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公开(公告)号:CN118028426A
公开(公告)日:2024-05-14
申请号:CN202410438047.X
申请日:2024-04-12
Applicant: 哈尔滨工业大学(深圳)(哈尔滨工业大学深圳科技创新研究院)
Abstract: 一种基于DHPS蛋白的大肠杆菌体外表达载体的磺胺类污染物检测方法,包括如下步骤:从肾形虫中分离出磺胺类抗生素靶蛋白DHPS的基因folP,通过基因工程技术将其克隆至大肠杆菌BL21表达载体pET‑28a(+)中,构建得到基于DHPS蛋白的大肠杆菌体外表达载体pET‑Col–DHPS;将所述大肠杆菌体外表达载体pET‑Col‑DHPS配置于待测水环境中,检测暴露预定时长时的载体菌中的DHPS酶活性,并根据预先建立的磺胺类抗生素浓度与载体菌中的DHPS酶活性的剂量‑效应方程确定所述待测水环境中的磺胺类抗生素浓度。本发明利用载体菌的磺胺类污染物检测方法,克服了传统方法在灵敏度、选择性、成本和操作便利性方面的限制,为环境中磺胺类抗生素的检测提供一种新型且高效的生物检测工具,并具有高精确性和广适性。