的方法，通过一些基本的分子生物学实验操作即可将新生RNA捕获；为后续实验提供了可靠的测试对象。