公开(公告)号：CN115152623A

公开(公告)日：2022-10-11

申请号：CN202210479419.4

申请日：2022-05-05

申请人： 吉林大学

发明人： 鞠会艳 ,  丛登立 ,  张婷婷 ,  郭铭凯 ,  省慧 ,  范冰玉

IPC分类号： A01H1/04 ,  A01C1/08 ,  A01G22/20 ,  A01H6/46 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/686

摘要： 本发明公开了一种含潮霉素抗性基因的转基因玉米的三环筛选方法，将转基因玉米种子消毒后放到含有潮霉素的MS培养基上，待种子发芽出苗后，初步判断在潮霉素培养基上长出的玉米苗具有潮霉素抗性；将获得的在含潮霉素培养基上长出的玉米苗移栽到装有营养土的培养盆中，定期浇水，待玉米苗长到3叶1心时用潮霉素涂抹玉米叶片，在1～2d后未长出黄斑，进一步判断该玉米植株是含潮霉素的转基因玉米；将涂抹潮霉素2天后未长出黄斑的玉米植株的叶片剪下1片，采用CTAB法提取玉米叶片基因组DNA，并用潮霉素抗性基因HPT引物进行PCR扩增检测，若从该叶片的基因组DNA中扩增获得潮霉素抗性基因片段，则可确定该玉米植株是含有潮霉素抗性标记基因HPT的转基因玉米植株。